Métodos de cultivo de células.

Un método para producir una preparación de proteína recombinante que tiene un valor diana de uno o más de los glicanos fucosilados,

Ggicanos galactosilados, glicanos de alto contenido de manosa y glicanos sialilados, comprendiendo el método:

(a) proporcionar una célula genéticamente diseñada para expresar una proteína recombinante;

(b) cultivar la célula en un medio de cultivo que comprende 0,1 mg/L a 10 mg/L de putrescina y, opcionalmente, que comprende además uno o más de lisina, amonio, DMSO, cobre, glucosa, un factor de crecimiento, una vitamina, un lípido y una peptona, en condiciones en las que la célula expresa la proteína recombinante; y

(c) recoger una preparación de la proteína recombinante producida por la célula que cumpla con un valor diana, en relación con los glicanos totales, de uno o más de glicanos fucosilados, glicanos galactosilados, glicanos con alto contenido de manosa y glicanos sialilados, en donde

(i) el valor diana de los glicanos galactosilados y/o los glicanos sialilados es un nivel al menos un 10% más alto que el nivel, en relación con los glicanos totales, de los glicanos galactosilados y/o los glicanos sialilados en una preparación de la proteína recombinante producida mediante el cultivo de la célula en el medio que no comprende 0,1 mg/L a 10 mg/L de putrescina;

(ii) el valor diana de los glicanos con alto contenido de manosa es un nivel al menos 10% más bajo que un nivel, en relación con los glicanos totales con alto contenido de manosa en una preparación de la proteína recombinante producida mediante el cultivo de la célula en un medio que no comprende 0,1 mg/L a 10 mg/L de putrescina;

(iii) el valor diana de los glicanos fucosilados es de 70% a 100% de glicanos fucosilados;

(iv) el valor diana de los glicanos galactosilados es del 1% al 95% de glicanos galactosilados;

(v) el valor diana de los glicanos con alto contenido de manosa es del 0,1% al 20% de los glicanos con alto contenido de manosa; y/o

(vi) el valor diana de los glicanos sialilados es de 0,1% a 90% de glicanos sialilados; y, opcionalmente,

(d) evaluar el nivel de uno o más de glicanos fucosilados, glicanos galactosilados, glicanos con alto contenido de manosa y glicanos sialilados en la preparación de proteínas recombinantes; y/o,

(e) formular la preparación en un producto farmacológico.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2014/023924.

Solicitante: MOMENTA PHARMACEUTICALS, INC.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 301 BINNEY STREET CAMBRIDGE, MA 02142 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: PRENTICE,Holly.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C07K16/00 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C07 QUIMICA ORGANICA.C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02;   proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales.
  • C12N15/63 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Introducción de material genético extraño utilizando vectores; Vectores; Utilización de huéspedes para ello; Regulación de la expresión.
  • C12P21/02 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA.C12P 21/00 Preparación de péptidos o de proteínas (proteína monocelular C12N 1/00). › que tienen una secuencia conocida de varios aminoácidos, p. ej. glutation.
  • G01N33/68 SECCION G — FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › en los que intervienen proteínas, péptidos o aminoácidos.

PDF original: ES-2695169_T3.pdf

 

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