Composición farmacéutica para su utilización en la estimulación de la regeneración hepática in vivo,

la protección contra la insuficiencia hepática crónica/aguda o la protección contra la apoptosis de hepatocitos, que comprende una cantidad eficaz de un polipéptido que comprende una secuencia de aminoácidos que presenta por lo menos 90% de identidad de aminoácidos con el polipéptido constituido por la secuencia de aminoácidos que comienza en el resto del aminoácido 36 y termina en el resto del aminoácido 175 de la secuencia SEC. ID. nº 1, en combinación con por lo menos un excipiente fisiológicamente aceptable

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a la utilización de la proteína asociada a la pancreatitis/hepatocarcinoma-intestino-páncreas humana (HIP/PAP) para estimular la regeneración hepática y también para la prevención de la insuficiencia hepática.

ANTECEDENTES DE LA TÉCNICA

La insuficiencia hepática se produce en numerosas enfermedades clínicas agudas y crónicas, incluyendo la hepatotoxicidad provocada por medicamentos, infecciones víricas, lesión vascular, enfermedad autoinmunitaria, o traumatismo contuso. Además, los pacientes sometidos a metabolopatía congénita pueden estar en situación de riesgo de desarrollar insuficiencia hepática. Los síntomas de la insuficiencia hepática que aparecen como resultado de estos cuadros clínicos incluyen, por ejemplo, la hepatitis fulminante aguda, hepatitis crónica o cirrosis, y en muchos casos, el restablecimiento de la función normal del hígado es vital para la supervivencia de los pacientes. Por ejemplo, la cirrosis es la séptima causa de muerte y la cuarta causa de muerte relacionada con la enfermedad en personas entre las edades de 25 a 44. (Fuente: American Liver Foundation).

En la hepatopatía aguda, el hígado puede regenerarse después de lesionarse. Si la enfermedad evoluciona más allá de la capacidad del hígado para regenerar nuevas células, el metabolismo de todo el cuerpo resulta gravemente afectado. La pérdida de la función hepática puede producir inestabilidad metabólica combinada con la interrupción de las funciones esenciales del cuerpo (es decir, el suministro de energía, el equilibrio ácido-base y la termorregulación). Si no desaparecen rápidamente, se producen complicaciones tales como la hemorragia incontrolable y septicemia, y los órganos dependientes, como el cerebro y los riñones dejan de funcionar a causa de subproductos tóxicos o porque el hígado no está sintetizando ya nutrientes importantes. Tras grandes lesiones en el hígado, el tejido hepático pierde sus funciones regenerativa y metabólica, y el trasplante de hígado es una estrategia terapéutica utilizada habitualmente. Sin embargo, la aplicación clínica del trasplante de hígado resulta limitada por la disponibilidad de hepatocitos humanos, tejido hepático y el número de las células hepáticas que pueden trasplantarse de forma segura al mismo tiempo. Por otra parte, la latencia antes de la intervención quirúrgica y las complicaciones posquirúrgicas podrían ser críticas para contrarrestar la fase aguda de insuficiencia hepática. Otra estrategia terapéutica consiste en la hepatectomía parcial (extirpación de una parte del hígado). Las indicaciones más típicas de la hepatectomía parcial son el tumor maligno, el carcinoma hepatocelular o las enfermedad proliferativa biliar incluyendo el colangiocarcinoma. Los tumores pueden ser primarios (desarrollados en el hígado) o metastásicos (desarrollado en otro órgano y luego emigrados al hígado). La mayoría de las metástasis hepáticas proceden del colon. Un tumor individual o más de un tumor confinado en el lado izquierdo o derecho del hígado pueden ser ectomizados con éxito con una supervivencia de 5 años hasta de un 60%. Las hepatectomías parciales realizadas en pacientes con enfermedad extrahepática pueden aliviar los síntomas causados por el tumor, pero ofrecen poca mejoría en la supervivencia. Los tumores benignos del hígado (adenoma, y hiperplasia focal nodular) también pueden ser controlados con éxito por hepatectomía parcial. Las hepatectomías parciales se realizan también en personas dispuestas a donar parte de su hígado.

Teniendo en cuenta la importancia del trasplante hepático y de la hepatectomía parcial, se han sugerido varias estrategias para estimular la regeneración hepática y suprimir o limitar la insuficiencia hepática en caso de hepatectomía parcial o de trasplante.

