Compuestos de monometilvalina conjugados con anticuerpos.

Un conjugado de anticuerpo-fármaco que tiene la fórmula: **Fórmula**

o una sal o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo,

en la que:

Ab es un anticuerpo,

R17 es alquileno C1-C10-, -carbociclo C3-C8-, -O-(alquilo C1-C8)-, -arileno-, -alquileno C1-C10-arileno-, -arileno- alquileno C1-C10-, -alquileno C1-C10-(carbociclo C3-C8)-, -(carbociclo C3-C8)-alquileno C1-C10-, -heterociclo C3-C8-, -alquileno C1-C10-(heterociclo C3-C8)-, -(heterociclo C3 C8)-alquileno C1-C10-, -(CH2CH2O)r-, o -(CH2CH2O)r-CH2-; y r es un número entero que varía de 1 a 10; p varía de 1 a aproximadamente 20, y

DF es una Unidad de Fármaco que tiene la fórmula: **Fórmula**

en la que, independientemente de cada posición:

R2 se selecciona entre H y alquilo C1-C8;

R3 se selecciona entre H, alquilo C1-C8, carbociclo C3-C8, arilo, alquil-arilo C1-C8, alquil C1-C8-(carbociclo C3-C8), heterociclo C3-C8 y alquil C1-C8-(heterociclo C3-C8);

R4 se selecciona entre H, alquilo C1-C8, carbociclo C3-C8, arilo, alquil-arilo C1-C8, alquil C1-C8-(carbociclo C3-C8), heterociclo C3-C8 y alquil C1-C8-(heterociclo C3-C8);

R5 se selecciona entre H y metilo;

o:

R4 y R5 forman en conjunto un anillo carbocíclico y tienen la fórmula -(CRaRb)n-, en la que Ra y Rb se seleccionan independientemente entre H, alquilo C1-C8 y carbociclo C3-C8, y n se selecciona entre 2, 3, 4, 5 y 6;

R6 se selecciona entre H y alquilo C1-C8;

R7 se selecciona entre H, alquilo C1-C8, carbociclo C3-C8, arilo, alquil-arilo C1-C8, alquil C1-C8-(carbociclo C3-C8), heterociclo C3-C8 y alquil C1-C8-(heterociclo C3-C8);

cada R8 se selecciona independientemente entre H, OH, alquilo C1-C8, carbociclo C3-C8 y O-(alquilo C1-C8);

R9 se selecciona entre H y alquilo C1-C8;

R10 se selecciona entre arilo y heterociclo C3-C8;

Z es O, S, NH o NR12, en donde R12 es alquilo C1-C8;

R11 se selecciona entre -H, alquilo C1-C20, arilo, -heterociclo C3-C8, -(R13O)m-R14 o -(R13O)m-CH(R15)2;

m es un número entero que varía de 1 a 1000;

R13 es alquilo C2-C8;

R14 es H o alquilo C1-C8;

cada aparición de R15 es independientemente H, COOH, -(CH2)n-N(R16)2, -(CH2)n-SO3H o -(CH2)n-SO3-alquilo C1-C8;

cada aparición de R16 es independientemente H, alquilo C1-C8 o -(CH2)n-COOH; y

n es un número entero que varía de 0 a 6.

Compuestos de monometilvalina conjugados con anticuerpos

1. Campo de la invención 5

La presente invención se refiere a conjugados de anticuerpo-fármaco, a composiciones que los incluyen, y a métodos para uso de los mismos para tratar cáncer, una enfermedad autoinmune o una enfermedad infecciosa. En el presente documento también se describen métodos para uso de compuestos de conjugados de anticuerpo-fármaco para diagnóstico o tratamiento in vitro, in situ, e in vivo de células de mamífero, o afecciones patológicas 10 asociadas.

