Procesos biocatalíticos para la preparación de compuestos de prolina bicíclica fusionada considerablemente pura estereoméricamente.

Una monoaminooxidasa que convierte el compuesto de amina de fórmula estructural I para el compuesto imina de fórmula estructural I la,

en la que contiene una secuencia de aminoácidos que es al menos 88% idéntica a la SEC NRO:10 y en el que el aminoácido correspondiente al residuo 465 de SEC NRO:2 es una glicina, en donde los compuestos I y IIa tienen las fórmulas estructurales: **Fórmula**

en donde A es O, CR1R2, -C≥C-, o -CH2-CH2-, en donde cada R1 y R2 son seleccionados independientemente de -H, -COOH, -X, -NH2, -CH2NHC(NH)NH2, -CX3, -CH3, - CH2CH3, y en donde X es seleccionado de F, Cl, y Br;

M y M' pueden estar ambos presentes y ambos pueden estar ausentes y cuando ambos M y M' están presentes M y M' son lo mismo y son seleccionados de O y CR3R4 en donde R3 y R4 son H, o R3 o R4 de M y R3 de R4 de M' forman un puente de metileno;

con la estipulación de que

(a) cuando M y M' son O, A no es O; y cuando A es O, M y M' no son O;

(b) A puede ser -CH≥CH- or-CH2-CH2- cuando M y M' son CR3R4; y

(c) cuando M y M' son CR3R4 y tienen uno o más sistemas centrales, los sistemas centrales de M y M' son de estereoquímicos opuestos.

Procesos biocatalíticos para la preparación de compuestos de prolina bicíclica fusionada considerablemente pura estereoméricamente.

CAMPO TÉCNICO

Estas especificaciones se relacionan con compuestos de prolina bicíclica fusionada considerablemente pura estereoméricamente, de las Fórmulas estructurales II a VII:

en las cuales A, M, M’, y R5 son como se los describe aquí, con los procesos biocatalíticos para su preparación y con las enzimas biocatalíticas usadas en estos procesos.

ANTECEDENTES

Los análogos bicíclicos de prolina se usan en el descubrimiento y desarrollo de drogas peptidomiméticas. (A. Trabocchi y otros (2008) Amino Acids (2008) 34: 1—24) . Los inhibidores de proteasa del virus de la hepatitis C boceprevir (SCH 505034; ( (1R, 2S, 5S) -N- (4-amino-1-ciclobutil-3, 4-dioxobutan-2-il) -3 ( (S) -2- (3-tert-butilureido) -3, 3dimetilbutanoil) -6, 6-dimetil-3-azabiciclo [3.1.0] hexano-2 carboxamida) (Malcolm y otros (2006) Antimicrob. Agents Chemother. 50 (3) : 10l3 20) , y telaprevir (VX 950; N- ( (S) 1-ciclohexil-2- ( (S) - 1- ( (1S, 3aR, 6aS) -1- ( (R) -3- (2 (ciclopropilamino) -2 oxoacetil1) hexanoil) hexahidrociclopenta[c]pirrol-2 (1H) -il) -3, 3-dimetil-1-oxobutan-2-ilamino) -2ºxoetil) pirazina-2-carboxamida) (Perni y otros (2006) Antimicob. Agents Chemother. 50 (3) :899 909) . WO 03/080855, Carr y otros 2003, Angew. Chemie 42:707-710, Carr y otros, 2005, ChemBioChem 6:637-639 y dunsmore y otros, 2006 JACS, 128:2224-2225 describe las monoaminooxidasas para la desracemización de los compuestos que comprenden aminos.

Boceprevir (SCH-505034) telaprevir (VX-950)

Boceprevir y telaprevir se preparan de ésteres de los análogos bicíclicos cis-fusionados de L-prolina, ácido (1R, 2S, 5S) -6, 6-dimetil-3-azabiciclo [3.1.0]hexano-2-carboxílico y ácido (1S, 3aR, 6aS) -octahidrociclopental [c]pirrol-1carboxílico, respectivamente, los cuales se muestran a continuación:

WO 2000/20824 y WO 2000/218369 describen otros numerosos inhibidores de proteasa de la hepatitis C incorporando varios análogos fusionados de L-prolina que corresponden a la fórmula estructural VI. Trabocchi, y otros 2007 Aminoácidos 34: 1-24 es una reseña sobre la preparación de aminoácidos bicíclicos.

