Un anticuerpo humano o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a ligando 4 similar a delta humano(hD114),

comprendiendo dicho anticuerpo o fragmento de anticuerpo una región variable de la cadenapesada/región variable de la cadena ligera (HCVR/LCVR) seleccionada de los pares de secuencias de aminoácidosde SEC ID Nº: 429/437 y 901/903.

Anticuerpos humanos para ligando 4 similar a delta humano

Antecedentes

La ruta de señalización de Notch es un sistema para la comunicación célula a célula usada por una amplia gama de eucariotas para muchos procesos biológicos tales como diferenciación, proliferación y homeostasis. 4 similar a delta (DI4) o ligando 4 similar a delta (DII4) (denominado en lo sucesivo “DII4”) es un miembro de la familia delta de ligandos Notch que presenta expresión altamente selectiva por endotelio vascular (Shutter y col. (2000) Genes Develop. 14:1313-1318) . DII4 es un ligando para receptores Notch, que incluyen Notch1 y Notch 4. Las secuencias de ácido nucleico y de aminoácidos para DII4 humano se muestran en SEC ID Nº: 1-2, respectivamente.

Los procedimientos para producir anticuerpos útiles como agentes terapéuticos humanos incluyen generación de anticuerpos quiméricos y anticuerpos humanizados (véase, por ejemplo, el documento U.S. 6.949.245) . Véanse, por ejemplo, los documentos WO 94/02602 (Abgenix) y U.S. 6.596.541 (Regeneron Pharmaceuticals) que describen procedimientos de generación de ratones transgénicos no humanos que pueden producir anticuerpos humanos. Hainaud y col. (Cancer Research 2006 66 : (17) ) desvelan la función de DLL4 en el remodelado de receptores de tumores.

La solicitud de patente japonesa 2003/047470A2 (Asahi Kasei Kogyo) describe anticuerpos para la porción extracelular de la proteína del ligando Notch humana.

Breve resumen de la invención

En un primer aspecto, la invención proporciona anticuerpos humanos, preferentemente anticuerpos humanos recombinantes, que se unen específicamente a ligando 4 similar a delta humano (hDII4) . El anticuerpo de la invención es un anticuerpo humano o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a ligando 4 similar a delta humano (hDII4) , comprendiendo dicho anticuerpo o fragmento de anticuerpo una región variable de la cadena pesada/región variable de la cadena ligera (HCVR/LCVR) seleccionada de los pares de secuencias de aminoácidos de SEC ID Nº: 429/437 y 901/903. Estos anticuerpos se caracterizan por unirse a hDII4 con alta afinidad y por la capacidad para neutralizar la actividad de DII4. Los anticuerpos de la invención pueden bloquear la unión de DII4 a su (s) receptor (es) Notch, y por tanto, inhibir la señalización por DII4. Los anticuerpos pueden ser de longitud completa (por ejemplo, un anticuerpo IgG1 o IgG4) o pueden comprender sólo una porción de unión a antígeno (por ejemplo, un fragmento Fab, F (ab') 2 o scFv) , y pueden modificarse para efectuar la funcionalidad, por ejemplo, para eliminar funciones efectoras residuales (Glu que elimina funciones efectoras residuales (Reddy y col. (2000) J. Immunol. 164:1925-1933) .

La invención proporciona además una molécula de ácido nucleico aislada que codifica un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de la invención y un vector que comprende dicha molécula de ácido nucleico.

La invención proporciona adicionalmente una célula huésped que comprende un vector de la invención. En un aspecto relacionado, la invención también proporciona un procedimiento para producir un anticuerpo anti-DII4 humano o fragmento de unión a antígeno del mismo que comprende cultivar células huésped de la invención en condiciones que permitan la producción del anticuerpo o fragmento del mismo y la recuperación del anticuerpo o fragmento así producido.

La invención proporciona además el uso de un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo de la invención en la preparación de un medicamento para tratar cáncer en un ser humano.

La invención también proporciona un anticuerpo o fragmento de anticuerpo de la invención para su uso en un procedimiento para tratar cáncer en un paciente humano.

