Agentes citotóxicos que comprenden nuevos derivados de tomaimicina y su uso terapéutico.

Un compuesto seleccionado de la lista siguiente:**Fórmula**

así como los derivados de mercapto correspondientes,

o sus sales, hidratos o sales hidratadas aceptables farmacéuticamente o las estructuras cristalinas polimórficas de estos compuestos o sus isómeros ópticos, racematos, diastereómeros o enantiómeros

Agentes citotóxicos que comprenden nuevos derivados de tomaimicina y su uso terapéutico

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a nuevos agentes citotóxicos y a su uso terapéutico. Más específicamente, la invención se refiere a nuevos agentes citotóxicos que comprenden derivados de tomaimicina y a su uso terapéutico. Estos nuevos agentes citotóxicos tienen utilidad terapéutica como resultado de la liberación de los derivados de tomaimicina en una población específica de células de una manera dirigida por medio de la asociación química del derivado de tomaimicina con un agente de unión a las células.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

Se han descrito muchos intentos de dirigir específicamente conjugados anticuerpo monoclonal-fármaco a células tumorales (Sela et al., en Immuno-conjugates 189-216 (C. Vogel, ed. 1987) ; Ghose et al., en Targeted Drugs 1-22

(E. Goldberg; ed. 1.983) ; Diener et al, en Antibody mediated deliver y systems, 1-23 (J. Rodwell, ed. 1.988) ; Pietersz et al, en Antibody mediated deliver y systems, 25-53 (J. Rodwell, ed. 1.988) ; Bumol et al, en Antibody mediated deliver y systems, 55-79 (J. Rodwell, ed. 1.988) ; G.A. Pietersz & K. Krauer, 2, J. Drug Targeting, 183-215 (1.994) ; R.

V. J. Chari, 31 Adv. Drug Deliver y Revs., 89-104 (1998) ; W.A. Blattler & R.V.J. Chari, en Anticancer Agents, Frontiers in Cancer Chemotherapy, 317-338, ACS Symposium Series 796; e I. Ojima et al eds, American Chemical Society 2001}. Todas las referencias y patentes citadas en la presente memoria se incorporan como referencia.

Se han conjugado fármacos citotóxicos, tales como: metotrexato, daunorubicina, doxorubicina, vincristina, vinblastina, melfalán, mitomicina C y clorambucilo, con varios anticuerpos monoclonales murinos. En algunos casos, las moléculas del fármaco se unieron a las moléculas de anticuerpo a través de una molécula portadora intermedia, tal como albúmina sérica (Garnett et al., 46 el Cancer Res. 2.407-2.412 (1.986) ; Ohkawa et al 23, Cancer Immunol. Immunother. 81-86 (1986) ; Endo et al, 47 Cancer Res. 1076-1080 (1980) ) , dextrano (Hurwitz et al, 2 Appl. Biochem. 25-35 (1980) ; Manabi et al, 34 Biochem. Pharmacol. 289-291 (1985) ; Dillman et al, 46 Cancer Res., 4886-4891 (1986) ; Shoval et al, 85, Proc. Natl. Acad. Sci., 8.276-8.280 (1.988) ) o ácido poliglutámico (Tsukada et al, 73, J. Natl. Canc. Inst., 721-729 (1.984) ; Kato et al 27 J. Med. Chem., 1602-1607 (1984) ; Tsukada et al, 52, Br. J. Cancer, 111-116 (1.985) ) .

Se ha empleado una amplia serie de tecnologías de ligadores para la preparación de tales inmunoconjugados y se han investigado tanto ligadores escindibles como no escindibles. En la mayoría de los casos, el potencial citotóxico total de los fármacos sólo podía observarse, sin embargo, si las moléculas de fármaco se podían liberar de los conjugados en el lugar diana de forma no modificada.

Uno de los enlazadores escindibles que se ha empleado para la preparación de conjugados anticuerpo-fármaco es un enlazador lábil a ácidos basado en el ácido cis-aconítico que se aprovecha del medio ácido de los diferentes compartimentos intracelulares, tales como los endosomas encontrados durante la endocitosis mediada por receptores y los lisosomas. Shen y Ryser introdujeron este método para la preparación de conjugados de daunorubicina con vehículos macromoleculares (102 Biochem. Biophys. Res. Commun. 1048-1054 (1981) ) . Yang y Reisfeld usaron la misma técnica para conjugar daunorubicina con un anticuerpo antimelanoma (80 J. Natl. Canc. Inst. 1154-1159 (1988) ) . Dillman et al. también usaron un enlazador lábil a ácidos de forma similar para preparar conjugados de daunorubicina con un anticuerpo anti-célula T (48 Cancer Res. 6097-6102 (1988) ) .

Un enfoque alternativo, explorado por Trouet et al., implica unir la daunorubicina con un anticuerpo a través de un puente espaciador peptídico (79 Proc. Natl. Acad. Sci. 626-629 (1982) ) . Esto se hizo con la premisa de que el fármaco libre podría liberarse de tal conjugado por acción de las peptidasas lisosomales.