Aunque se han informado métodos de síntesis de moléculas tan complejas usando métodos y herramientas de la química orgánica, estas síntesis generalmente tienen varios pasos, son intrincadas, costosas, ineficientes, procesos de bajo rendimiento general.

Wu y otros (WO 2007/075790) especifica la producción del metil-ester del análogo de prolina bicíclica, ácido (1R, 2S, 5S) -6, 6-dimetil-3-azabiciclo[3.1.0]hexano-2-carboxílico, del correspondiente amino bicíclico simétrico (aquiral) de fórmula estructural (1R, 5S) -6, 6-dimetil-3-azabiciclo[3. 1.0]hexano, empezando con su oxidación a la imina racémica correspondiente, con fórmula estructural

(racemato)

Subsiguientemente se hace reaccionar la imina racémica con cianuro, para otorgar al aminonitrilo racémico la siguiente fórmula estructural

(racemato)

el cual entonces es hecho reaccionar con ácido y metanol para dar como resultado el éster metílico del aminoácido racémico de la siguiente fórmula estructural

(racemato)

Finalmente, estos ésteres metílicos estereoisoméricos (1R, 2S, 5S) (no deseados) y (1S, 2R, 5R) (deseados) están separados por una resolución de sal diastereomérica, formando ya sea sal ácida di-p-toluil-D-tartárica con el enantiómero anterior , o sal ácida tartárica di-p-toluil-L-tartárica con el enantiómero posterior.

Tanour y y otros (WO 2007/022459) especifica la síntesis de ácido racémico (tbutoxicarbonil) octahidrociclopenta[c]pirrol-1-carboxílico del amino bicíclico simétrico (aquiral) correspondiente haciendo el derivado N-Boc y haciéndolo reaccionar con el agente fosfórico, sec-butlithio en presencia de más que una cantidad estoicométrica de un quelato diamina abultado, luego dióxido de carbono, todos bajo -70°C para (racemic Bee-acids)

Los estereoisómeros (1R, 2S, 5S) (no deseados) y (1S, 2R, 5R) (deseados) de estos ácidos-Boc racémicos son separados en este momento por una resolución de sal diastereomérica usando bases quirales enantiómeras simples tales como S-1-aminotetralina.

Aunque el estereoisómero deseado del aminoácido derivado se obtiene por estos métodos, la resolución de una mezcla de enantiómeros de estos análogos de prolina bicíclica implica en forma inherente la pérdida de al menos la mitad de todo el material (por ejemplo, reactivos, solventes, catalistas, materiales crudos) usados en la mezcla racémica.

También se ha informado que otros métodos para la síntesis química del aminoácido ácido (1S, 3aR, 6aS) octahidrociclopenta[c]pirrol-1-carboxílico y sus ésteres implican (i) oxidación anódica de N-acetil-3azabiciclo[3.3.0]octano (EA 00090362) , y (ii) un enfoque tiazolio ilida (Letters in Drug Design & Discover y (2005) 7) : 497 502) ; J. Org. Chem. 1994, 59, 2773-8) . Otro método químico se desarrolla en WO2006/061585.

Los métodos para producir aminoácidos asimétricos de fórmula estructural ácida (1 S, 3aR, 6aS) octahidroeiclopenta[c]pirrol-1-carboxílico y los ésteres del mismo de fórmula estructural V de las correspondientes aminas bicíclicas simétricas (aquiral) de fórmula estructural I ( (1R, 5S) -6, 6-dimetil-3-azabiciclo[3.1.0]hexano) que evitan la formación de mezclas racémicas, y la consiguiente necesidad de separar los enantiómeros, pueden ser más eficientes, con menos residuos, y más rentables que los métodos basados en resolución, descritos más arriba.

Se han usado enzimas monoaminooxidasas para resolver y desracemizar aminas quirales racémicas a través de la oxidación estereoespecícica de un enantiómero a la imina correspondiente, usando oxígeno. Se ha informado que los derivados de la monoaminooxidasa Aspergillus niger (MAO N) (Shilling y otros (1995) Biochim. Biophys. Acta. 1243: 529 37) son útiles en combinación con agentes químicos reductores no específicos, para la desracemización de (d/l) α metilbencilamina para proveer una (d) α metilbencilamina enantioméricamente pura (93%

ee) (Alexeeva y otros (2002) Angew. Chem. Int. Ed. 41: 3177-3180) . Los derivados de la monoaminooxidasa Aspergillus niger flavino dependiente también fueron usados para la desracemización de (R/S) -2-fenipirrolidina para proveer una (R) -2-fenipirrolidina enantioméricamente pura (98% ee) (Carr y otros (2005) , ChemBioChem 6: 637 39; Gotor y otros “Desimetrización enzimática enantioselectiva en la síntesis orgánica, ” Chem. Rev. (2005) 105: 313-54) Alexandre y otros, 2002. Terahedron Lett 43: 707-710 detalla la desracemización de los derivados prolil usando una aminoacidoxidasa.

