Tratamiento con anticuerpos anti-ErbB2.

Uso de un anticuerpo anti-ErbB2 en la preparación de un medicamento para el tratamiento para proporcionarbeneficio clínico medido por el aumento del tiempo hasta la progresión de la enfermedad de cáncer de mamamaligno caracterizado por la sobreexpresión de ErbB2 en un paciente humano,

en el que dicho anticuerpo se uneal epítopo 4D5 dentro de la secuencia del dominio extracelular de ErbB2 determinado por ensayo de bloqueocruzado usando dicho anticuerpo y anticuerpo 4D5 obtenible del depósito ATCC CRL 10463, y en el que elmedicamento es para administración combinada del anticuerpo con un agente quimioterapéutico que es un taxoide yno en combinación con un derivado de antraciclina, en el que la administración combinada tiene eficacia clínicamedida por la determinación del tiempo hasta la progresión de la enfermedad y disfunción de miocardio reducida encomparación con administración combinada del anticuerpo y derivados de antraciclina.

Tratamiento con anticuerpos anti-ErbB2

Campo de la invención La presente invención se refiere al tratamiento de trastornos caracterizados por la sobreexpresión de ErbB2 de mama maligno. Más específicamente, la invención se refiere al tratamiento de pacientes humanos con cáncer de mama maligno que sobreexpresa ErbB2 con una combinación de un anticuerpo anti-ErbB2 y un agente quimioterapéutico que es un taxoide, en ausencia de una antraciclina, por ejemplo, doxorrubicina o epirrubicina.

Antecedentes de la invención Se ha identifica que proto-oncogenes que codifican factores de crecimiento y receptores de factores de crecimiento desempeñan importantes tareas en la patogénesis de diversas neoplasias humanas, incluyendo cáncer de mama. Se ha descubierto que el gen humano de ErbB2 (erbB2, también conocido como her2, o c-erbB-2) , que codifica un receptor de glucoproteína transmembrana de 185-kd (p185HER2) relacionado con el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR) , se sobreexpresa en aproximadamente el 25 % al 30 % de los cánceres de mama humanos (Slamon et al., Science 235:177-182 [1987]; Slamon et al., Science 244:707-712 [1989]) .

Varias líneas de evidencia apoyan un papel directo para ErbB2 en la patogénesis y la agresividad clínica de los tumores que sobreexpresan ErbB2. La introducción de ErbB2 en células no neoplásicas ha demostrado causar su transformación maligna (Hudziak et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84:7159-7163 [1987]; DiFiore et al., Science 237: 78-182 [1987]) . Se descubrió que ratones transgénicos que expresan HER2 desarrollan tumores mamarios (Guy et

al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:10578-10582 [1992]) .

Se han descrito anticuerpos dirigidos contra productos de la proteína erbB2 humana y proteínas codificadas por el equivalente de rata del gen erbB2 (neu) . Drebin et al., Cell 41:695-706 (1985) se refieren a un anticuerpo monoclonal IgG2a que está dirigido contra el producto de rata del gen neu. Este anticuerpo llamado 7.16.4 causa modulación 30 negativa de la expresión de p185 en superficie celular sobre células B104-1-1 (células NIH-3T3 transfectadas con el proto-oncogén neu) e inhibe la formación de colonias de estas células. En Drebin et al. PNAS (USA) 83:9.129-9133 (1986) , se demostró que el anticuerpo 7.16.4 inhibía el crecimiento tumorigénico de células NIH-3T3 transformadas con neu así como células de neuroblastoma de rata (a partir de las cuales se aisló inicialmente el oncogén neu) implantadas en ratones desnudos. Drebin et al. en Oncogene 2:387-394 (1988) analizan la producción de un panel 35 de anticuerpos contra el producto de rata del gen neu. Se descubrió que todos los anticuerpos ejercían un efecto citostático sobre el crecimiento de células transformadas con neu suspendidas en agar blando. Anticuerpos de los isotipos IgM, IgG2a e IgG2b eran capaces de mediar la lisis in vitro significativa de células transformadas con neu en presencia del complemento, mientras que ninguno de los anticuerpos era capaz de mediar elevados niveles de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) de las células transformadas con neu. Drebin et al.

Oncogene 2:273-277 (1988) informan de que mezclas de anticuerpos reactivos con dos regiones distintas sobre la molécula p185 provocan efectos antitumorales sinérgicos sobre células NIH-3T3 transformadas con neu implantadas en ratones desnudos. Se revisan los efectos biológicos de anticuerpos anti-neu en Myers et al., Meth. Enzym. 198:277-290 (1991) . Véase también el documento WO94/22478 publicado el 13 de octubre de 1994.