2. Antecedentes de la invención

La mejora de la administración de fármacos y de otros agentes a células, tejidos y tumores diana para conseguir una 15 eficacia máxima y una toxicidad mínima ha sido el foco de una investigación considerable durante muchos años. Aunque se han hecho muchos intentos para desarrollar métodos eficaces para importar moléculas biológicamente activas en células, tanto in vivo como in vitro, ninguno ha demostrado ser totalmente satisfactorio. La optimización de la asociación del fármaco con su diana intracelular, a la vez que se minimiza la redistribución intercelular del fármaco, por ejemplo, a células vecinas, a menudo es difícil o ineficaz. 20

La mayoría de los agentes administrados actualmente a un paciente por vía parenteral no son dirigidos, lo que da como resultado la administración sistémica del agente a células y tejidos del organismo en los que no es necesario, y a menudo indeseable. Ésto puede dar como resultado efectos secundarios adversos del fármaco, y a menudo limita la dosis que se puede administrar de un fármaco (por ejemplo, agentes quimioterapeúticos (anticáncer) , 25 citotóxicos, inhibidores de enzimas y fármacos antivirales o antimicrobianos) . Por comparación, aunque se considera que la administración oral de fármacos es un modo de administración conveniente y económica, ésta comparte las mismas preocupaciones de toxicidad no específica a células sin afectar una vez que el fármaco se ha absorbido en la circulación sistémica. Complicaciones adicionales implican problemas con la biodisponibilidad oral y la permanencia de fármaco en el intestino lo que conduce a una exposición adicional del intestino al fármaco y por lo 30 tanto riesgo de toxicidades intestinales. Por consiguiente, un objetivo fundamental ha sido desarrollar métodos para dirigir específicamente agentes a células y tejidos. Los beneficios de dicho tratamiento incluyen evitar los efectos psicológicos generales de una administración inapropiada de dichos agentes a otras células y tejidos, tales como células sin infectar. La dirección intracelular se puede conseguir con métodos, compuestos y formulaciones que permitan acumulación o retención de agentes biológicamente activos, es decir metabolitos activos, dentro de células. 35

Se ha establecido terapia de anticuerpos monoclonales para el tratamiento dirigido de pacientes con trastornos como cáncer, inmunológicos y angiogénicos.

El uso de conjugados de anticuerpo-fármaco para la administración local de agentes citotóxicos o citostáticos, por 40 ejemplo, fármacos para eliminar o inhibir células tumorales en el tratamiento del cáncer (Syrigos y Epenetos (1999) Anticancer Research 19: 605-614; Niculescu-Duvaz y Springer (1997) Adv. Drg. Del. Rev. 26: 151-172; Patente de Estados Unidos Nº 4975278) permite teóricamente una administración dirigida del resto de fármaco a tumores, y acumulación intracelular en el mismo, a la vez que una administración sistémica de estos agentes de fármaco sin conjugar puede dar como resultado niveles inaceptables de toxicidad en las células tumorales que se buscan para 45 su eliminación (Baldwin et al., 1986 Lancet pp. (15 Mar., 1986) : 603-05; Thorpe, 1985, "Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In Cancer Therapy: A Review", in Monoclonal Antibodies ’84: Biological And Clinical Applications, A. Pinchera et al. (ed.s) , páginas 475-506) . De este modo se busca eficacia máxima con toxicidad mínima. Se informado tanto de anticuerpos policlonales como de anticuerpos monoclonales útiles en estas estrategias (Rowland et al., 1986, Cancer Immunol. Immunother. 21: 183-87) . Los fármacos usados en estos métodos incluyen 50 daunomicina, doxorrubicina, metotrexato, y vindesina (Rowland et al., 1986, mencionado anteriormente) . Toxinas usadas en conjugados de anticuerpo-toxina incluyen toxinas bacterianas tales como toxina de difteria, toxina de plantas tales como ricino, toxinas de molécula pequeña tales como geldanamicina (Kerr et al., 1997, Bioconjugate Chem. 8 (6) : 781-784; Mandler et al. (2000) Jour. of the Nat. Cancer Inst. 92 (19) : 1573-1581; Mandler et al. (2000) Bioorganic & Med. Chem. Letters 10: 1025-1028; Mandler et al. (2002) Bioconjugate Chem. 13: 786-791) , 55 maitansinoides (documento EP 1391213; Liu et al., (1996) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 8618-8623) , y caliqueamicina (Lode et al. (1998) Cancer Res. 58: 2928; Hinman et al. (1993) Cancer Res. 53: 3336-3342) . Las toxinas pueden afectar a sus efectos citotóxicos y citostáticos mediante mecanismos que incluyen unión a tubulinas, unión al ADN, o inhibición de la topoisomerasa (Meyer, D.L. y Senter, P.D. "Recent Advances in Conjugado de Anticuerpo Fármacos for Cancer Therapy" en Annual Reports in Medicinal Chemistr y , Vol 38 (2003) Capítulo 23, 60 229-237) . Algunos fármacos citotóxicos tienden a ser inactivos o menos activos cuando se conjugan con anticuerpos grandes o con ligandos receptores de proteínas.