Por tanto, se prefiere no sólo proveer compuestos quirales considerablemente puros estereoméricamente, particularmente compuestos quirales aminos que son útiles como intermediarios sintéticos, sino también proveer procesos biocatalíticos eficientes y escalables para su síntesis asimétrica. También es deseable, por tanto, proveer enzimas útiles en esos procesos biocatalíticos.

RESUMEN

En un primer aspecto, la invención provee una monoaminooxidasa que convierte el compuesto amino de fórmula estructural I a un compuesto imina de fórmula estructural IIa, y que comprende una secuencia aminoácida que es idéntica en al menos 88% a la SEC NRO: 10 y en la cual el aminoácido correspondiente al residuo 465 de SEC NRO: 2 es una glicina, donde los compuestos I y IIa tienen las fórmulas estructurales:

donde A es O, CR1R2, -C=C-, -CH2-CH2-, donde R1 y R2 son cada uno seleccionado independientemente de -H, - COOH, -X, -NH2, -CH2NHC (NH) NH2, -CX3, -CH3, - CH2CH3, y donde X es seleccionada de F, Cl, y Br; M y M' pueden estar ambas presentes o pueden estar ambas ausentes, y cuando están las dos, M and M’, presentes, M y M’ son lo mismo y son seleccionadas de O y CR3R4 donde R3 y R4 son H, o R3 o R4 de M y R3 o R4 de M’ forman un puente de metileno; con la salvedad que

(a) cuando M y M’ son O, A no es O; y cuando A es O, M y M’ no son O;

(b) A puede –CH=CH- o –CH2-CH2-cuando M y M’ son CR3R4; y

(c) cuando M y M’ son CR3R4 y tienen uno o más estereocentros, los estereocentros de M y M’ son de estereoquímica opuesta.

En un segundo aspecto, el invento provee un polinucleótido que codifica la monoaminooxidasa del invento, donde el polinucleótido opcionalmente comprende SEC NRO: 11, 9, 13, 15, 17, 19, o 35.

En un tercer aspecto, el invento también provee... [Seguir leyendo]

1. Una monoaminooxidasa que convierte el compuesto de amina de fórmula estructural I para el compuesto imina de fórmula estructural I la, en la que contiene una secuencia de aminoácidos que es al menos 88% idéntica a la SEC NRO:10 y en el que el aminoácido correspondiente al residuo 465 de SEC NRO:2 es una glicina, en donde los compuestos I y IIa tienen las fórmulas estructurales:

en donde A es O, CR1R2, -C=C-, o -CH2-CH2-, en donde cada R1 y R2 son seleccionados independientemente de -H, -COOH, -X, -NH2, -CH2NHC (NH) NH2, -CX3, -CH3, - CH2CH3, y en donde X es seleccionado de F, Cl, y Br;

M y M’ pueden estar ambos presentes y ambos pueden estar ausentes y cuando ambos M y M’ están presentes M y M’ son lo mismo y son seleccionados de O y CR3R4 en donde R3 y R4 son H, o R3 o R4 de My R3 de R4 de M’ forman un puente de metileno; con la estipulación de que (a) cuando M y M’ son O, A no es O; y cuando A es O, M y M’ no son O;

(b) A puede ser -CH=CH- or-CH2-CH2- cuando M y M’ son CR3R4; y

(c) cuando M y M’ son CR3R4 y tienen uno o más sistemas centrales, los sistemas centrales de M y M’ son de estereoquímicos opuestos.

2. La monoaminooxidasa según sostiene 1 que convierte el compuesto de amina de la fórmula estructural I a la imina de formula estructural IIa a un promedio de por lo menos 1.5-veces, por lo menos 2-veces, por lo menos 3-veces, por menos 4-veces, por lo menos 5-veces, por lo menos 10-veces, por lo menos-25 veces, por lo meno.

