Preparaciones de inmunoglobulina que tienen mayor estabilidad.

Una preparación de inmunoglobulina estable, donde la preparación contiene prolina y tiene un pH de 4.

2 a 5.4 ydonde la preparación no contiene nicotinamida.

Preparaciones de inmunoglobulina que tienen mayor estabilidad

La presente invención se refiere a una preparación de inmunoglobulina con mayor estabilidad, que contiene prolina como estabilizante y tiene un pH de 4.2 a 5.4. La invención se refiere además a una composición farmacéutica y a un método de estabilización de preparaciones de inmunoglobulina.

Las preparaciones de proteínas, en particular las preparaciones de inmunoglobulina para inyección intravenosa, se han utilizado desde hace bastante tiempo. Las proteínas, y la inmunoglobulina en particular, tienden a formar agregados y/o dímeros y a fragmentarse o desnaturalizarse. Si dichas soluciones se inyectan por vía intravenosa, los agregados pueden provocar reacciones secundarias graves inclusive shock anafiláctico. Con el fin de evitar la agregación, la fragmentación, etc. en dichas soluciones de proteínas, y para mejorar su estabilidad, se han intentado una serie de tratamientos en el estado actual de la tecnología. Por ejemplo, para mejorar la estabilidad en el almacenamiento, a menudo las preparaciones de IgG intravenosa para uso clínico se liofilizan (liofilización) , pero dichas preparaciones se deben reconstituir con un diluyente antes de usar. El paso de reconstitución es incómodo y consume mucho tiempo, y aumenta la probabilidad de contaminación del producto. Otra manera, bien conocida en el área, de mejorar la estabilidad y el almacenamiento de la inmunoglobulina, es la adición de excipientes estabilizantes de la proteína a la preparación de IgG. Los excipientes conocidos incluyen azúcares, polioles, aminoácidos, aminas, sales, polímeros y tensioactivos. En el área existen abundantes ejemplos de estrategias de estabilización de los productos farmacéuticos de proteínas. Por ejemplo, la patente de los Estados Unidos 4, 499, 073 (Tenold) mejora la estabilización a través de la selección del pH y la fuerza iónica. JP 54020124 da a conocer la adición de un aminoácido a una preparación intramuscular para hacer que el almacenamiento sea estable y seguro. JP 57031623 y JP 57128635 dan a conocer el uso de arginina y/o lisina con NaCl en preparaciones de IgG de 5 a 15% para lograr la estabilidad a largo plazo en una preparación intramuscular. JP 56127321 da a conocer la adición a IgG de un alcohol de azúcar que funciona mejor que la glucosa utilizada en el pasado para suprimir la agregación. JP 4346934 da a conocer el uso de baja conductividad (menos de 1 mmho) , pH 5.3 a 5.7 y opcionalmente uno o más estabilizantes como PEG, albúmina sérica humana y manitol. US 4, 439, 421 (Hooper) instruye acerca de la adición de una macromolécula hidrófila, un poliol y otra proteína para lograr estabilidad ante la generación de ACA (actividad anti-complemento) . US 5, 945, 098 (Samo) da a conocer la estabilización de soluciones isotónicas por adición de aminoácidos (glicina 0.1 a 0.3 M) y detergentes no iónicos (polisorbato) y PEG. US 4, 186, 192 (Lundblad) da a conocer diversos aditivos, incluidos aminoácidos, sin especificar, sin embargo, el uso de aminoácidos individuales específicos. Esta divulgación incluye la estabilización de IgG con maltosa y además glicina hasta 0.1 M. US 4, 362, 661 (Ono) da a conocer el uso de aminoácidos neutros y básicos para impartir estabilidad a un producto de IgG al 5%. Todos los documentos mencionados antes dan a conocer preparaciones de IgG de un pH ácido pero todavía relativamente alto, superior a 5.2.

Además de prevenir la formación de agregados de inmunoglobulina, también se ha reconocido que la formación de dímeros, en particular de IgG, puede ser perjudicial para las preparaciones de IgG para administración por vía intravenosa. Aunque los dímeros de IgG no son conocidos por causar shock anafiláctico, sin embargo se encontró que preparaciones de IgG con un contenido de dímero elevado, no son tan bien toleradas en inyección intravenosa y pueden provocar efectos secundarios indeseados, como fiebre, náuseas y a veces hipotensión arterial. Los efectos hipotensores fueron detectados en un modelo de ratas por Bleaker et al (Vox Sanguinis 52, 281-290, 1987) , y esto también muestra una correlación aparente con el contenido de dímero. La formación de dímeros no llega a ser un problema cuando la preparación de IgG se liofiliza poco después de que se produce. Sin embargo, si la preparación está destinada al almacenamiento en forma líquida no liofilizada, la concentración de dímero aumenta con el tiempo de almacenamiento.

La patente de los Estados Unidos Nº 5, 871, 736 (Bruegger et al.) da a conocer preparaciones de inmunoglobulina, particularmente preparaciones líquidas de IgG para infusión intravenosa que contienen uno o más estabilizantes anfifílicos para lograr estabilidad ante la formación de dímeros. Los estabilizantes anfifílicos incluyen el ácido nicotínico y sus derivados, en particular nicotinamida y, principalmente, en conjunción con los anteriores, aminoácidos que tienen cadenas laterales lipófilas sin carga, por ejemplo, fenilalanina, metionina, leucina, isoleucina, prolina y valina. La divulgación experimental de este documento del estado anterior de la técnica da a conocer aminoácidos siempre en conjunto con nicotinamida, y las concentraciones dadas a conocer para los aminoácidos son 200 mmol/l para prolina, 80 mmol/l para glicina y 120 mmol/litro para isoleucina.