Sin embargo, los ensayos de citotoxicidad in vitro han demostrado que los conjugados anticuerpo-fármaco raramente alcanzan la misma potencia citotóxica que los fármacos libres sin conjugar. Esto sugirió que los mecanismos a través de los que las moléculas de fármaco se liberan de los anticuerpos eran muy ineficaces. En el área de las inmunotoxinas, los conjugados formados mediante puentes disulfuro entre anticuerpos monoclonales y toxinas proteicas catalíticamente activas mostraron ser más citotóxicos que los conjugados que contenían otros enlazadores. Véanse Lambert et al., 260 J. Biol. Chem. 12035-12041 (1985) ; Lambert et al., en Immunotoxins 175209 (A. Frankel, ed. 1988) ; Ghetie et al, 48, Cancer Res. 2610-2617 (1988) . Esto se atribuyó a la elevada concentración intracelular de glutatión que contribuye a una escisión eficaz del enlace disulfuro entre una molécula de anticuerpo y una toxina. A pesar de esto, solo se han descrito unos pocos ejemplos de la utilización de puentes disulfuro para la preparación de conjugados entre fármacos y macromoléculas. Shen et al. (260 J. Biol. Chem. 10905-10908 (1985) ) describieron la conversión de metotrexato en un derivado de mercaptoetilamida seguido por conjugación con poli-D-lisina mediante un enlace disulfuro. Otro informe describió la preparación de un conjugado de la caliqueamicina, fármaco tóxico que contiene trisulfuro, con un anticuerpo (Hinman et al., 53 Cancer Res. 33363342 (1993) ) .

Una razón para la falta de conjugados anticuerpo-fármaco unidos por disulfuro es la falta de disponibilidad de fármacos citotóxicos que tengan un resto que contiene un átomo de azufre que pueda utilizarse fácilmente para unir

el fármaco a un anticuerpo a través de un puente disulfuro. Además, es difícil la modificación química de los fármacos existentes sin disminuir su potencial citotóxico.

Otra desventaja principal de los conjugados anticuerpo-fármaco existentes es su incapacidad para suministrar una concentración suficiente de fármaco en el lugar diana debido al número limitado de antígenos dirigidos y la citotoxicidad relativamente moderada de los fármacos canceroestáticos como metotrexato, daunorubicina y vincristina. Para conseguir una citotoxicidad significativa, se hace necesaria la unión de un gran número de moléculas de fármaco, bien directamente al anticuerpo o mediante una molécula portadora polimérica. Sin embargo, tales anticuerpos modificados de forma importante presentan a menudo una unión debilitada con el antígeno diana y una eliminación in vivo rápida del torrente circulatorio.

A pesar de las dificultades descritas anteriormente, se han descrito agentes citotóxicos útiles que comprenden restos de unión a las células y el grupo de fármacos citotóxicos conocidos como maitansinoides (documentos USP 5.208.020, USP 5.416.064 y R. V. J. Chari, 31 Advanced Drug Deliver y Reviews 89-104 (1998) ) . De manera similar, también se han descrito agentes citotóxicos útiles que comprenden restos de unión a la célula y análogos y derivados del potente antibiótico antitumoral CC-1065 (patente de EE.UU. 5.475.092, patente de EE.UU. 5.585.499 y patente de EE.UU. 6.756.397) .

Los derivados de tomaimicina son pirrolo[1.4]benzodiazepinas (las PBD) , una clase conocida de compuestos que ejercen sus propiedades biológicas por medio de la unión covalente al N2 de guanina en el surco menor del ADN. Las PBD incluyen una serie de aglutinantes de surco menor tales como antramicina, neotramicina y DC-81. Sin embargo, la actividad antitumoral de la tomaimicina está limitada sin embargo debido a su toxicidad no específica para las células normales. De esta manera, existe la necesidad de aumentar la actividad terapéutica y disminuir los efectos tóxicos no específicos de los compuestos de tomaimicina. Los presentes autores han demostrado que esta necesidad puede satisfacerse por la liberación dirigida de compuestos de tomaimicina por medio de su unión con agentes de unión a la célula. Adicionalmente, existe la necesidad de desarrollar derivados de tomaimicina que sean solubles y estables en disoluciones acuosas. Además, la tomaimicina no es suficientemente potente como para usarse en conjugados de agentes de unión a la célula.

Recientemente se han descrito algunos derivados de PBD y su actividad antitumoral en modelos preclínicos (documentos WO 00/12508 y WO2005/085260) .

El documento WO 2000/12508 describe derivados de PBD unidos mediante un grupo O-alquileno-O.

El documento WO 2005/085260 describe derivados de PBD unidos mediante un grupo O-alquileno-O.

El documento WO 2005/085250 describe... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto seleccionado de la lista siguiente: así como los derivados de mercapto correspondientes,

o sus sales, hidratos o sales hidratadas aceptables farmacéuticamente o las estructuras cristalinas polimórficas de estos compuestos o sus isómeros ópticos, racematos, diastereómeros o enantiómeros.

2. Un compuesto seleccionado de la lista siguiente:

• 8, 8’-[4- (3-terc-butoxicarbonilaminopropiloxi) -2, 6-piridinadiilbis- (metilenooxi) ]-bis[ (S) -2-et- (E) -ilideno-7-metoxi1, 2, 3, 11a-tetrahidro-5H-pirrolo[2, 1-c][1, 4]benzodiazepin-5-ona]

• 8, 8’-[5- (3-aminopropiloxi) -1, 3-bencenodiilbis (metilenooxi) ]-bis[ (S) -2-et- (E) -ilideno-7-metoxi-1, 2, 3, 11a-tetrahidro-5Hpirrolo[2, 1-c][1, 4]benzodiazepin-5-ona]

• 8, 8’-[5- (N-metil-3-terc-butoxicarbonilaminopropil) -1, 3-bencenodiilbis- (metilenooxi) ]-bis