5. veces, por lo meno.

10. veces o más d.

10. veces el promedio exhibido de la monoaminooxidasa de SEC NRO:2.

3. La monoaminooxidasa según sostiene 1 que es al menos 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% o 99% idéntico a la SEC NRO: 10.

4. La monoaminooxidasa según sostiene 1 que contiene una secuencia de amino ácido que es al menos el 88% idéntica a la SEC NRO: 10 y es por lo menos 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% o 99% idéntica a la SEC NRO: 12, 14, 16, 18, 20 o 36.

5. La monoaminooxidasa según cualquier sustento precedente, el que contiene una secuencia de amino ácido correspondiente a la SEC NRO: 12, 10, 14, 16, 18, 20 o 36.

6. La monoaminooxidasa según cualquier sustento precedente, en donde la monoaminooxidasa es:

i) capaz de convertir el sustrato (1 R, 5S) -6, 6-dimetilo-3-azabiciclo [3.1.0]hexano, el compuesto (1) de (1R, 5S}-6, 6-dimetilo-3- azabiciclo [3.1.0]hex-2-ene, el compuesto (2) , con un porcentaje de exceso de estereomérica de por lo menos aproximadamente 95% y a una velocidad que se mejora más de un polipéptido de referencia que tiene la secuencia de aminoácidos de SEC NRO: 2, en donde los componentes (1) y (2) tienen las fórmulas estructurales: o ii) capaz de convertir el sustrato (3aR, 6aS) octahidrociclopenta[c]pirrol, el compuesto (3) a (3aS, 6aR) 1, 3a, 4, 5, 6, 6a-hexahidrociclopenta[c]pirrol, compuesto (4) , con un porcentaje de exceso de diastereoisómero de por lo menos alrededor del 95% y a una velocidad que se mejorada sobre la referencia de un polipéptido teniendo una secuencia del aminoácidos de SEC NRO:2, en donde los compuestos (3) y (4) tienen las fórmulas estructurales:

7. La monoamina oxidasa:

(i) según sostiene 6i) , el que contiene una secuencia de aminoácidos correspondiente a la SEC NRO: 10 o 12; o

(ii) según sostiene 6ii) el que contiene una secuencia de aminoácidos correspondiente a la SEC NRO: 10, 14, 16, 18, 20 o 36.

8. Un polinucleótido que codifica la monoamina oxidasa de acuerdo con cualquiera de los las reivindicaciones precedentes, en el que el polinucleótido comprende opcionalmente la SEQ ID NO: 11, 9, 13, 15, 17, 19, o 35.

9. Un método de preparación de un compuesto sustancialmente estereoméricamente puro según la fórmula estructural II:

incluye sales e hidratos de esto, en donde:

A es O, CR1R2, -C=C-, o -CH2-CH2-, en donde cada R1 y R2 son independientemente seleccionados de -H, -COOH, -X, -NH2, -CH2NHC (NH) NH2, -CX3, -CH3, - CH2CH3, y en donde X es seleccionado de F, Cl, y Br;

M y M’ pueden ambos estar presentes o pueden ambos estar ausentes y cuando ambas M y M’ están presentes M y M’ son lo mismo y son seleccionadas de O y CR3R4 en donde R3 y R4 son H, o R3 o R4 de M y R3 o R4 de M’ forman un puente de metileno; con las condiciones de que (a) cuando M y M’ son O, A no es O; y cuando A es O, M y M’ no son O;

(b) A puede ser -CH=CH- or-CH2-CH2-cuando M y M’ son CR3R4; y

(c) cuando M y M’ son CR3R4 y tienen uno o más sistemas centrales, los sistemas centrales de M y M’ son de estereoquímica opuestas;

el método contiene una amina de contacto según la formula estructural I

en donde A, M y M’ están como definidos para una fórmula estructural II (a) y (lIb) , con oxígeno y una enzima de monoaminooxidasa según cualquiera de los sustentos 1-7 en la presencia de un co-factor bajo condiciones en los que la enzima de la monoaminooxidasa oxida el compuesto de amina de fórmula estructural I a un compuesto correspondiente imina de fórmula estructural II (a) , el dímero del mismo de fórmula II (b) , o una mezcla de los mismos.

