Análogos de alfa-galactosil-ceramida y su uso en inmunoterapias, adyuvantes, y agentes antivirales, antibacterianos y anticancerígenos.

Un compuesto representado por la estructura de fórmula 1:**Fórmula**

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; para su uso en medicina.

Análogos de a-galactosil-ceramida y su uso en inmunoterapias, adyuvantes, y agentes antivirales, antibacterianos y anticancerígenos

Campo de ia divuigacíón

La presente divulgación se refiere a análogos de a-galactosil-ceramida (alfa-GalCer), y a su uso como inmunoterapias, adyuvantes, y agentes antivirales, antibacterianos y anticancerígenos.

Antecedentes

Los linfocitos T citolíticos naturales (NKT) representan un subconjunto de linfocitos T con propiedades únicas, entre las que se incluyen la reactividad hacia los glucolípidos naturales o sintéticos presentados por CD1d y la expresión de una cadena a de receptor de antígeno de linfocitos T (TCR) invariable. Los NKT se diferencian de los linfocitos T ap convencionales diferenciados funcionalmente en que comparten propiedades tanto de los linfocitos citolíticos naturales como de los linfocitos T, y en que pueden producir rápidamente respuestas tanto de tipo TH1 como de tipo TH2 tras la estimulación con sus ligandos (inmunidad innata). Paradójicamente, la activación de los NKT puede conducir bien a la supresión o a la estimulación de las respuestas inmunes. Por ejemplo, se piensa que la producción de citocinas TH1 potencia la inmunidad celular con actividades antitumorales, antivirales/antibacterianas y adyuvantes, mientras que se piensa que la producción de citocinas Th¡2 reduce las enfermedades autoinmunes y potencia la producción de anticuerpos. Dado que los NKT desempeñan un papel regulador en el sistema inmune, son dianas atractivas para la ¡nmunoterapia.

En los documentos US 2007/0238871, W02006/026389 o W02007/035717, se desvelan ejemplos de a-GalCer que tienen dichas propiedades.

Sumarlo de la divulgación

La presente invención proporciona un compuesto representado por la estructura de fórmula 1:

6)

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, para su uso en medicina.

La presente invención también proporciona un método de síntesis de un compuesto representado por la estructura de fórmula 1:

(9

que comprende:

proteger selectivamente los grupos 2,3-dihidroxi de D-lixosa con 2-metoxipropeno en presencia de ácido, dando un producto intermedio de actónido;

someter un grupo hidroxilo primario del producto intermedio de actónido a cloruro de tritilo y condiciones básicas, dando un producto intermedio de tritiléter;

hacer reaccionar el producto intermedio de tritiléter con Ci3H27*PPh3*Br mediante olefinación de Wittig en presencia de hexametildisilazida de litio (LHMDS), mediante lo que se produce un producto intermedio de alqueno con una proporción de E7Z de 2:1 según la caracterización por espectrometría de RMN de ^H; hidrogenar el producto intermedio de alqueno, dando un alcano;

activar un grupo hidroxi del alcano mediante anhídrido de triflato y 2,6-lutidina, dando un producto intermedio de

triflato;

hacer reaccionar el producto intermedio de trifiato con azida de tetrametilguanidinio (TMGA) mediante la reacción de SN2, dando un compuesto de azido con la configuración invertida;

retirar el grupo tritilo del compuesto de azido mediante el uso de ácido trifluoroacético (TFA), dando fitosfingosina;

efectuar la glucosilación del derivado de galactosa donante y la fitoesfingosina aceptora usando anhídrido trifluorometanosulfónico (Tf2<3) y sulfuro de dimetilo (Me2S) como potenciadores, dando un producto intermedio clave que tenga un grupo azido;

reducir el grupo azido del producto intermedio clave usando una reacción de Staudinger, dando un producto intermedio de amina; y

acoplar el producto intermedio de amina con ácido graso usando EDC y HBTU.

La presente invención también proporciona un compuesto de fórmula 1:

d)

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, para su uso en el tratamiento o la profilaxis de una infección viral o bacteriana.

La presente invención también proporciona un compuesto de fórmula 1:

(9

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, para su uso en el tratamiento del cáncer.