Hudziak et al., Mol. Cell. Biol. 9 (3) :1165-1172 (1989) describen la generación de un panel de anticuerpos anti-ErbB2 que se caracterizó usando la línea celular de tumor de mama humano SKBR3. La proliferación celular relativa de las células SKBR3 tras la exposición a los anticuerpos se determinó por tinción con violeta cristal de las monocapas después de 72 horas. Usando este ensayo, se obtuvo una inhibición máxima con el anticuerpo llamado 4D5 que inhibía la proliferación celular en un 56 %. Otros anticuerpos del panel, incluyendo 7C2 y 7F3, reducían la 50 proliferación celular a un menor grado en este ensayo. Hudziak et al. concluyen que el efecto del anticuerpo 4D5 sobre células SKBR3 era citostático en lugar de citotóxico, ya que las células SKBR3 reanudan el crecimiento a una tasa casi normal después de la retirada del anticuerpo del medio. Se descubrió adicionalmente que el anticuerpo 4D5 sensibilizaba líneas celulares de tumor de mama que sobreexpresan p185erbB2 a los efectos citotóxicos de TNFα. Véase también el documento WO89/06692 publicado el 27 de julio de 1989. Los anticuerpos anti-ErbB2

analizados en Hudziak et al. se caracterizan adicionalmente en Fendly et al. Cancer Research 50:1550-1558 (1990) ; Kotts et al. In Vitro 26 (3) :59A (1990) ; Sarup et al. Growth Regulation 1:72-82 (1991) ; Shepard et al. J. Clin. Immunol. 11 (3) :117-127 (1991) ; Kumar et al. Mol Cell. Biol. 11 (2) :979-986 (1991) ; Lewis et al. Cancer Immunol. Immunother. 37:255-263 (1993) ; Pietras et al. Oncogene 9: 1829-1838 (1994) ; Vitetta et al. Cancer Research 54:5301-5309 (1994) ; Sliwkowski et al. J. Biol. Chem. 269 (20) : 14661-14665 (1994) ; Scott et al. J. Biol. Chem. 266:14300-5 (1991) ;

y D'souza et al. Proc. Natl. Acad. Sci. 91:7202-7206 (1994) .

Tagliabue et al. Int. J. Cancer 47:933-937 (1991) describen dos anticuerpos que se seleccionaron por su reactividad sobre la línea celular de adenocarcinoma pulmonar (Calu-3) que sobreexpresa ErbB2. Uno de los anticuerpos, llamado MGR3, se descubrió que se internalizaba, inducía la fosforilación de ErbB2, e inhibía el crecimiento de las 65 células tumorales in vitro.

McKenzie et al. Oncogene 4:543-548 (1989) generaron un panel de anticuerpos anti-ErbB2 con especificidades variables de epítopo, incluyendo el anticuerpo denominado TA1. Se descubrió que este anticuerpo TA1 inducía endocitosis acelerada de ErbB2 (véase Maier et al. Cancer Res. 51:5361-5369 [1991]) . Bacus et al. Molecular Carcinogenesis 3:350-362 (1990) informaron que el anticuerpo TA1 inducía la maduración de las líneas celulares de cáncer de mama AU-565 (que sobreexpresa el gen erbB2) y MCF-7 (que no) . Se descubrió que la inhibición del crecimiento y la adquisición de un fenotipo maduro en estas células estaba asociado con niveles reducidos de receptor de ErbB2 en la superficie celular y niveles aumentados transitorios en el citoplasma.

Stancovski et al. PNAS (USA) 88:8691-8695 (1991) generaron un panel de anticuerpos anti-ErbB2, los inyectaron i.p. en ratones desnudos y evaluaron su efecto sobre el crecimiento tumoral de fibroblastos murinos transformados por sobreexpresión del gen erbB2. Se detectaron diversos niveles de inhibición tumoral para cuatro de los anticuerpos, pero uno de los anticuerpos (N28) estimulaba constantemente el crecimiento tumoral. El anticuerpo monoclonal N28 inducía fosforilación significativa del receptor de ErbB2, mientras que los otros cuatro anticuerpos generalmente presentaban baja o ninguna actividad inductora de fosforilación. El efecto de los anticuerpos anti

ErbB2 sobre la proliferación de células SKBR3 también se ensayó. En este ensayo de proliferación de células SKBR3, dos de los anticuerpos (N12 y N29) causaron una reducción en la proliferación celular relativa al control. Se evaluó la capacidad de los diversos anticuerpos de inducir lisis celular in vitro mediante citotoxicidad dependiente del complemento (CDC) y citotoxicidad dependiente de células mediada por anticuerpos (ADCC) , concluyendo los autores de este artículo que la función inhibidora de los anticuerpos no se atribuía significativamente a CDC o a ADCC.

