Tratamiento del cáncer con anticuerpos monoclonales anti-IL 13 novedosos.

Una composición farmacéutica para uso en inhibir la proliferación de células cancerosas que comprende un anticuerpo anti-IL-13 humana antagonista que se une específicamente a IL-13 humana,

en donde dicho anticuerpo inhibe competitivamente la unión de y/o se une al mismo epítopo que un anticuerpo obtenible del hibridoma 228B/C-1 (PTA-5657), en donde dicha composición farmacéutica se va a administrar con otra forma de tratamiento contra el cáncer.

Tratamiento del cáncer con anticuerpos monoclonales anti-IL 13 novedosos Antecedentes

IL13 es una citoquina Th2 pleotrópica producida predominantemente por células T cooperadoras CD4+ de tipo 2, así como células NKT, basófilos, y células cebadas (Hershey, GKK, J Allergy Clin Immunol. (2003) 111: 677-90). Además de sus papeles etiológicos es asma, fibrosis, enfermedad pulmonar obstructiva crónica y colitis ulcerativa (Wynn, TA, Annu Rev Immunol. (2003) 21: 425-56; Wynn TA., Nat Rev Immunol. (2004) 4: 583-94; Heller F et al. , Immunity (2002) 17: 629-38), también se sabe que IL13 desempeña papeles Importantes en crecimiento tumoral (Kapp U et at., J Exp Med. (1999) 189: 1939-4; Trieu Y et al., Cáncer Res. 2004; 64: 3271-5) y modulación de la Inmunidad tumoral (Terabe M et al., Cáncer Immunol Immunother. 2004; 53: 79-85; Terabe M et al., Nat Immunol. 2000; 1: 515-20). Por tanto, IL13 y sus receptores son potenciales dianas terapéuticas para el cáncer.

El linfoma de Hodgkin (LH) es un trastorno maligno de los ganglios linfáticos caracterizado por la producción anormal de múltiples citoquinas de la población celular maligna de LH, las células de Reed-Sternberg (RS) (véase, Kapp et al., y Trieu et al., anteriormente). Se mostró que IL13 fomenta la proliferación de LH mediante un mecanismo autocrino. Se mostró que los anticuerpos monoclonales (Acm) neutralizantes anti-IL13 Inhiben la proliferación de células de LH in vitro (Trieu et al., anteriormente; Skinnider et al., Leukemia and Lymphoma (2002) 43:1203-1210).

La evidencia que se acumula indica que los receptores de IL13 están muy expresados en una variedad de líneas celulares tumorales malignas humanas (por ejemplo, glioblastoma, tumores de cabeza y cuello, carcinoma de células escamosas, carcinoma de células renales, carcinoma de Kaposi asociado a SIDA, carcinoma de próstata, carcinoma pancreático y carcinomas epiteliales tal como adenocarcinoma del estómago, colon, y piel) (véase, por ejemplo, Debinski Wet al. J Biol Chem. (1995) 270: 16775-80; Puri RK et al. Blood (1996)87: 4333-9; Maini Aat al. J Urol. (1997) 158: 948-53; Debinski W et al. Clin Cáncer Res. (1995) 1: 1253-8; Kornmann M et al. Anticancer Res. (1999) 19: 125-31; Husain SR et al. Blood (2000) 95: 3506-13; Kawakami K et al. Cáncer Res. (2001) 61: 6194- 6200). Se mostró que una proteína de fusión recombinante que comprende IL13 acoplada a una forma mutada de la exotoxina de Pseudomonas destruía específicamente estas células tumorales in vitro. Por tanto, estos datos sugieren que el receptor de IL13 es una diana atractiva para dirigir la destrucción selectiva de tumores.

Se sabe ahora que los mediadores principales de la inmunidad antltumoral son células CD4+ Th1 y linfocitos T citotóxicos (LTC) CD8+. Puesto que la desviación ¡nmunitaria hacia Th2 suprime el desarrollo de Th1, se ha sugerido que la Inducción de una respuesta Th2 en pacientes de cáncer es uno de los mecanismos principales que reprimen la ¡nmunovlgllancla de tumores. Terabe y col. mostraron que un inhibidor de IL 13 (slL13RD2-Fc) inhibía la recidiva de tumores en un modelo de ratón. También se encontraron observaciones similares con ratones deficientes para STAT6 o IL4R, pero no con ratones deficientes para IL4. En conjunto, estos resultados indican que IL13 desempeña un papel Importante en suprimir la inmunidad antitumoral in vivo. Por tanto, inhibir IL13 podría fomentar la inmunidad antltumoral en pacientes de cáncer.

La terapia basada en anticuerpos ha demostrado ser muy eficaz en el tratamiento de varios cánceres. Por ejemplo, HERCEPTIN®, y RITUXAN® se han usado con éxito para tratar cáncer de mama y linfoma no hodgkiniano, respectivamente. La presente invención proporciona métodos alternativos de tratar el cáncer que superan las limitaciones de los métodos terapéuticos convencionales así como ofrece ventajas adicionales que serán aparentes de la descripción detallada.

