Producto de inmunoglobulina G (IgG) líquido.

Producto de inmunoglobulina G (IgG) líquido derivado de plasma en bruto o de una fracción de proteína plasmática en bruto,

que tiene las siguientes características:

a) una pureza de más del 95%,

b) un contenido de monómeros y dímeros de IgG de al menos el 95% y,

c) un contenido de IgA de menos de 6 mg de IgA/l

en el que la concentración de IgG es del 1-20% en peso.

Producto de inmunoglobulina G (IgG) líquido Campo de la invención

La presente invención se refiere a un proceso para purificar inmunoglobulinas, es decir, inmunoglobulina G (IgG), a partir de plasma en bruto o a partir de una fracción de proteína plasmática en bruto. La presente invención también se refiere a un producto de inmunoglobulina y al uso de tal producto de inmunoglobulina para fines médicos.

Antecedentes de la invención

Las inmunoglobulinas humanas normales (IHN) para su uso en la prevención y tratamiento de varias enfermedades infecciosas se introdujeron al final de la década de 1940. Las IHN preparadas mediante el método de fraccionamiento con etanol en frío según Cohn & Oncley (Cohn E. et al., (1946), J Am Chem Soc, 68, 459-475), (Oncley et al., (1949), J Am Chem Soc, 71,541-550) y posteriormente también mediante la modificación realizada por Kistler y Nitschmann (Kistler P y Nitschmann HS, (1952), Vox Sang, 7, 414-424) demostraron ser eficaces y seguras contra la transmisión de infección por virus cuando se administraban por vía subcutánea o por vía intramuscular.

La falta de inmunoglobulinas total o parcial congénita o adquirida (síndrome de inmunodeficiencia primaria y secundaria, respectivamente) se manifiesta por sí misma a través de infecciones habituales y graves frecuentes, especialmente de naturaleza bacteriana. La prevención de tales infecciones se logró previamente mediante inyecciones intramusculares o subcutáneas repetidas de grandes cantidades de IHN durante hasta varias veces a la semana como tratamiento de por vida, lo que es muy doloroso cuando el medicamento se administra por vía intramuscular.

Por tanto, al principio de la década de 1960 se intentó la administración de IHN por la vía intravenosa. Los ensayos mostraron que aproximadamente el 5% de los voluntarios sanos y aproximadamente el 95% de los pacientes con deficiencia de inmunoglobulinas desarrollaron efectos adversos inmediatos que variaban desde disnea hasta choque circulatorio y que eran de naturaleza tan grave que la administración intravenosa de IHN tuvo que abandonarse.

El motivo de los efectos adversos mencionados anteriormente resultó ser agregados de inmunoglobulinas que, entre otros efectos, activaban fuertemente el sistema del complemento. Esto se observó particularmente en pacientes que carecían de inmunoglobulinas. Pudieron observarse efectos adversos especialmente graves de naturaleza anafiláctica en pacientes que desarrollaron anticuerpos frente a IgA. En consecuencia, se desarrollaron métodos para evitar la formación de agregados y/o eliminar estos agregados durante el proceso de preparación, y hace unos veinte años se sometió a prueba la primera generación de una inmunoglobulina para administración intravenosa (IGIV) y se encontró que era adecuada.

El fin original de las IGIV era aliviar los episodios infecciosos en pacientes con falta de inmunoglobulinas total o parcial congénita o adquirida, y eliminar las molestias relacionados con la administración de IHN. Otra ventaja de las IGIV es que pueden administrarse dosis grandes de inmunoglobulina en un corto tiempo, y por esto es posible obtener concentraciones en sangre suficientemente altas de manera muy rápida. Especialmente cuando se tratan infecciones bacterianas graves, es de importancia establecer altas concentraciones en los sitios de infección rápidamente.

En los últimos años, se ha demostrado que las IGIV son eficaces en otras enfermedades graves cuyo tratamiento puede ser difícil de otra manera, por ejemplo hemorragias provocadas por la desaparición de las plaquetas sanguíneas con una base inmunológica, púrpura trombocitopénica idiopática (PTI), en algunas enfermedades raras tales como el síndrome de Kawasaki y varias enfermedades autoinmunitarias tales como polirradiculitis (síndrome de Guillain-Barre). Otras enfermedades cuyo tratamiento ha sido difícil hasta ahora están sometiéndose actualmente a ensayos clínicos con IGIV. El mecanismo de acción en estas enfermedades sólo se ha esclarecido parcialmente. El efecto se supone que está relacionado con las denominadas propiedades inmunomoduladoras de IgG, por ejemplo un bloqueo de receptores de Fcy en células fagocíticas, un aumento del metabolismo de IgG, la regulación por disminución de la producción de citocinas y la interferencia con una supuesta red de idiotipos/antiidiotipos, especialmente relevante para la neutralización de la reactividad autoinmunitaria.

La primera generación de IGIV se preparó mediante escisión con pepsina del material de partida (fracción II de Cohn), siendo el fin de la escisión la eliminación de los agregados de inmunoglobulina. No se incluyeron etapas de cromatografía en columna en el proceso. El producto tenía que liofilizarse con el fin de permanecer estable durante un periodo de tiempo razonable y se disolvía inmediatamente antes de su uso.