Se cree que la célula hepática es controlada por diversas citocinas estimuladoras del crecimiento e inhibidoras del crecimiento de origen autocrino o paracrino, sin embargo, la función exacta y el mecanismo de acción de estos factores de crecimiento está lejos de ser entendido en su totalidad. Las citocinas son péptidos o proteínas segregados que regulan el metabolismo intermediario de aminoácidos, proteínas, carbohidratos, lípidos y minerales. Las citocinas son péptidos o proteínas que actúan para mediar la inflamación y están involucrados en la proliferación celular que modula la comunicación intracelular y en la adhesión de células inflamatorias a las paredes de los vasos y a la matriz extracelular. Las citocinas son esenciales para la comunicación entre el hígado y las zonas extrahepáticas y dentro del propio hígado. Las citocinas interactúan con hormonas tales como los glucocorticoides, dando como resultado una compleja red de control mutuo. Muchas citocinas ejercen actividad de crecimiento, además de sus efectos proinflamatorios específicos. El hígado es un importante sitio de síntesis de citocinas y el órgano principal de purificación de varias citocinas. En la hepatopatía, las citocinas están involucradas en la aparición de respuestas inmunitarias intrahepáticas, en la regeneración del hígado y en la transformación fibrótica y cirrótica del hígado.

Se cree además que las células del hígado deben controlarse por varios factores de crecimiento. Los factores de crecimiento son necesarios para regular los episodios de desarrollo o son necesarios para regular la expresión de genes que codifican otras proteínas segregadas que pueden participar en la comunicación intracelular y en la coordinación del desarrollo e incluyen, el factor de crecimiento insulinoide I y II (IGF I y II), el factor de crecimiento epidérmico (EGF), el factor de crecimiento transformante tipo a y tipo b (TGF-α y TGF-β) y el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF).

Se ha demostrado que factores de crecimiento tales como TGFα o EGF estimulan la síntesis de ADN in vitro en hepatocitos aislados. Una proteína adicional, llamada factor de crecimiento hepático (HGF) ha demostrado ser un mitógeno para los hepatocitos primarios.

Basándose en estas observaciones, se ha propuesto que estos factores pueden ser importantes mediadores de la regeneración del hígado. En consecuencia, factores de crecimiento como TGFα, EGF o HGF con actividades similares a las del factor de crecimiento se han indicado en el tratamiento de la regeneración del hígado. Sin embargo, se ha sugerido que estas estrategias terapéuticas, estimulan la regeneración hepática y suprimen la insuficiencia hepática, no se ha demostrado su eficacia sin toxicidad ni efectos adversos. Es decir, estos factores de crecimiento favorecen la evolución del tumor (Gang-Hong, et al., 1992 ; Lee, 1992; Horiguchi, et al. 2002).

En consecuencia, sigue existiendo necesidad en esta materia de un procedimiento eficaz que estimule la regeneración del hígado, que proteja contra la insuficiencia hepática, y resulte privado de los efectos tóxico y tumorígeno adversos. Esta necesidad existe en cualquier población de pacientes en los que se ha producido daño hepático. Esta necesidad existe no sólo para los pacientes trasplantados, sino también para los donantes y los pacientes sometidos a hepatectomía parcial. Además, existe necesidad todavía en esta materia de nuevos compuestos terapéuticamente útiles, que estimulen la regeneración hepática.

Además, teniendo en cuenta la escasa disponibilidad de donantes de órganos, el trasplante hepático parcial de donante vivo es reconocido como una medida para superar la falta de órganos, y facilita el trasplante hepático parcial. Sin embargo, el trasplante hepático parcial no puede considerarse como una operación segura para los adultos que representan la mayoría de los pacientes de trasplante debido a que el peso del hígado ectomizable de los donantes suele ser inferior al peso del hígado necesario para los receptores. Por lo tanto existe necesidad de un medio para la regeneración segura y rápida del hígado para pequeños injertos.

Por consiguiente, un objetivo de la presente invención consiste en proporcionar un medio para la estimulación de la regeneración hepática después de la hepatectomía parcial. Un objetivo de la presente invención consiste también en proporcionar un fármaco que puede estimular la regeneración del hígado o de crecimiento de hepatocitos después del trasplante del hígado, tal como el trasplante hepático parcial, y también después de la aparición de una enfermedad que produce insuficiencia hepática, tales como cirrosis, hepatitis aguda y hepatitis crónica...

1. Composición farmacéutica para su utilización en la estimulación de la regeneración hepática in vivo, la protección contra la insuficiencia hepática crónica/aguda

o la protección contra la apoptosis de hepatocitos, que comprende una cantidad eficaz de un polipéptido que comprende una secuencia de aminoácidos que presenta por lo menos 90% de identidad de aminoácidos con el polipéptido constituido por la secuencia de aminoácidos que comienza en el resto del aminoácido 36 y termina en el resto del aminoácido 175 de la secuencia SEC. ID. nº 1, en combinación con por lo menos un excipiente fisiológicamente aceptable.

2. Composición farmacéutica según la reivindicación 1 que comprende una cantidad eficaz del polipéptido constituido por la secuencia de aminoácidos que comienza en el resto del aminoácido 36 y termina en el resto del aminoácido 175 de la secuencia SEC. ID. nº 1, en combinación con por lo menos un excipiente fisiológicamente aceptable.

