Uso de etilenglicol ésteres de derivados de monohidrobenzoporfirina como agentes fotoactivos.

Un compuesto de fórmula

o sus formas metaladas o marcadas o conjugadas;

para uso en un método de terapia fotodinámica para modular una respuesta inmune.

Uso de etilenglicol ésteres de derivados de monohidrobenzoporfirina como agentes fotoactivos

Campo técnico

La invención se refiere a compuestos útiles en la terapia fotodinámica (PDT) y a aplicaciones relacionadas. En particular se refiere a ésteres de etilenglicol de monohidrobenzoporfirinas.

Fundamento de la técnica La terapia fotodinámica (PDT) generalmente implica la administración de compuestos que son capaces de absorber luz, típicamente en el intervalo visible, pero también en el ultravioleta próximo, seguido por la irradiación de posiciones en el sujeto para el que se desea un efecto tóxico o inhibidor. La PDT se desarrolló inicialmente usando hematoporfirina y compuestos relacionados en el tratamiento de tumores, puesto que parecía que estos compuestos "anidarían" en posiciones que contienen células que se dividen rápidamente. Entonces, podría irradiarse el tumor con luz absorbida por la hematoporfirina produciendo la destrucción del tejido circundante. Desde entonces la PDT se considera útil para el tratamiento de placas ateroescleróticas, restenosis, infecciones en la corriente sanguínea, artritis reumatoide, psoriasis y en el tratamiento de condiciones oculares no limitadas necesariamente a tumores.

La Patente de EE.UU. Nº 5.171.749 y las Patentes de EE.UU., sobre solicitudes relacionadas, Nºs 5.283.255; 5.399.583; 4.883.790; 4.920.143; y 5.095.030; describen y reivindican un tipo de compuestos fotoactivos útiles en la PDT, llamados monohidrobenzoporfirinas o "BPD". Esta clase se obtiene por reacción de Diels-Alder de un alquino mono- o disustituido con protoporfirina-IX y los compuestos resultantes pueden además isomerizarse, reducirse y/o derivarse para obtener una amplia clase de BPD. Como se describe en esas patentes, una subclase particularmente útil de este grupo resulta de la hidrólisis o de la hidrólisis parcial de los grupos éster de las cadenas laterales de 2carboxietilo sobre los anillos C y D. La esterificación como protección de estos grupos durante la reacción de Diels-Alder produce productos iniciales que contienen grupos 2-carbalcoxietilo. Se descubrió que la hidrólisis ligera de estos ésteres podía realizarse fácilmente, dejando algunos grupos carbalcoxi asociados con el producto de Diels-Alder obtenido de un dicarbalcoxialquino virtualmente no hidrolizado completamente. Esto produjo cuatro especies de compuestos, BPD-MA, BPD-MB, BPD-DA y BPD-DB como se representa en la Figura 1; esta figura está tomada de la Patente de EE.UU. Nº 5.171.749. En esta representación, R1 y R2 son grupos carbalcoxi, típicamente carbometoxi o carboetoxi, y R es alquilo (1-6C) .

Se descubrió que BPD-MA tenía propiedades particularmente útiles para la PDT y está actualmente en desarrollo clínico. Sin embargo, todavía se precisan formas específicas adicionales de agentes fotoactivos que expandan el repertorio de compuestos fotoactivos para la variedad de indicaciones a las que se aplica la PDT, como se señaló antes. Esta invención proporciona compuestos en los que los anillos C y D contienen ésteres de etilenglicol de los sustituyentes carboxialquilo. Estos compuestos tienen propiedades farmacocinéticas que resultan ventajosas en ciertos casos en los que se usa la PDT.

Levy JG et al han descrito el estado clínico de derivados de benzoporfirina. Obochi Mok et al han descrito la supervivencia de tejido de aloinjerto de piel prolongada tras la terapia fotodinámica asociada con la modificación de la antigenicidad de la piel del donante. Waterfield JD et al han descrito la evaluación de la inmunotoxicidad del derivado de benzoporfirina (BPDMA) en ratones.

Descripción de la Invención Los compuestos para el uso según la invención son nuevas adiciones útiles al repertorio de compuestos que tienen aplicación en la terapia fotodinámica y en las metodologías relacionadas que utilizan compuestos fotoactivos. La presencia de ésteres de etilenglicol en estas moléculas les proporciona características que permiten la expansión del alcance de las condiciones bajo las que tales compuestos fotoactivos se utilizan y la sintonización precisa del tratamiento.

La presente invención proporciona un compuesto de la fórmula COOMe COOMe H

MeOOC

CH3 H3C MeOOC

H3C H H3C

y

CH3

H3C

H3C CH3

(CH2) 2 (CH2) 2

(CH2) 2 (CH2) 2

COOCH2CH2OH COOCH2CH2OH

COOCH2CH2OH COOCH2CH2OH A-EA6 B-EA6

(1)

(2)

o sus formas metaladas o marcadas o conjugadas; para usar en un método de terapia fotodinámica para modular una respuesta inmune. La presente invención también proporciona el uso de un compuesto de fórmula

COOMe COOMe H

MeOOC

CH3 H3C MeOOC

H3C H H3C

y

CH3

H3C

H3C

CH3

(CH2) 2 (CH2) 2

(CH2) 2 (CH2) 2

COOCH2CH2OH COOCH2CH2O

COOCH2CH2OH COOCH2CH2OH A-EA6 B-EA6

(1)

(2)

o sus formas metaladas o marcadas o conjugadas;

en la fabricación de un compuesto fotoactivo para usar en terapia fotodinámica para modular una respuesta inmune.