ZEVALIN® (ibritumomab tiuxetan, Biogen/Idec) es un conjugado de anticuerpo-radioisótopo compuesto por un anticuerpo monoclonal de IgG1 kappa de murino dirigido frente al antígeno CD20 que se encuentra en la superficie 65 de linfocitos B normales y malignos y en radioisótopo 111In o 90Y unido mediante un quelante-conector de tiourea (Wiseman et al. (2000) Eur. Jour. Nucl. Med. 27 (7) : 766-77; Wiseman et al. (2002) Blood 99 (12) : 4336-42; Witzig et al. (2002) J. Clin. Oncol. 20 (10) : 2453-63; Witzig et al. (2002) J. Clin. Oncol. 20 (15) : 3262-69) . A pesar de que ZEVALIN tiene actividad frente al Linfoma no Hodgkin de linfocitos B (NHL) , su administración da como resultado citopenias graves y prolongadas en la mayoría de los pacientes. MYLOTARG™ (gemtuzumab ozogamicina, Wyeth Pharmaceuticals) , un conjugado de fármaco y anticuerpo compuesto por un anticuerpo hu CD33 unido a 5 caliqueamicina, se aprobó en 2000 para el tratamiento de leucemia mieloide aguda mediante inyección (Drugs of the Future (2000) 25 (7) : 686; Patentes de Estados Unidos Nº 4970198; Nº 5079233; Nº 5585089; Nº 5606040; Nº 5693762; Nº 5739116; Nº 5767285; Nº 5773001) . Cantuzumab mertansina (Immunogen, Inc.) , un conjugado de fármaco y anticuerpo compuesto por el anticuerpo huC242 unido a través del conector disulfuro SPP al resto de fármaco maitansinoide, DM1, está avanzando en ensayos en Fase II para el tratamiento de cánceres que expresan 10 CanAg, tales como colon, pancreático, gástrico y otros. MLN-2704 (Millennium Pharm., BZL Biologics, Immunogen Inc.) , conjugado de fármaco y anticuerpo ah compuesto por el anticuerpo monoclonal de antígeno de membrana específico antipróstata (PSMA) unido al resto de fármaco maitansinoide, DM1, está en desarrollo para el tratamiento potencial de tumores de próstata. El mismo resto de fármaco maitansinoide, DM1, se unió a través de un conector no disulfuro, SMCC, la un anticuerpo monoclonal murino de ratón, TA.1 (Chari et al. (1992) Cancer Research 52: 15 127-131) . Se informó que este conjugado era 200 veces menos potente que el correspondiente conjugado de conector disulfuro. Se consideró que el conector SMCC en el mismo era "no escindible".

Se han aislado varios compuestos peptídicos cortos a partir del molusco marino Dolabella auricularia y se ha encontrado que tienen actividad biológica (Pettit et al. (1993) Tetrahedron 49: 9151; Nakamura et al. (1995) 20 Tetrahedron Letters 36: 5059-5062; Sone et al. (1995) Jour. Org Chem. 60: 4474) . También se han preparado análogos de estos compuestos, y se encontró que algunos tienen actividad biológica (para una revisión, véase Pettit et al. (1998) Anti-Cancer Drug Design 13: 243-277) . Por ejemplo, auristatina E (Patente de Estados Unidos Nº 5635483) es un análogo sintético del producto natural marino Dolastatina 10, un agente que inhibe la polimerización de la tubulina mediante unión al mismo dominio en la tubulina que el fármaco anticáncer vincristina (G. R. Pettit, 25 (1997) Prog. Chem. Org. Nat. Prod. 70: 1-79) . Dolastatina 10, auristatina PE, y auristatina E son péptidos lineales que tienen cuatro aminoácidos, tres de los cuales son únicos esta clase de compuestos de dolastatina, y una amida C-terminal.