Bacus et al. Cancer Research 52:2580-2589 (1992) caracterizaron adicionalmente los anticuerpos descritos en Bacus et al. (1990) y Stancovski et al. de los párrafos precedentes. Extendiendo los estudios i.p. de Stancovski et al., se evaluó el efecto de los anticuerpos después de inyección i.v. en ratones desnudos que albergaban fibroblastos de ratón que sobreexpresaban ErbB2 humano. Como se observaba en su trabajo anterior, N28 aceleraba el crecimiento tumoral mientras que N12 y N29 inhibían significativamente el crecimiento de las células que expresan ErbB2. También se observó inhibición tumoral parcial con el anticuerpo N24. Bacus et al. también ensayaron la capacidad de los anticuerpos de promover un fenotipo maduro en las líneas celulares de cáncer de mama humano AU-565 y MDA-MB453 (que sobreexpresa ErbB2) así como MCF-7 (que contiene bajos niveles del receptor) . Bacus et al. observaron una correlación entre la inhibición tumoral in vivo y la diferenciación celular: el anticuerpo estimulador tumoral N28... [Seguir leyendo]

1. Uso de un anticuerpo anti-ErbB2 en la preparación de un medicamento para el tratamiento para proporcionar beneficio clínico medido por el aumento del tiempo hasta la progresión de la enfermedad de cáncer de mama 5 maligno caracterizado por la sobreexpresión de ErbB2 en un paciente humano, en el que dicho anticuerpo se une al epítopo 4D5 dentro de la secuencia del dominio extracelular de ErbB2 determinado por ensayo de bloqueo cruzado usando dicho anticuerpo y anticuerpo 4D5 obtenible del depósito ATCC CRL 10463, y en el que el medicamento es para administración combinada del anticuerpo con un agente quimioterapéutico que es un taxoide y no en combinación con un derivado de antraciclina, en el que la administración combinada tiene eficacia clínica medida por la determinación del tiempo hasta la progresión de la enfermedad y disfunción de miocardio reducida en comparación con administración combinada del anticuerpo y derivados de antraciclina.

2. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, en el que dicho cáncer de mama es carcinoma de mama metastásico.

3. Uso de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en el que dicho anticuerpo es un anticuerpo monoclonal intacto.

4. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que dicho anticuerpo es un anticuerpo humanizado. 20

5. Uso de acuerdo con la reivindicación 4, en el que el anticuerpo humanizado comprende un Fc de inmunoglobulina humana.

6. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, en el que dicho anticuerpo se une a uno cualquiera o más restos en la 25 SEC ID Nº 9.

7. El uso de la reivindicación 1, en el que dicho anticuerpo es un anticuerpo humanizado anti-ErbB2 4D5, en el que el anticuerpo anti-ErbB2 4D5 se puede obtener del depósito ATCC CRL 10463.

8. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que dicho taxoide es paclitaxel.

9. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que dicho taxoide es docetaxel.

10. Un anticuerpo anti-ErbB2 para su uso en un método de tratamiento para proporcionar beneficio clínico medido

por el aumento del tiempo hasta la progresión de la enfermedad de cáncer de mama maligno caracterizado por la sobreexpresión de ErbB2 en un paciente humano, en el que dicho anticuerpo se une al epítopo 4D5 dentro de la secuencia del dominio extracelular de ErbB2 determinado por un ensayo de bloqueo cruzado usando dicho anticuerpo y anticuerpo 4D5 obtenible del depósito ATCC CRL 10463, y en el que el método comprende administración combinada del anticuerpo con un agente quimioterapéutico que es un taxoide y no en combinación con un derivado de antraciclina, en el que la administración combinada tiene eficacia clínica medida por la determinación del tiempo hasta la progresión de la enfermedad y disfunción de miocardio reducida en comparación con administración combinada del anticuerpo y derivados de antraciclina.

11. El anticuerpo para su uso en un método de tratamiento de acuerdo con la reivindicación 10, en donde dicho 45 cáncer de mama es carcinoma de mama metastásico.

12. El anticuerpo para su uso en un método de tratamiento de acuerdo con la reivindicación 10 o la reivindicación 11, en donde dicho anticuerpo es un anticuerpo monoclonal intacto.

13. El anticuerpo para su uso en un método de tratamiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 10 a 12, en donde dicho anticuerpo es un anticuerpo humanizado.

14. El anticuerpo para uso en un método de tratamiento de acuerdo con la reivindicación 13, en donde el anticuerpo humanizado comprende un Fc de inmunoglobulina humana. 55

15. El anticuerpo para su uso en un método de tratamiento de acuerdo con la reivindicación 10, en donde dicho anticuerpo se une a uno cualquiera o más restos en la SEC ID Nº 9.

16. El anticuerpo para su uso en un método de tratamiento de acuerdo con la reivindicación 10, en donde dicho

anticuerpo es un anticuerpo humanizado anti-ErbB2 4D5, en donde el anticuerpo anti-ErbB2 4D5 se puede obtener del depósito ATCC CRL 10463.

17. El anticuerpo para su uso en un método de tratamiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 10

a 16, en donde dicho taxoide es paclitaxel. 65

18. El anticuerpo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 10 a 16, en donde dicho taxoide es docetaxel.