En una realización ilustrativa, el compuesto de la invención es para su uso en un método en el que se puede estimular el desarrollo de DC mediante el uso de factor estimulante de colonias de macrófagos de granulocitos (GM- CSF) o, en otra realización ilustrativa, interleucina (IL)-3, que puede, en otra realización ilustrativa, aumentar la supervivencia de DC.

Como se describe en el presente documento, las DC pueden expresar marcadores mieloides tales como, por ejemplo, CD11c o una cadena de receptora de IL-3 (IL-3Ra) (CD123). En otra realización ilustrativa, el compuesto de la invención es para su uso en un método en el que las DC pueden producir ¡nterferones de tipo I (IFN). También, como se describe en el presente documento, las DC expresan moléculas coestimuladoras. En otra realización ilustrativa, el compuesto de la invención es para su uso en un método en el que las DC pueden expresar moléculas de adhesión adicionales que pueden, en una realización, servir como moléculas coestimuladoras adicionales, o como se describe en el presente documento, servir para dirigir las DC a determinados sitios /n v/vo, como se describe más detalladamente a continuación.

Como se describe en el presente documento, el compuesto de la invención es para su uso en un método en el que las células dendríticas pueden expresar CD83, un receptor endocítico para aumentar la captación del antígeno propio tal como DEC-205/CD205 en una realización, o marcadores de la superficie celular DC-LAMP (CD208) o, en otra realización, niveles variables de productos de MHC presentadoras de antígeno de clase I y II, o en otra realización, moléculas auxiliares (de adhesión o coestimuladoras) entre las que se incluyen CD40, CD54, CD58 o CD86, o cualquier combinación de las mismas. En otra realización, el compuesto de la invención es para su uso en un método en el que las células dendríticas pueden expresar niveles variables de CD115, CD14, CD68 o CD32.

Como se describe en el presente documento, las células dendríticas pueden ser células dendríticas maduras. La expresión "células dendríticas maduras" puede referirse a una población de células dendríticas con expresión reducida de CD115, CD14, CD68 o CD32, o una población de células con expresión aumentada de CD86, o una combinación de las mismas. Las células dendríticas maduras pueden presentar un aumento de la expresión de uno

o más de p55, CD83, CD40 o CD86, o una combinación de los mismos. En una realización, el compuesto de la invención es para su uso en un método en el que las células dendrfticas expresarán el receptor de DEC-205 en su superficie. En otra realización, el compuesto de la invención es para su uso en un método en el que la maduración de las DC se puede realizar a través de, por ejemplo, la ligadura de CD40, la adición de oligodesoxirribonucleótido CpG, la ligadura de IL-1, TNFa o ligando del receptor de tipo Toll, la adición de lipoglucano bacteriano o polisacáridos, o la activación de una vía ¡ntracelulartal como TRAF-6 o NF-xB.

En una realización ilustrativa, el compuesto de la invención es para su uso en un método en el que la inducción de la maduración de las DC puede ser en combinación con la administración del receptor endocítico de un antígeno preseleccionado. En una realización, el compuesto de la invención es para su uso en un método en el que la administración del receptor endocítico de antígeno puede ser mediante el uso del receptor de DEC-205.

En una realización ilustrativa, el compuesto de la invención es para su uso en un método en el que se puede confirmar el estado de maduración de las células dendríticas, por ejemplo, mediante la detección de uno cualquiera o más de 1) un aumento de la expresión de uno o más de los antígenos p55, CD83, CD40 o CD86; 2) la pérdida del antígeno CD115, CD14, CD32 o CD68; o 3) la inversión a un fenotipo de macrófagos caracterizado por el aumento de la adhesión y la pérdida de velos tras la supresión de las citocinas que potencian la maduración de las células PBMC a las células dendríticas inmaduras, mediante métodos bien conocidos en la técnica tales como, por ejemplo, ¡nmunohistoquímica, análisis FACS y otros.

En una realización, el compuesto de la invención es para su uso en un método en el que la expansión de los NKT varía en respuesta a un antígeno de presentación. En una realización, el compuesto de la invención es para su uso en un método en el que se suministra un análogo de a-GalCer en el cultivo simultáneamente al contacto de las células dendríticas... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto representado por la estructura de fórmula 1:

(1)

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; para su uso en medicina.

2. Una composición farmacéutica que comprende el compuesto de la reivindicación 1 y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

3. La composición de la reivindicación 2, en la que la composición está en forma de una vacuna y el compuesto de fórmula 1 funciona como un adyuvante.