Por tanto, en este documento se describe un anticuerpo que comprende una región variable de la cadena pesada (HCVR) seleccionada del grupo que consiste en SEC ID Nº: 4, 20, 36, 52, 68, 84, 100, 116, 132, 148, 164, 180, 196, 212, 228, 244, 260, 276, 292, 308, 324, 340, 356, 372, 397, 413, 429, 445, 461, 477, 493, 509, 525, 541, 557, 573, 589, 605, 621, 637, 653, 669, 685, 701, 717, 733, 749, 765, 781, 797, 813, 893, 897, 901, 905, 909, 913, 917, 921, 925, 935, 939, 943 y 947 o una secuencia sustancialmente idéntica de la misma. En la invención, la HCVR es la secuencia de aminoácidos de SEC ID Nº: 429 ó 901.

Adicionalmente, en este documento se describe un anticuerpo que comprende una región variable de la cadena ligera (LCVR) seleccionada del grupo que consiste en SEC ID Nº: 12, 28, 44, 60, 76, 92, 108, 124, 140, 156, 172, 188, 204, 220, 236, 252, 268, 284, 300, 316, 332, 348, 364, 380, 405, 421, 437, 453, 469, 485, 501, 517, 533, 549, 565, 581, 597, 613, 629, 645, 661, 677, 693, 709, 725, 741, 757, 773, 789, 805, 821, 895, 899, 903, 907, 911, 915, 919, 923, 927, 937, 941, 945 y 949 o una secuencia sustancialmente idéntica de la misma. En la invención, la LCVR es la secuencia de aminoácidos de SEC ID Nº: 437 ó 903.

Adicionalmente, en este documento se describe un anticuerpo que comprende una HCVR seleccionada del grupo que consiste en SEC ID Nº: 4, 20, 36, 52, 68, 84, 100, 116, 132, 148, 164, 180, 196, 212, 228, 244, 260, 276, 292, 308, 324, 340, 356, 372, 397, 413, 429, 445, 461, 477, 493, 509, 525, 541, 557, 573, 589, 605, 621, 637, 653, 669, 685, 701, 717, 733, 749, 765, 781, 797, 813, 893, 897, 901, 905, 909, 913, 917, 921, 925, 935, 939, 943 y 947 o una secuencia sustancialmente idéntica de la misma, y una LCVR seleccionada del grupo que consiste en SEC ID Nº: 12, 28, 44, 60, 76, 92, 108, 124, 140, 156, 172, 188, 204, 220, 236, 252, 268, 284, 300, 316, 332, 348, 364, 380, 405, 421, 437, 453, 469, 485, 501, 517, 533, 549, 565, 581, 597, 613, 629, 645, 661, 677, 693, 709, 725, 741, 757, 773, 789, 805, 821, 895, 899, 903, 907, 911, 915, 919, 923, 927, 937, 941, 945 y 949 o una secuencia sustancialmente idéntica de la misma. En una realización preferida de la invención, las HCVR/LCVR son los pares de secuencias de aminoácidos SEC ID Nº: 429/437 ó 901/903.

Por tanto, en este documento se describe un anticuerpo humano o fragmento de anticuerpo que comprende una región determinante de la complementariedad de la cadena pesada 1 (CDR1) seleccionada del grupo que consiste en SEC ID Nº: 6, 22, 38, 54, 70, 86, 102, 118, 134, 150, 166, 182, 198, 214, 230, 246, 262, 278 294, 310, 326, 342, 358, 374, 399, 415, 431, 447, 463, 479, 495, 511, 527, 543, 559, 575, 591, 607, 623, 639, 655, 671, 687, 703, 711119, 735, 751, 767, 783, 799, 815, 831, 847, 863 y 879, o una secuencia sustancialmente idéntica de la misma.