Los péptidos auristatina,... [Seguir leyendo]

1. Un conjugado de anticuerpo-fármaco que tiene la fórmula:

o una sal o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo, en la que:

Ab es un anticuerpo,

R17 es alquileno C1-C10-, -carbociclo C3-C8-, -O- (alquilo C1-C8) -, -arileno-, -alquileno C1-C10-arileno-, -arileno- 10 alquileno C1-C10-, -alquileno C1-C10- (carbociclo C3-C8) -, - (carbociclo C3-C8) -alquileno C1-C10-, -heterociclo C3-C8-, -alquileno C1-C10- (heterociclo C3-C8) -, - (heterociclo C3 C8) -alquileno C1-C10-, - (CH2CH2O) r-, o - (CH2CH2O) r-CH2-; y r es un número entero que varía de 1 a 10;

p varía de 1 a aproximadamente 20, y

DF es una Unidad de Fármaco que tiene la fórmula: 15

en la que, independientemente de cada posición:

R2 se selecciona entre H y alquilo C1-C8;

R3 se selecciona entre H, alquilo C1-C8, carbociclo C3-C8, arilo, alquil-arilo C1-C8, alquil C1-C8- (carbociclo C3-C8) , heterociclo C3-C8 y alquil C1-C8- (heterociclo C3-C8) ;

R4 se selecciona entre H, alquilo C1-C8, carbociclo C3-C8, arilo, alquil-arilo C1-C8, alquil C1-C8- (carbociclo C3-C8) , heterociclo C3-C8 y alquil C1-C8- (heterociclo C3-C8) ; 25

R5 se selecciona entre H y metilo;

o:

R4 y R5 forman en conjunto un anillo carbocíclico y tienen la fórmula - (CRaRb) n-, en la que Ra y Rb se 30 seleccionan independientemente entre H, alquilo C1-C8 y carbociclo C3-C8, y n se selecciona entre 2, 3, 4, 5 y 6;

R6 se selecciona entre H y alquilo C1-C8;

R7 se selecciona entre H, alquilo C1-C8, carbociclo C3-C8, arilo, alquil-arilo C1-C8, alquil C1-C8- (carbociclo C3-C8) , heterociclo C3-C8 y alquil C1-C8- (heterociclo C3-C8) ; 35

cada R8 se selecciona independientemente entre H, OH, alquilo C1-C8, carbociclo C3-C8 y O- (alquilo C1-C8) ;

R9 se selecciona entre H y alquilo C1-C8;

R10 se selecciona entre arilo y heterociclo C3-C8;

Z es O, S, NH o NR12, en donde R12 es alquilo C1-C8;

R11 se selecciona entre -H, alquilo C1-C20, arilo, -heterociclo C3-C8, - (R13O) m-R14 o - (R13O) m-CH (R15) 2; 40

m es un número entero que varía de 1 a 1000;

R13 es alquilo C2-C8;

R14 es H o alquilo C1-C8;

cada aparición de R15 es independientemente H, COOH, - (CH2) n-N (R16) 2, - (CH2) n-SO3H o - (CH2) n-SO3-alquilo C1-C8; 45

cada aparición de R16 es independientemente H, alquilo C1-C8 o - (CH2) n-COOH; y

n es un número entero que varía de 0 a 6.

2. El compuesto de conjugado de anticuerpo-fármaco de la reivindicación 1 que tiene la fórmula:

o una sal o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo. 5

3. El compuesto de conjugado de anticuerpo-fármaco de cualquiera de las reivindicaciones anteriores en el que DF tiene la estructura:

o

o una sal o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo.

4. Un conjugado de anticuerpo-fármaco de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, o una sal o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo, en el que p varía de aproximadamente 3 a aproximadamente 5. 5

5. Un conjugado de anticuerpo-fármaco de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, o una sal o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo, en el que el anticuerpo es un fragmento de anticuerpo.

6. Un conjugado de anticuerpo-fármaco de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, o una sal 10 o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo, en el que el anticuerpo es un anticuerpo monoclonal.

7. Un conjugado de anticuerpo-fármaco de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, o una sal o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo, en el que el anticuerpo se une a un antígeno de célula cancerosa que está en la superficie de una célula cancerosa. 15

8. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad eficaz de un conjugado de anticuerpo-fármaco de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, o una sal o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo, y un excipiente o un vehículo farmacéuticamente aceptables.

9. Una composición para el tratamiento del cáncer que comprende una cantidad del conjugado de anticuerpo-fármaco de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, o una sal o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo, siendo dicha cantidad eficaz para el tratamiento del cáncer.

10. Un conjugado de anticuerpo-fármaco de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, o una sal 25 o un solvato farmacéuticamente aceptables del mismo, para uso en un procedimiento para el tratamiento del cáncer.

11. Un conjugado de anticuerpo-fármaco de acuerdo con la reivindicación 10 para uso en el tratamiento del cáncer, que comprende adicionalmente el tratamiento con un agente anticáncer adicional.