10. Un método según sostiene 9, que es un método de preparar un compuesto sustancialmente estereoméricamente puro según la fórmula estructural II (a) :

incluye sales e hidratos de esto, en donde A es O, CR1R2, -C=C-, o -CH2-CH2-, en donde cada R1 y R2 son seleccionados independientemente de -H, -COOH, -X, -NH2, -CH2NHC (NH) NH2, -CX3, -CH3, - CH2CH3, y en donde X es seleccionado de F, Cl, y Br;

M y M’ ambos puede estar presentes o ambos pueden estar ausentes cuando ambas M y M’ están presentes M y M’ son lo mismo y son selecciones de O y CR3R4 en donde R3 y R4 son H, o R3 o R4 de M yR3 o R4 de M’ forman un puente de metileno; con las condiciones de que (a) cuando M yM’ con O, A no es O; y cuando A es O, M yM’ no son O;

(b) A puede ser -CH=CH- o -CH2-CH2- cuando M y M’ son CR3R4; y

(c) cuando M y M’ son CR3R4 y tienen uno o más estereocentros de M y M’ , son de estereoquímica opuesta;

en donde A, M y M’ están como definidas por la fórmula estructural 11 (a) , con oxígeno y una enzima monoaminooxidasa según cualquiera de los sostenidos 1-7 en la presencia de un co-factor bajo condiciones en los que la enzima monoaminooxidasa oxida la amina de la fórmula estructural I en una imina correspondiente a la fórmula estructural II (a) .

11. El método de la reivindicación 9 o la reivindicación 10, en el que el co-factor es:

i) asociado no covalentemente con la enzima monoamina oxidasa; o ii) seleccionado del grupo que consiste de FAD, FMN, NAD, y NADP.

12. El método de la reivindicación 9 o la reivindicación 10, que comprende además un componente de un

catalizador de desproporción del peróxido de hidrógeno (H2O2) al oxígeno molecular y agua, en la que el componente se selecciona opcionalmente del grupo que consiste de Pd, Fe, y una enzima de catalasa

13. Un método de preparación de una mezcla que comprende un compuesto aminosulfonate sustancialmente enantioméricamente puro según la fórmula estructural III (a) y un compuesto aminosulfonate sustancialmente

incluye sales e hidratos de estos, en donde:

A es O, CR1R2, -C=C-, o-CH2-CH2-, en donde cada R1y R2 son independientemente seleccionados de -H, -COOH, -X, -NH2, -CH2NHC (NH) NH2, -CX3, -CH3, - CH2CH3, e donde X es seleccionado de F, Cl, y Br;

M y M’ ambos pueden estar presente y pueden ambos estar ausentes y cuando ambas M y M’ están presentes M y M’ son lo mismo y son seleccionados de O y CR3R4 en donde R3 y R4 son H, o R3 o R4 de M yR3 o R4 de M’ forman un puente de metileno; con la condición de que (a) cuando M y M’ son O, A no es O; y cuando A es O, M y M’ no son O;

(b) A puede ser -CH=CH- or-CH2-CH2- cuando M y M’ son CR3R4;

(c ) cuando M y M 'son CR3R4and tienen uno o más estereocentros, los estereocentros de M y M' son de estereoquímica opuesta;

que comprende además la adición de bisulfito en condiciones que producen la mezcla que comprende un compuesto aminosulfonate sustancialmente enantioméricamente puro según la fórmula estructural III

(a) y un compuesto aminosulfonate sustancialmente enantioméricamente puro según la fórmula estructural III (b ) , en el que el bisulfito se añade opcionalmente a la reacción antes de o simultáneamente con la oxidasa monoamina, o después de la adición de la monoamina oxidasa.

14. Un método de preparación de un compuesto aminonitrilo sustancialmente enantioméricamente puro según la fórmula estructural IV (a) :

incluye sales e hidratos de estos, en donde:

A es O, CR1R2, -C=C-, o -CH2-CH2-, en donde cada R1 y R2 son seleccionadas independientes de -H, -COOH, -X, -NH2, -CH2NHC (NH) NH2, -CX3, -CH3, - CH2CH3, y en donde X es seleccionada de F, Cl, y Br;

M y M’ pueden ambos estar presentes o pueden ambos estar ausentes y cuando ambos M y M’ están presentes M y M’ son lo mismo y son seleccionados de O y CR3R4 en donde R3 y R4 son H, o R3 o R4 de M yR3 o R4 de M’ forman un puente de metileno;

con la condición de que (a) cuando M yM’ son O, A no es O; y cuando A es O, M yM’ no son O;