Adicionalmente, en este documento se describe un anticuerpo humano o fragmento de anticuerpo que comprende una CDR2 de la cadena pesada seleccionada del grupo que consiste en SEC ID Nº: 8, 24, 40, 56, 72, 88, 104, 120, 136, 152, 168, 184, 200, 216, 232, 248, 264, 280, 296, 312, 328, 344, 360, 376, 401, 417, 433, 449, 465, 481, 497, 513, 529, 545, 561, 577, 593, 609, 625, 641, 657, 673, 689, 705, 721, 737, 753, 769, 785, 801, 817, 833, 849, 865 y 881, o una secuencia sustancialmente idéntica de la misma.

Adicionalmente, en este documento se describe un anticuerpo humano o fragmento de anticuerpo que comprende una CDR3 de la cadena pesada seleccionada del grupo que consiste en SEC ID Nº: 10, 26, 42, 58, 74, 90, 106, 122, 138, 154, 170, 186, 202, 218, 234, 250, 266, 282, 298, 314, 330, 346, 362, 378, 403, 419, 435, 451, 467, 483, 499, 515, 531, 547, 563, 579, 595, 611, 627, 643, 659, 675, 691, 707, 723, 739, 755, 771, 787, 803, 819, 835, 851, 867 y 883, o una secuencia sustancialmente idéntica de la misma.

Por tanto, en este documento se describe un anticuerpo humano o fragmento de anticuerpo que comprende una CDR1 de la cadena pesada seleccionada del grupo que consiste en SEC ID Nº: 6, 22, 38, 54, 70, 86. 102, 118, 134, 150, 166, 182, 198, 214, 230, 246, 262, 278 294, 310, 326, 342, 358, 374, 399, 415, 431, 447, 463, 479, 495, 511, 527, 543, 559, 575, 591, 607, 623, 639, 655, 671, 687, 703, 711119, 735, 751, 767, 783, 799, 815, 831, 847, 863 y 879, o una secuencia sustancialmente idéntica de la misma; una CDR2 de la cadena pesada seleccionada del grupo que consiste en SEC ID Nº: 8, 24, 40, 56, 72, 88, 104, 120, 136, 152, 168, 184, 200, 216, 232, 248, 264, 280, 296, 312, 328, 344, 360, 376, 401, 417, 433, 449, 465, 481, 497, 513, 529, 545, 561, 577, 593, 609, 625, 641, 657, 673, 689, 705, 721, 737, 753, 769, 785, 801, 817, 833, 849, 865 y 881, o una secuencia sustancialmente... [Seguir leyendo]

1. Un anticuerpo humano o fragmento de anticuerpo que se une específicamente a ligando 4 similar a delta humano (hD114) , comprendiendo dicho anticuerpo o fragmento de anticuerpo una región variable de la cadena pesada/región variable de la cadena ligera (HCVR/LCVR) seleccionada de los pares de secuencias de aminoácidos de SEC ID Nº: 429/437 y 901/903.

2. Un anticuerpo humano o fragmento de anticuerpo de la reivindicación 1 que comprende además una región constante seleccionada del grupo que consiste en SEC ID Nº: 950, 951 y 952.

3. Una molécula de ácido nucleico aislada que codifica un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno según la reivindicación 1 ó 2.

4. Un vector que comprende la molécula de ácido nucleico de la reivindicación 3.

5. Una célula huésped que comprende un vector según la reivindicación 4.

6. Una célula huésped según la reivindicación 5 que es una célula procariota o eucariota seleccionada de una de una célula de E. coli o CHO.

7. Un procedimiento para producir un anticuerpo anti-D114 humano o fragmento de unión a antígeno del mismo que comprende cultivar células huésped según la reivindicación 5 ó 6 en condiciones que permitan la producción del anticuerpo o fragmento del mismo y recuperar el anticuerpo o fragmento así producido.

8. Uso de un anticuerpo o fragmento de unión a antígeno de un anticuerpo según la reivindicación 1 ó 2 en la preparación de un medicamento para tratar cáncer en un ser humano.

9. Un anticuerpo o fragmento de anticuerpo según la reivindicación 1 ó 2 para su uso en un procedimiento para tratar cáncer en un paciente humano.

10. Una composición que comprende un anticuerpo o fragmento de anticuerpo según la reivindicación 1 ó 2 y un vehículo aceptable.