Anticuerpos anti-IL-17.

Un anticuerpo monoclonal anti-IL-17 humanizado, comprendiendo dicho anticuerpo:

a) un péptido con SEC ID Nº: 131 en CDRL1,

b) un péptido con SEC ID Nº: 167 en CDRL2,

c) un péptido con SEC ID 5 Nº: 168 en CDRL3,

d) un péptido con SEC ID Nº: 26 en CDRH1,

e) un péptido con SEC ID Nº: 30 en CDRH2,

f) un péptido con SEC ID Nº: 52 en CDRH3.

Anticuerpos anti-IL-17

Campo de la invención

La presente invención se encuentra en el campo de la medicina, en particular en el campo de anticuerpos monoclonales contra IL-17 humana. La invención se refiere a anticuerpos monoclonales anti-IL-17 que se unen con afinidad elevada a un epítope antigénico no lineal o conformacional de IL-17 que comprende los aminoácidos DGNVDYH (SEC ID Nº: 276) . Los anticuerpos de la invención pueden ser anticuerpos quiméricos, humanizados o humanos, inmunoconjugados de los anticuerpos o fragmentos de unión al antígeno de los mismos y son útiles como medicamento para el tratamiento de trastornos autoinmunitarios, inflamatorios, de proliferación celular y de desarrollo.

Antecedentes de la invención

La familia de citocinas IL-17 incluye actualmente IL-17A, IL-17B, IL-17C, IL-17D, IL-17E y IL-17F. Todos los miembros de la familia IL-17 tienen cuatro restos de cisteína altamente conservados que están implicados en la formación de enlaces disulfuro intracatenarios y tienen dos o más restos de cisteína que pueden estar implicados en los enlaces disulfuro intracatenarios. Los miembros de la familia IL-17 no tienen similitud de secuencia con cualesquiera otras citocinas conocidas. No obstante, se encontró un homólogo viral de IL-17A en el marco de lectura abierto 13 de herpesvirus saimiri (Yao, Z. y col., Immunity, 3:811, 1995) y tiene el 72 % de identidad de restos de aminoácidos con la IL-17A humana. Se ha informado de múltiples funciones de los miembros de la familia IL-17 que implican en su mayor parte la regulación de la respuesta inmunitaria.

La interleucina 17 (IL-17, también denominada IL-17A) es una glucoproteína homodimérica de 20-30kD producida predominantemente por linfocitos T CD4+ activados y funciona como una citocina proinflamatoria. Cuando un miembro particular de la familia IL-17 se denomina sencillamente "IL-17, " se entiende que el miembro de la familia al que se hace referencia es a la IL-17A. La IL-17 es segregada por linfocitos T activados en sitios de inflamación, no en la circulación sistémica. La IL-17 se une a un receptor transmembrana de tipo I denominado IL-17R, que es una proteína grande expresada de forma ubicua que no muestra similitud de secuencia significativa con otros receptores de citocinas conocidos. La IL-17 tiene múltiples propiedades biológicas que incluyen la regulación al alza de moléculas de adhesión e induce la producción de múltiples citocinas y quimiolinas inflamatorias de diversos tipos celulares, incluidos sinoviocitos, condrocitos, fibroblastos, células endoteliales, células epiteliales, queratinocitos y macrófagos. Además, la IL-17 induce el reclutamiento de neutrófilos en un sitio de inflamación mediante la inducción de la liberación de quimiocinas, estimula la producción de prostaglandinas y metaloproteinasas e inhibe la síntesis de proteoglicanos. Además, la IL-17 tiene un papel importante en la maduración de células progenitoras hematopoyéticas. Se ha demostrado que la IL-17 tiene papeles señalizadores en diferentes órganos y tejidos que incluyen pulmón, cartílago articular, hueso, cerebro, células hematopoyéticas, riñón, piel e intestino. Para una revisión de la bioactividad de IL-17 véase, por ejemplo, Kolls y Linden, Immunity 21:467-476, 2004, o Fossiez y col. Int. Rev. Immunol. 16:541, 1998.

Los niveles aumentados de IL-17 (es decir, IL-17A) se han asociado con diversas afecciones, enfermedades o trastornos que incluyen inflamación de vías aéreas, artritis reumatoide ("AR") , osteoartritis, erosión ósea, abscesos y adhesiones intraperitoneales, trastorno inflamatorio del intestino ("IBD") , rechazo de aloinjerto, psoriasis, determinados tipos de cáncer, angiogénesis, ateroesclerosis y esclerosis múltiple ("EM") (para una revisión, véase Witkowski y col., Cell. Mol. Life Sci. 61:567-579, 2004) . Tanto la IL-17 como el IL-17R están regulados al alza en el tejido sinovial de pacientes con AR. El bloqueo de la bioactividad de una IL-17 mediante su unión al anticuerpo específico de IL-17 o receptor soluble de IL-17 reduce la inflamación y la erosión ósea en varios modelos de artritis animal. (Véase, por ejemplo, Lubberts y col, Arthritis & Rheumatism, 50:650-659, 2004) . Además, la IL-17 tiene efectos independientes de IL-1º sobre la degradación y la inflamación de la matriz de colágeno y lesiones articulares, mientras que la IL-17 tiene sinergia con TNF-a para amplificar la inflamación.