Compendio de la invención

La presente invención se refiere a las formas de realización como se divulgan en las reivindicaciones. Específicamente, la presente invención proporciona una composición farmacéutica para su uso en inhibir la proliferación de células cancerosas que comprende un anticuerpo antagonista anti-IL-13 humana que se une específicamente a IL-13 humana, en donde dicho anticuerpo inhibe competitivamente la unión de y/o se une al mismo epítopo que un anticuerpo obtenible del hibridoma 228B/C-1 (PTA-5657), en donde dicha composición farmacéutica se va a administrar en combinación con otra forma de tratamiento contra el cáncer.

Además, la presente solicitud se refiere al tratamiento de cánceres y/o tumores que expresan IL13 con anticuerpos monoclonales anti-IL13 antagonistas novedosos. Los anticuerpos útiles en la presente invención comprenden anticuerpos anti-IL13 antagonistas novedosos que se unen específicamente y con alta afinidad a IL13 humana tanto glucosilada como sin glucosilar; en donde dicho anticuerpo inhibe competitivamente la unión de y/o se une al mismo epítopo que un anticuerpo obtenible del hibridoma 228B/C-1 (PTA-5657); no se une a IL13 de ratón, y neutraliza la actividad de IL13 humana a una proporción molar aproximada de 1:2 (Acm:IL13). También se incluyen en la presente invención anticuerpos que comprenden las regiones de unión a antígeno derivadas de las regiones variables de la cadena ligera y/o pesada de dichos anticuerpos. Los anticuerpos de la invención pueden ser monoclonales, y un anticuerpo monoclonal puede ser un anticuerpo humano, un anticuerpo quimérico, o un anticuerpo humanizado.

Los ejemplos de estos anticuerpos son 228B/C-1, 224A-4, 227-26 y 227-43. Los hibridomas que producen estos anticuerpos se depositaron el 20 de noviembre, 2003, en la Colección Americana de Cultivos Tipo, 10801 University Blvd., Manassas, VA 20110-2209, con los números de acceso PTA-5657, PTA-5656, PTA-5654 y PTA-5655, respectivamente. Estos anticuerpos se pueden dirigir a una célula tumoral que expresa IL13 in vivo. Estos anticuerpos se describen en la solicitud en tramitación junto a esta WO 2005/062967, presentada el 23 de diciembre, 2004.

Los anticuerpos descritos en el presente documento también incluyen anticuerpos que tienen una secuencia VL al menos el 95% homologa a la expuesta en SEQ ID NO: 3, y una secuencia VH al menos el 95% homologa a la expuesta en SEQ ID NO: 4; anticuerpos que tienen una secuencia VL al menos el 95% homologa a la expuesta en SEQ ID NO: 5, y una secuencia VH al menos el 95% homologa a la expuesta en SEQ ID NO: 6; y anticuerpos que tienen una secuencia VL al menos el 95% homologa a la expuesta en SEQ ID NO: 7, y una secuencia VH al menos el 95% homologa a la expuesta en SEQ ID NO: 8. También se divulga una molécula recombinante de anticuerpo, o un fragmento que se une a IL13 de la misma, que comprende al menos una cadena pesada de anticuerpo, o un fragmento de unión a IL13 de la misma, que comprende CDR no humanas en las posiciones 31-35 (CDR1), 50-65 (CDR2) y 95-102 (CDR3) (numeración de Kabat) de una anticuerpo anti-IL13 de ratón, en donde las posiciones 27- 30 tienen los aminoácidos Gly26, Phe27, Ser28, Leu29, Asn30 (SEQ ID NO: 18); y al menos una cadena ligera de anticuerpo, o una fragmento de unión a IL13 de la misma, que comprende CDR no humanas en las posiciones 24-34 (CDR1), 50-56 (CDR2) y 86-97 (CDR3) de un anticuerpo anti-lL13 de ratón, y regiones marco de un anticuerpo monoclonal humano.

Como se describe en el presente documento, los anticuerpos también incluyen fragmentos de anticuerpo de unión a antígeno humanos de los anticuerpos de la presente divulgación incluyendo, pero no están limitados a, Fab, Fab y F(ab)2, Fd, Fv de cadena única (scFv), anticuerpos de cadena única, Fv unidos por disulfuro (sdFv). También se divulgan anticuerpos de dominio único que comprenden un dominio VL o VH. Un ejemplo es un scFv que tiene la secuencia como se muestra en SEQ ID NO: 152.