El rango de pH para las preparaciones dadas a conocer en US 5, 871, 736 se establece en general como entre 4 y 8, pero la divulgación real de los ejemplos indica un pH de 5.3.

Aunque la patente de los Estados Unidos recién mencionada da a conocer preparaciones de IgG en las cuales la formación de dímero ha sido suprimida en cierta medida, sigue siendo deseable proporcionar preparaciones de proteínas, en particular, preparaciones de inmunoglobulina, que presenten una mayor estabilización, en particular a temperatura ambiente.

Los inventores encontraron que se puede lograr un grado de estabilización asombrosamente alto de las preparaciones de proteína líquidas, ajustando el pH de la preparación final a un valor entre 4.2 y 5.4 y agregando como estabilizante, un aminoácido básico o no polar.

Por lo tanto, la presente invención proporciona una preparación de inmunoglobulina con una mayor estabilidad, donde la preparación contiene prolina como estabilizante que no se utiliza en combinación con nicotinamida y donde la preparación tiene un pH de 4.2 a 5.4. Cuando se utiliza prolina como estabilizante, preferentemente es L-prolina. También es posible utilizar equivalentes de prolina, por ejemplo, análogos de prolina.

Sorprendentemente, se encontró que la adición de prolina por sí sola, sin otros estabilizantes (como nicotinamida) y el ajuste del pH de la preparación final aumentan notablemente la estabilidad de esas preparaciones, particularmente a temperatura ambiente. La mayor estabilidad es demostrada por la mejor estabilidad de las preparaciones a temperaturas entre alrededor de 2 °C y alrededor de 40 °C, especialmente a temperatura ambiente que preferentemente varía entre aproximadamente 10 °C, más preferentemente aproximadamente 15 °C, aún más preferentemente aproximadamente 20 °C y aproximadamente 30 °C, más preferentemente 25 °C. La mayor estabilidad de las preparaciones de la invención también es visible a temperaturas superiores entre alrededor de 30 °C y alrededor de 40 ° C, incluida la temperatura corporal de aproximadamente 37 °C. Preferentemente, la mayor estabilidad se define además, alternativa o adicionalmente, como mayor tiempo de almacenamiento, menor fragmentación, menor formación de agregados, menor formación de dímeros y/o menor decoloración. Mayor tiempo de almacenamiento significa que las preparaciones de la invención son preferentemente estables durante al menos 30 días, preferentemente al menos 60 días, más preferentemente al menos 90 días, aún más preferentemente al menos 120 días, muy preferentemente durante aún más tiempo.

Menor agregación significa preferentemente que las preparaciones muestran un menor porcentaje de agregados (en particular en el caso de Ig) que las preparaciones convencionales. Preferentemente, el contenido de dímero de las preparaciones es inferior a aproximadamente 12%, preferentemente inferior a aproximadamente 10%, más preferentemente inferior a aproximadamente 8%. Menor coloración significa preferentemente que la densidad óptica de las formulaciones de la invención es entre aproximadamente 20% y 60% menor que la de las formulaciones convencionales.

En general, las preparaciones de inmunoglobulina de la presente invención son formulaciones líquidas que son útiles para inyección intravenosa. Dichas preparaciones se pueden almacenar y son estables en forma líquida y... [Seguir leyendo]

1. Una preparación de inmunoglobulina estable, donde la preparación contiene prolina y tiene un pH de 4.2 a 5.4 y

donde la preparación no contiene nicotinamida. 5

2. La preparación de la reivindicación 1, que contiene prolina a una concentración final de al menos 0.2 M.

3. Una preparación de inmunoglobulina estable, donde la preparación contiene prolina y tiene un pH de 4.2 a 5.4 y

donde la concentración final de prolina es entre 0.2 y 0.4 M. 10

4. La preparación de la reivindicación 1 a 3, donde la prolina es L-prolina.

5. La preparación de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que tiene un pH de 4.5 a 5.2.

6. La preparación de la reivindicación 5, que tiene un pH de 4.6 a 5.0.

7. La preparación de la reivindicación 6, que contiene prolina a una concentración final de 0.25 M.

8. La preparación de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, donde su concentración de inmunoglobulina es 20 entre 5 y 25% p/v.

9. La preparación de la reivindicación 8, donde su concentración de inmunoglobulina es entre 15 y 20% p/v, para administración subcutánea.

10. La preparación de la reivindicación 8, donde su concentración de inmunoglobulina es entre 6 y 15% p/v, para administración intravenosa.

11. La preparación de la reivindicación 10, donde su concentración de inmunoglobulina es entre 8 y 12% p/v.

12. La preparación de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, donde la preparación es una preparación de IgG, IgA o IgM.

13. Una composición farmacéutica que comprende la preparación de inmunoglobulina de una de las reivindicaciones precedentes y aditivos farmacéuticamente aceptables. 35

14. Un método de estabilización de las preparaciones de inmunoglobulina, que comprende proporcionar una solución acuosa de inmunoglobulina y agregarle prolina, donde el pH de la solución se ajusta a un pH de aproximadamente 4.2 a 5.4 y donde la prolina no se usa en combinación con nicotinamida.

15. El método de la reivindicación 14, donde el pH se ajusta a 4.8.

16. El método de la reivindicación 14 o la reivindicación 15, donde la concentración de prolina se ajusta entre 0.2 y

0.4 M. 45

Figuras