El material de partida para las IGIV eran IHN que se había demostrado que eran seguras con respecto a la transmisión de virus cuando se usaban para administración intramuscular. Por tanto, se consideró que las IGIV eran seguras. Sin embargo, tras varios años de uso clínico, se mostró sorprendentemente que los productos de IGIV de

algunos fabricantes provocaban la transferencia de la infección por virus de la hepatitis C.

Estudios para dilucidar el destino de los virus durante la producción de IHN mostraron que la eliminación de virus en el proceso de fraccionamiento del plasma para dar IHN es modesta. La seguridad de las IHN para uso intramuscular es probable que se deba al hecho de que contiene inmunoglobulinas protectoras. En combinación con el modesto volumen inyectado y la vía intramuscular de administración, estas inmunoglobulinas protectoras pueden neutralizar e inutilizar virus comunes en plasma no infeccioso. Especialmente cuando se administran por vía intravenosa grandes dosis de inmunoglobulinas, pueden producirse infecciones por virus tal como se demostró al principio de la década de 1990. Por tanto, se reconoció que los procesos de producción deben comprender una o más etapas bien definidas de inactivación y/o eliminación de virus.

Una segunda generación de IGIV basada en moléculas de inmunoglobulina no escindidas y no modificadas con baja actividad anticomplementaria y alta estabilidad se introdujo a mediados de la década de 1980, pero todavía en forma de un producto liofilizado. Estas IGIV se purificaban mediante varias etapas de cromatografía. Los productos de ese tipo dominan actualmente el mercado de IGIV. Las generaciones primera y segunda de IGIV, por tanto, aparecen como polvos liofilizados que se disuelven inmediatamente antes de su uso.

La disolución de IGIV liofilizada es lenta (hasta 30 minutos para un vial). A menudo tienen que disolverse varias porciones para un paciente. Puesto que es de alta prioridad para los usuarios tener una IGIV en disolución lista para su uso, se han introducido productos líquidos en el mercado. De manera más importante, todavía existe una necesidad de mejora de los procesos de producción con el fin de obtener una preparación de IGIV altamente purificada, estable y completamente nativa con eficacia clínica superior y menos reacciones farmacológicas adversas. Por tanto, se necesita un proceso mejorado y desarrollado adicional para purificar IgG a partir de plasma en bruto o una fracción de proteína plasmática para obtener un producto de IGIV líquido seguro con respecto a los virus. Finalmente, el proceso debe diseñarse de tal manera que pueda usarse en una producción a gran escala.

El proceso de purificación descrito en la presente solicitud conduce a un producto de inmunoglobulina líquido para administración intravenosa que puede caracterizarse como una nueva generación de IGIV altamente purificada, completamente nativa, biológicamente activa, doblemente inactivada con respecto a virus y estable, que no contiene ningún detergente, polietilenglicol (PEG) o albúmina como estabilizador.

El documento WO 86/06727 y el documento US 4.296.027 dan a conocer métodos alternativos para la preparación de inmunoglobulinas.

Sumario de la invención

La presente invención se refiere a un producto de inmunoglobulina líquido mejorado que, entre otras cosas, puede administrarse por vía intravenosa.

Un producto de inmunoglobulina obtenido mediante el método dado a conocer en el presente documento podría denominarse IGIV de tercera generación. El proceso se caracteriza por las siguientes condiciones para el fraccionamiento: se evita la escisión con pepsina, se eliminan agregados y partículas por precipitación (una etapa de proceso validada para funcionar como etapa de eliminación de virus), se logra una purificación... [Seguir leyendo]

1. Producto de inmunoglobulina G (IgG) líquido derivado de plasma en bruto o de una fracción de proteína plasmática en bruto, que tiene las siguientes características:

a) una pureza de más del 95%,

b) un contenido de monómeros y dímeros de IgG de al menos el 95% y,

c) un contenido de IgA de menos de 6 mg de IgA/l

en el que la concentración de IgG es del 1-20% en peso.

2. Producto de IgG según la reivindicación 1, en el que la pureza es de al menos el 97%.

3. Producto de IgG según la reivindicación 2, en el que la pureza es de al menos el 98%.

4. Producto de IgG según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el contenido de monómeros y dímeros de IgG es de al menos el 97%.

5. Producto de IgG según la reivindicación 4, en el que el contenido de monómeros y dímeros de IgG es de al menos el 98%.

6. Producto de IgG según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el contenido de IgA es de menos de 4 mg de IgA/l.

7. Producto de IgG según la reivindicación 6, en el que el contenido de IgA es de menos de 3 mg de IgA/l.

8. Producto de IgG según la reivindicación 7, en el que el contenido de IgA es de menos de 2 mg de IgA/l.

9. Producto de IgG según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que no comprende albúmina como estabilizador.

10. Producto de IgG según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que no comprende detergente no iónico, PEG o albúmina como estabilizador.

11. Producto de IgG según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el pH está en el intervalo de 5,1- 5,7.

12. Producto de IgG según cualquier reivindicación anterior, en el que la concentración de IgG es del 5% o el 10% en peso.

13. Producto de IgG según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, en el que la concentración de IgG es del 12%, el 14%, el 16%, el 18% o el 20% en peso.

14. Producto de IgG según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que contiene menos del 1,5% de polímeros y agregados.