Los compuestos de fórmulas 1 y 2 se derivan de protoporfirina IX. La invención también incluye el uso de isómeros de las diversas formas de fórmulas 1-2 que resultan de los productos de condensación Diels-Alder sin reordenar (es decir, el 1, 4-dieno) como se describe en la patente de EE.UU nº 4.883.790.

Breve Descripción de los Dibujos La Figura 1 muestra los compuestos de la técnica anterior, BPD-MA, BPD-MB, BPD-DA y BPD-DB.

La Figura 2 muestra la cinética de la captación de B-EA6 por células L1210.

La Figura 3 muestra la cinética de la liberación de B-EA6 por células L1210.

La Figura 4 muestra una representación gráfica de la farmacocinética de B-EA6 in vivo.

La Figura 5 muestra una comparación de la cinética de la captación de B-EA6 por células L1210 y esplenocitos normales.

La Figura 6 muestra el curso del tiempo de PDT utilizando B-EA6 en ratones comparado con ratones tratados con BPD-MA y BPD-MB.

La Figura 7 muestra el efecto de B-EA6 sobre la microvasculatura en ratones.

La Figura 8 muestra una comparación de los espectros en el plasma de BPD-MA y B-EA6.

Las Figuras 9A y 9B muestran el efecto citotóxico del tratamiento fotodinámico que utiliza A-EA6 en comparación con BPD-MA en células L1210 y en células dendríticas.

La Figura 10 muestra los efectos comparativos de A-EA6 y BPD-MA en la disminución de la expresión superficial de receptores MHC I.

La Figura 11 muestra el efecto de la terapia fotodinámica que utiliza A-EA6 y BPD-MA sobre las quinasas de ruta mitogénica y de estrés en células HL60.

La Figura 12 muestra el efecto comparativo de la PDT utilizando A-EA6 y BPD-MA sobre la activación de caspasa en células HL60.

La Figura 13 muestra el efecto comparativo de la PDT utilizando A-EA6 y BPD-MA sobre la fragmentación de ADN en células HL60.

Modos de Efectuar la Invención Los compuestos para usar según la invención se refieren a aquellos descritos en las patentes de BPD antes citadas pero difieren de ellas en que contienen ésteres de etilenglicol en los sustituyentes sobre los anillos C y D. Estos compuestos pueden prepararse por simple hidrólisis de los sustituyentes carbalcoxilo o carbalcoxialquilo y reesterificación de los grupos carboxilo resultantes en los anillos C y D de las benzoporfirinas, o pueden obtenerse directamente por transesterificación.

Se advertirá que los compuestos 1 y 2 son especies individuales del género, descrito en las patentes de EE.UU. antes mencionadas, obtenidos a través de un proceso que comprende una reacción de Diels-Alder con protoporfirina IX. Puesto que la protoporfirina IX no es simétrica con respecto a los anillos A y B, resultan posibles dos productos según ocurra la adición Diels-Alder en el anillo A o B.

Como se usa aquí, el término "alquilo" se refiere a un hidrocarbonado saturado de cadena lineal o ramificada que puede, si contiene un número suficiente de átomos de carbono, ser cíclico o contener una porción cíclica. Ejemplos típicos son metilo, etilo, t-butilo, ciclohexilo y similares.

Un "radical hidrocarbonado" se refiere a un sustituyente monovalente que contiene sólo carbono e hidrógeno que puede ser de cadena lineal o ramificada, saturado o no saturado, aromático o no aromático o ambos, y cíclico o no cíclico. Así, un radical hidrocarbonado de 1-10C puede incluir ciclopentiletilo, 2-pentenilo, 3-butinilo, 2, 4-dimetilhexilo, y similares.

Las aminas cíclicas incluyen piridilo, pirimidilo, tiazolilo, quinolilo y así sucesivamente.... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto de fórmula COOMe MeOOC COOMe CH3 H

H3C MeOOC H3C

H H3C

o CH3

H3C H3C

CH3 (CH2) 2 (CH2) 2 COOCH2CH2OH COOCH2CH2OH (CH2) 2 (CH2) 2 A-EA6 COOCH2CH2OH COOCH2CH2OH

B-EA6

o sus formas metaladas o marcadas o conjugadas; para uso en un método de terapia fotodinámica para modular una respuesta inmune.

2. El compuesto para uso de la reivindicación 1, donde la modulación de una respuesta inmune es la prevención de dicha respuesta.

3. El compuesto para uso de la reivindicación 1 ó 2, en el que dicha respuesta inmune es en un sujeto afectado con artritis.

4. El compuesto para uso según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que está en forma metala10 da y/o en forma conjugada y/o está marcada.

5. El compuesto para uso según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el compuesto no contiene un ión metálico.

6. El compuesto para uso de una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la terapia fotodinámica

comprende la administración del compuesto a un sujeto, seguido de irradiación de una zona en el sujeto, para modu15 lar una respuesta inmune en el sujeto.

7. Uso de un compuesto de fórmula COOMe MeOOC COOMe CH3

H H3C MeOOC H3CH H3C

o CH3

H3C H3C

CH3 (CH2) 2 (CH2) 2 COOCH2CH2OH COOCH2CH2OH (CH2) 2 (CH2) 2 COOCH2CH2OH COOCH2CH2OH

A-EA6 B-EA6

o sus formas metaladas o marcadas o conjugadas; en la fabricación de un compuesto fotoactivo para usar en terapia fotodinámica para modular una respuesta inmune.