3. Composición farmacéutica según la reivindicación 1 que comprende una cantidad eficaz de un polipéptido que comprende una secuencia de aminoácidos que presenta por lo menos 90% de identidad de aminoácidos con el polipéptido constituido por la secuencia de aminoácidos que comienza en el resto del aminoácido 27 y termina en el resto del aminoácido 175 de la secuencia SEC. ID. nº 1, en combinación con por lo menos un excipiente fisiológicamente aceptable.

4. Composición farmacéutica según la reivindicación 1 que comprende una cantidad eficaz del polipéptido constituido por la secuencia de aminoácidos que comienza en el resto del aminoácido 27 y termina en el resto del aminoácido 175 de la secuencia SEC. ID. nº 1, en combinación con por lo menos un excipiente fisiológicamente aceptable.

5. Composición farmacéutica según la reivindicación 1 que comprende una cantidad eficaz de proteína asociada a la pancreatitis/hepatocarcinoma-intestino-páncreas humana (HIP/PAP) de secuencia SEC. ID. nº 1 en combinación con por lo menos un excipiente fisiológicamente aceptable.

6. Composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para estimular la regeneración hepática in vivo después de la insuficiencia hepática crónica/aguda.

7. Composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para el tratamiento de los pacientes que han experimentado una hepatectomía parcial.

8. Composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para el tratamiento de los pacientes que son los sujetos de un trasplante de hígado, una insuficiencia hepática causada por enfermedades hepáticas seleccionadas de entre el grupo constituido por (i) hepatitis aguda y crónica de etiologías tóxicas, medicamentosas, virales, alcohólicas y desconocidas, (ii) intervención quirúrgica y (iii) cáncer hepático.

9. Composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para el tratamiento de pacientes que son los sujetos de una enfermedad comprendida en el grupo constituido por: hepatitis B, hepatitis C, anomalías del ciclo de la urea, hipercolesterolemia familiar, cirrosis provocada por alcohol, enfermedad por almacenamiento de glucógeno, hepatitis autoinmunitaria, hiperoxaluria primaria tipo l, cirrosis criptogénica, síndrome de Crigler-Najjar tipo 1, fibrosis hepática congénita, enfermedad Neimann-Pick, cirrosis biliar primaria, amiloidosis familiar, atresia biliar, carcinoma hepatocelular, colangitis esclerosante primaria, hepatoblastoma, síndrome de Alagille, hemangioendotelioma, colestasis familiar, neuroendocrina no carciniode, insuficiencia hepática provocada por fármacos, tumor hepático benigno tal como la hiperplasia nodular focal, tumores de hígado tales como el carcinoma hepatocelular y el colangiocarcinoma, insuficiencia hepática aguda/fulminante, síndrome de Budd-Chiari, deficiencia en alfa-1-antitripsina, enfermedad de Wilson, hemocromatosis, tirosinemia, protoporfiria, fibrosis quística, hepatopatía grasa no alcohólica (NAFLD) y esteatohepatitis no alcohólica (NASH).

10. Composición farmacéutica con efectos adversos limitados en la necrosis hepática que comprende:

(i) una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto hepatotóxico, e

(ii) una cantidad eficaz de un polipéptido según cualquiera de las reivindicaciones 1 a

5.

11. Composición que comprende dividir los hepatocitos en combinación con un polipéptido según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5.

12. Composición que comprende los hepatocitos que han sido transfectados con un casete de expresión que conduce la expresión de una polipéptido según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 en dichos hepatocitos transfectados.

13. Composición que comprende una cantidad eficaz de células madre de médula ósea, en combinación con un polipéptido según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5.

14. Composición farmacéutica para estimular la regeneración hepática in vivo que comprende una cantidad eficaz de una composición según cualquiera de las reivindicaciones 10 a 13.

15. Procedimiento para estimular el crecimiento de los hepatocitos in vitro, que comprende:

(a) recolectar los hepatocitos;

(b) cultivar dichos hepatocitos en un medio de cultivo apropiado; y

(c) tratar dichos hepatocitos con una cantidad mitogéna de un polipéptido según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 .

16. Procedimiento para estimular el crecimiento de los hepatocitos in vitro, que comprende:

(a) recolectar los hepatocitos;

(b) cultivar dichos hepatocitos en un medio de cultivo apropiado; y

(c) transfectar dichos hepatocitos con un casete de expresión que conduce la expresión de un polipéptido según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 en dichos hepatocitos transfectados.

17. Procedimiento para el tratamiento de células madre de la médula ósea in vitro, que comprende:

(a) recolectar células madre de la médula ósea;

(b) cultivar dichas células madre de la médula ósea en un medio de cultivo apropiado; y

(c) tratar dichas células madre de la médula ósea con una cantidad mitógena de un polipéptido según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5.

18. Utilización de un polipéptido según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para preparar una composición farmacéutica destinada a estimular la regeneración hepática in vivo.