Por lo tanto, dada su distribución localizada en el sitio de inflamación, la IL-17 parece ser una diana novedosa para el tratamiento de AR y de otras enfermedades inflamatorias y autoinmunitarias con un perfil de seguridad potencialmente superior al de fármacos dirigidos a la circulación sistémica de citocinas proinflamatorias tales como TNF-a. Los productos biológicos aprobados por la FDA (Agencia de alimentos y fármacos de Estados Unidos) (anticuerpos ENBREL®, REMICADE® y HUMIRA®) que se unen y neutralizan TNF-a han demostrado una eficacia en la reducción de signos y síntomas de AR y en la ralentización de la progresión de la enfermedad en una serie de pacientes con AR. Sin embargo, no todos los pacientes con AR responden igual a la inhibición de la bioactividad de una TNF-a con estos productos biológicos. Adicionalmente, el ARNm de IL-17 aumenta en lesiones de esclerosis múltiple y en células mononucleares de la sangre y fluido cerebroespinal de pacientes con EM, en particular durante la exacerbación clínica. En consecuencia, existe la necesidad de composiciones que antagonicen o neutralicen la actividad de IL-17 con el fin de tratar trastornos, enfermedades o afecciones en los que la presencia de bioactividad de IL-17 causa, o contribuye a, un efecto patológico no deseado o en los que una disminución de la bioactividad de IL-17 contribuye a un efecto terapéutico deseado, incluidos trastornos inflamatorios, trastornos de proliferación celular y de desarrollo y trastornos autoinmunitarios tales como AR y EM e IBD.

Giavedoni, L D, Journal of Immunological Methods, Vol. 301, Nº 1-2, 89-101, junio de 2005, describe la detección simultánea de múltiples citocinas y quimiocinas a partir de primates no humanos usando tecnología luminex. En la tabla 1 se mencionan tres anticuerpos anti-IL-17.

Moseley, T a y col., Cytokine and Growth Factor Reviews, Vol. 14, Nº 2, 155-174, abril de 2003, describe la familia de interleucina-17 y receptores de IL-17.

El documento WO 2004/106377 describe un procedimiento de obtención de un anticuerpo con una función deseada. En la tabla 4 se describen anticuerpos anti-IL-17 C9 y D12.

Hofstetter y col., Cellular Immunology, Vol. 237, Nº 2 123-130, octubre de 2005, describe la eficacia terapéutica de la neutralización de IL-17 en encefalomielitis autoinmunitaria experimental en murinos. Se encontró que la neutralización de IL-17 con un anticuerpo monoclonal mejora el curso de la enfermedad.

Existe la necesidad de un anticuerpo anti-IL-17 neutralizante que se una específicamente a IL-17 de origen humano, así como a IL-17 de un mamífero no humano, permitiendo de este modo que el anticuerpo se use en estudios preclínicos y clínicos in vivo. Además, existe la necesidad de un anticuerpo específico de IL-17 que se una a IL-17 con una afinidad alta y/o tenga una constante de disociación lenta, permitiendo de este modo minimizar la dosis terapéutica eficaz dando como resultado una menor frecuencia de dosificación con dicho anticuerpo que con un anticuerpo que se una a IL-17 con una afinidad menor (es decir, una KD superior) y/o tenga una constante de disociación más rápida. Un anticuerpo específico de IL-17 con afinidad alta es también deseable porque puede permitir que el anticuerpo se administre a un paciente subcutáneamente en vez de intravenosamente. Existe también la necesidad de un anticuerpo específico de IL-17 con un valor de CI50 bajo en un ensayo de bioactividad de IL-17 con el fin de generar un anticuerpo anti-IL-17 terapéutico con una dosis terapéutica eficaz mínima. También es deseable proporciona un anticuerpo específico de IL-17 con el que se reduzca a un mínimo la respuesta inmunitaria al anticuerpo evocada por un paciente que recibe el anticuerpo. La presente invención satisface estas necesidades y proporciona ventajas asociadas.

Sumario de la invención

El alcance de la presente invención se define mediante las reivindicaciones y cualquier información que no entre dentro de las reivindicaciones se proporciona sólo como información.

Los anticuerpos... [Seguir leyendo]

1. Un anticuerpo monoclonal anti-IL-17 humanizado, comprendiendo dicho anticuerpo: a) un péptido con SEC ID Nº: 131 en CDRL1, b) un péptido con SEC ID Nº: 167 en CDRL2,

c) un péptido con SEC ID Nº: 168 en CDRL3, d) un péptido con SEC ID Nº: 26 en CDRH1, e) un péptido con SEC ID Nº: 30 en CDRH2, f) un péptido con SEC ID Nº: 52 en CDRH3.

2. Un anticuerpo monoclonal anti-IL-17 humanizado según la reivindicación 1, en el que dicho anticuerpo comprende 10 una LCVR con SEC ID Nº: 241 y una HCVR con SEC ID Nº: 118.

3. Un anticuerpo humanizado según la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en el que el anticuerpo es un anticuerpo de longitud completa, un anticuerpo sustancialmente intacto, un fragmento Fab, un fragmento F (ab’) 2 o un fragmento Fv monocatenario.

4. Un anticuerpo según una cualquiera de las reivindicación 1 a 3, en el que el anticuerpo comprende además una 15 región constante de cadena pesada seleccionada entre IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgE, IgM e IgD.

5. Una composición que comprende el anticuerpo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que dicha composición comprende además un vehículo farmacéuticamente aceptable.

6. Un anticuerpo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, para su uso como medicamento.

7. Un anticuerpo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para su uso en el tratamiento de una o varias 20 afecciones seleccionadas entre artritis reumatoide, trastorno inflamatorio intestinal, psoriasis y esclerosis múltiple.

Figura 1 Familia IL-17 humana

Figura 2