4. La composición de la reivindicación 3, en la que la vacuna comprende un agente vacunal y en la que el agente vacunal se selecciona del grupo que consiste en: un microorganismo muerto; un microorganismo viral vivo atenuado; un toxoide; un fragmento de microorganismo ¡nactlvado o atenuado; ADN; una proteína; una glucoproteína; un sacárldo; una combinación de los marcadores en células cancerosas; y una combinación de los marcadores en microorganismos.

5. La composición de las reivindicaciones 3 y 4, en la que la composición genera una eficacia de neutralización contra el virus de la gripe H5N1, en la que el virus de la gripe H5N1 se selecciona preferentemente entre al menos uno de: virus de la gripe H5N1 de tipo silvestre (E319); TK05; VN1194; ID05; Anhu¡05; pCHA5; y pCHA5-ll.

6. La composición de la reivindicación 2 para su uso en inmunoterapia antitumoral, en la que la composición está preferentemente en forma de una vacuna contra el cáncer y en la que el cáncer se selecciona preferentemente del grupo que consiste en: cáncer de pulmón; cáncer de mama; hepatoma; leucemia; tumor sólido y carcinoma.

7. La composición de la reivindicación 2 para su uso en el tratamiento o en la profilaxis de una infección viral o bacteriana, en la que la infección está causada preferentemente por uno del grupo seleccionado entre: Sph/ngomonas capsu/afe; virus de la encefalitis japonesa; Sfap/ry/ococcus aureus; y gripe.

8. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 2 a 7, en la que la composición está formulada para que sea adecuada para su administración por una vía seleccionada entre: subcutánea, intravenosa, intranasal, intramuscular y oral.

9. Un método de síntesis de un compuesto representado por la estructura de fórmula 1:

(1)

que comprende:

proteger selectivamente los grupos 2,3-dihidroxi de D-lixosa con 2-metoxipropeno en presencia de ácido, dando un producto intermedio de actónido;

someter un grupo hidroxilo primario del producto intermedio de actónido a cloruro de tritilo y condiciones básicas, dando un producto intermedio de tritiléter;

hacer reaccionar el producto intermedio de tritiléter con Ci3H27*PPh3*Br mediante olefinación de Wittig en presencia de hexametildisilazida de litio (LHMDS), mediante lo que se produce un producto intermedio de

alqueno con una proporción de E7Z de 2:1 según la caracterización por espectrometría de RMN de ^H; hidrogenar el producto intermedio de alqueno, dando un alcano;

activar un grupo hidroxi del alcano mediante anhídrido de triflato y 2,6-lutidina, dando un producto intermedio de triflato;

hacer reaccionar el producto intermedio de triflato con azida de tetrametilguanidinio (TMGA) mediante la reacción de SN2, dando un compuesto de azido con la configuración invertida;

retirar el grupo tritilo del compuesto de azido mediante el uso de ácido trifluoroacético (TFA), dando fitoesfingosina;

efectuar la glucosilación del derivado de galactosa donante y la fitoesfingosina aceptora usando anhídrido trifluorometanosulfónico (Tf20) y sulfuro de dimetilo (Me2S) como potenciadores, dando un producto intermedio clave que tenga un grupo azido;

reducir el grupo azido del producto intermedio clave usando una reacción de Staudinger, dando un producto intermedio de amina; y

acoplar el producto intermedio de amina con ácido graso usando EDC y HBTU.

10. Un compuesto de fórmula 1:

(1)

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento o en la profilaxis de una infección

viral o bacteriana.

11. El compuesto déla reivindicación 10, en el que la Infección está causada por uno del grupo seleccionado entre: Sp/i/ngomonas capsu/afe; virus de la encefalitis japonesa; Sfap/iy/ococcos áureos; y gripe.

12. Un compuesto de fórmula 1:

(1)

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento del cáncer.

13. El compuesto de la reivindicación 12, en el que el cáncer se selecciona preferentemente del grupo que consiste en: cáncer de pulmón; cáncer de mama; hepatoma; leucemia; tumor sólido y carcinoma.

14. Un compuesto representado por la estructura de fórmula 1:

(1)

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

15. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 14 representado por la estructura:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.