Los anticuerpos también útiles en la presente invención incluyen secuencias humanizadas del anticuerpo monoclonal 228B/C-1. Las moléculas de anticuerpos recombinantes humanizados pueden comprender una región variable de la cadena ligera que comprende una secuencia de aminoácidos que tiene la fórmula FRL1-CDRL1- FRL2-CDRL2-FRL3-CDRL3-FRL4, en donde FRL1 consiste en cualquiera de SEQ ID NO: 20-25; CDRL1 consiste en cualquiera de SEQ ID NO: 99-103; FRL2 consiste en SEQ ID NO: 29; CDRL2 consiste en cualquiera de SEQ ID NO: 104-114; FRL3 consiste en cualquiera de SEQ ID NO: 30-56; CDRL3 consiste en cualquiera de SEQ ID NO: 115-116; y FRL4 consiste en SEQ ID NO: 57-59; y que comprende una región variable de la cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos que tiene la fórmula: FRH1-CDRH1-FRH2-CDRH2-FRH3-CDRH3-FRH4, en donde FRH1... [Seguir leyendo]

1. Una composición farmacéutica para uso en inhibir la proliferación de células cancerosas que comprende un anticuerpo anti-IL-13 humana antagonista que se une específicamente a IL-13 humana, en donde dicho anticuerpo inhibe competitivamente la unión de y/o se une al mismo epítopo que un anticuerpo obtenible del hibridoma 228B/C-1 (PTA-5657), en donde dicha composición farmacéutica se va a administrar con otra forma de tratamiento contra el cáncer.

2. La composición farmacéutica para uso como se define en la reivindicación 1, en donde dicho anticuerpo anti- IL-13 humana antagonista:

(i) es un anticuerpo humanizado de un anticuerpo obtenible del hibridoma 228B/C-1 (PTA-5657); o (¡i) comprende las regiones determinantes de complementariedad (CDR) de un anticuerpo obtenible del hibridoma 228B/C-1 (PTA-5657); o

(i¡¡) comprende las regiones de unión a antígeno derivadas de las regiones variables de la cadena ligera y/o la cadena pesada de un anticuerpo obtenible del hibridoma 228B/C-1 (PTA-5657).

3. La composición farmacéutica para uso como se define en la reivindicación 1 o 2, en donde dicho anticuerpo anti-IL-13 humana antagonista es un anticuerpo monoclonal humanizado de un anticuerpo obtenible del hibridoma 228B/C-1 (PTA-5657).

4. La composición farmacéutica para uso como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde dicho anticuerpo anti-IL-13 humana antagonista comprende una región variable de la cadena pesada que comprende las regiones determinantes de complementariedad CDRH1, CDRH2 y CDRH3 que tienen las secuencias de SEQ ID: 117, SEQ ID NO: 123 y SEQ ID NO: 135, respectivamente; y una región variable de la cadena ligera que comprende las regiones determinantes de complementariedad CDRL1, CDRL2 y CDRL3 que tienen las secuencias de SEQ ID NO: 99, SEQ ID NO: 104, y SEQ ID NO: 115, respectivamente.

5. La composición farmacéutica para uso como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde dicho anticuerpo anti-IL-13 humana antagonista es un anticuerpo humanizado de un anticuerpo producido por hibridoma 228B/C-1 (PTA-5657) y comprende una región variable de la cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 143 y una región variable de la cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 142.

6. La composición farmacéutica para uso como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde dicho anticuerpo obtenible del hibridoma 228B/C-1 (PTA-5657) comprende una región variable de la cadena pesada que comprende una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 4 y una región variable de la cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 3.

7. La composición farmacéutica para uso como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en donde el cáncer es linfoma de Hodgkin, cáncer de piel, cáncer de estómago, cáncer de colon, cáncer de mama, cáncer pancreático, cáncer de hígado, cáncer de próstata, cáncer de pulmón, cáncer de cabeza y cuello, cáncer de células renales, carcinoma de células escamosas, carcinoma de Kaposi asociado al S.I.D.A. o cáncer cerebral.

8. La composición farmacéutica para uso como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en donde dicho anticuerpo anti-IL-13 humana antagonista es un anticuerpo monoclonal, un anticuerpo monovalente, un anticuerpo multiespecífico, un anticuerpo humanizado, un anticuerpo quimérico, un anticuerpo de cadena única, un fragmento Fab o un fragmento F(ab).

9. La composición farmacéutica para uso como se define en la reivindicación 8, en donde dicho anticuerpo anti- IL-13 humana antagonista es un anticuerpo multiespecífico que es un anticuerpo biespecífico.

10. La composición farmacéutica para uso como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en donde dicho anticuerpo anti-IL-13 humana antagonista es un anticuerpo IgG.

11. La composición farmacéutica para uso como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en donde dicho anticuerpo anti-IL-13 humana antagonista se une al mismo epítopo que un anticuerpo obtenible del hibridoma 228B/C-1 (PTA-5657).

12. La composición farmacéutica para uso como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, en donde dicho anticuerpo anti-IL-13 humana antagonista está conjugado a un agente citotóxico o un isótopo radioactivo.

13. La composición farmacéutica para uso como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, en donde dicha composición farmacéutica se va a administrar por inhalación, inyección embolada, o infusión.

La composición farmacéutica para uso como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en donde la otra forma de tratamiento contra el cáncer es terapia de radiación, quimioterapia o anticuerpo antitumoral.