(b) A puede ser -CH=CH- or-CH2-CH2- cuando M y M’ son CR3R4; y

(c) cuando M y M’ son CR3R4y no tienen uno o más estereocentros, de los estereocentros de M y M’ son de estereoquímica opuestas;

el método contiene:

i. el método de la reivindicación 13 y que comprende además tratar los compuestos de acuerdo con fórmulas estructurales III (a) y III (b) con cianuro bajo condiciones que producen el compuesto aminonitrilo sustancialmente enantioméricamente puro según la fórmula estructural IV (a) , o ii. el método de la reivindicación 9 y que comprende además tratar los compuestos de acuerdo con las fórmulas estructurales II (a) o II (b) o la mezcla de los mismos con cianuro bajo condiciones que producen el compuesto aminonitrilo sustancialmente enantioméricamente puro según la fórmula estructural IV (a ) .

15. Un método de preparación de un compuesto de aminoácidos sustancialmente estereoméricamente puros según la fórmula estructural VI:

incluye sales de estos, en donde:

A es O, CR1R2, -C=C-, o -CH2-CH2-, en donde cada R1 y R2 son seleccionados independientemente de -H, -COOH, -X, -NH2, -CH2NHC (NH) NH2, -CX3, -CH3, - CH2CH3, y en donde X es seleccionado de F, Cl, y Br;

M y M’ pueden ambos están presentes o pueden ambos estar ausentes y cuando ambos M y M’ están presentes M y M’ son lo mismo y son seleccionados de O y CR3R4 en donde R3 y R4 son H, o R3 o R4 de M y R3 o R4 de M’ forman un puente de metileno;

con la condición de que (a) cuando M y M’ son O, A no es O; y cuando A es O, M y M’ no son O;

(b) A puede ser -CH=CH- o -CH2-CH2- cuando M y M’ son CR3R4; y

(c) cuando M y M 'son CR3R4 y tienen uno o más estereocentros, los estereocentros de M y M' son de estereoquímica opuesta;

el método que comprende el método de la reivindicación 14 y que comprende además tratar el compuesto aminonitrilo de fórmula estructural IV (a) con un ácido y agua en condiciones en las que el compuesto aminonitrilo se convierte en el compuesto de aminoácidos sustancialmente estereoméricamente puros según la fórmula estructural VI.

16. Un método de preparación de un compuesto sustancialmente enantioméricamente puro según la fórmula estructural V:

incluye sales de estos, en donde:

R5 es (Ci-C6) alquilo; A es O, CR1R2, -C=C-, o-CH2-CH2-, en donde cada R1 y R2 son seleccionados independientemente de - H, -COOH, -X, -NH2, -CH2NHC (NH) NH2, -CX3, -CH3, - CH2CH3, y en donde X es seleccionado de F, Cl,

y Br;

M y M’ pueden ambos estar presentes o pueden ambos estas ausentes y cuando ambas M y M’ están presentes M y M’ son lo mismo y son seleccionados de O y CR3R4 en donde R3 y R4 son H, o R3 o R4 de M y R3 o R4 de M’ forman un puente de meliteno; con las condiciones de que (a) cuando M y M’ son O, A no es O; y cuando A es O, M y M’ no son O;

(b) A puede ser -CH=CH- o -CH2-CH2- cuando M y M’ son CR3R4; y

(c) cuando M y M’ son CR3R4 y tienen uno o más estereocentros, los estereocentros de M y M’ son estereoquímicos opuestos;

el método contiene:

i. el método de la reivindicación 14 y que comprende además tratar el compuesto aminonitrilo de fórmula estructural IV (a) con un ácido y un alcohol bajo condiciones en las que el compuesto aminonitrilo se convierte en el compuesto de éster de aminoácido sustancialmente estereoméricamente puro según la fórmula estructural V, y en el que el método comprende opcionalmente las etapas de:

o ii. el método de la reivindicación 15 y que comprende además tratar un compuesto de aminoácidos sustancialmente estereoméricamente puros de acuerdo con la fórmula estructural VI con un ácido y un compuesto seleccionado del grupo que consiste de R5-OH y R50C (0) CH3 bajo condiciones en las que el amino compuesto de ácido según la fórmula estructural VI se convierte en el compuesto aminoéster sustancialmente enantioméricamente puro según la fórmula estructural V, y en el que el método comprende opcionalmente las etapas de: