Conjugados de anticuerpo-fármaco y su uso.

Un compuesto seleccionado de entre: **Fórmula**

Conjugados de anticuerpo-fármaco y su uso Campo de la invención La presente invención proporciona conjugados de anticuerpo-fármaco que se escinden in vivo. Los conjugados de anticuerpo-fármaco pueden formar profármacos y conjugados de citotoxinas.

Antecedentes de la invención Muchos agentes terapéuticos, en particular los que son especialmente eficaces en la quimioterapia del cáncer, con frecuencia, muestran toxicidad aguda in vivo, especialmente toxicidad en la médula ósea y las mucosas, así como toxicidad cardiaca y neurológica crónicas. Dicha alta toxicidad puede limitar sus aplicaciones. El desarrollo de más agentes terapéuticos específicos y más seguros, en particular de agentes antitumorales, es deseable para obtener una mayor eficacia contra las células tumorales y una disminución en el número y la gravedad de los efectos secundarios de estos productos (toxicidad, destrucción de células no tumorales, etc.) . Otra dificultad con algunos agentes terapéuticos existentes es su menos que óptima estabilidad en plasma. La adición de grupos funcionales para estabilizar estos compuestos ha producido una disminución significativa de la actividad. Por consiguiente, es deseable identificar modos de estabilizar compuestos, manteniendo a la vez niveles de actividad terapéutica aceptables.

La búsqueda de agentes citotóxicos más selectivos ha sido muy activa durante muchas décadas, siendo la toxicidad limitante de la dosis (es decir, la actividad no deseada de las citotoxinas sobre los tejidos normales) una de las principales causas de los fracasos en la terapia del cáncer. Por ejemplo, CC-1065 y las duocarmicinas son conocidas por ser citotoxinas extremadamente potentes.

CC-1065 fue aislada por primera vez de Streptomyces zelensis en 1981 por la empresa Upjohn Company (Hanka et al., J. Antibiot. 31: 1211 (1978) ; Martin et al., J. Antibiot. 33: 902 (1980) ; Martin et al., J. Antibiot. 34: 1119 (1981) ) , y se encontró que tiene una potente actividad antitumoral y antimicrobiana tanto in vitro como en animales experimentales (Li et al., Cancer Res. 42: 999 (1982) ) . CC-1065 se une a ADN-B de doble cadena en el surco menor (Swenson et al., Cancer Res. 42:. 2821 (1982) ) con la secuencia de preferencia de 5'-d (A/GNTTA) -3' y 5'-d (AAAAA) 3' y alquilatos de la posición N3 de la 3'-adenina mediante su unidad del lado izquierdo CPI presente en la molécula (Hurley et al., Science 226: 843 (1984) ) . A pesar de su potente y amplia actividad antitumoral, CC-1065 no se puede usar en seres humanos, porque provoca la muerte retardada en animales de experimentación.

En la técnica, se conocen muchos análogos y derivados de CC-1065, así como las duocarmicinas. Se ha revisado la investigación sobre la estructura, la síntesis y las propiedades de muchos de los compuestos. Véase, por ejemplo, Boger et al., Angw. Chem. Int. Ed. Engl., 35, 1438, (1996) ; y Borger et al., Chem. Rev., 97, 787, (1997) .

Un grupo de la Kyowa Hakko Kogya Co., Ltd. ha preparado una serie de derivados de CC-1065. Véanse, por ejemplo, las patentes de Estados Unidos Nº 5.101.038; 5.641.780; 5.187.186; 5.070.092; 5.703.080; 5.070.092; 5.641.780; 5.101.038; y 5.084.468; y la solicitud PCT publicada WO 96/10405 y la solicitud de europea publicada 0 537 575 A1.

La Upjohn Company (Pharmacia Upjohn) también ha sido activa en la preparación de derivados de CC-1065. Véanse, por ejemplo, las patentes de Estados Unidos Nº 5.739.350; 4.978.757; 5.332.837 y 4.912.227.

La investigación también se ha centrado en el desarrollo de nuevos agentes terapéuticos que están en forma de profármacos, compuestos que son capaces de convertirse en fármacos (compuestos terapéuticos activos) in vivo mediante ciertas modificaciones químicas o enzimáticas de su estructura. Con el fin de reducir la toxicidad, esta conversión está preferentemente confinada al sitio de acción o tejido diana, más que al sistema circulatorio o al tejido no diana. Sin embargo, incluso los profármacos presentan problemas, ya que muchos se caracterizan por una baja estabilidad en sangre y suero debido a la presencia de enzimas que degradan o activan los profármacos antes de que estos alcancen los sitios deseados dentro del cuerpo del paciente.

Bristol-Myers Squibb ha descrito determinados conjugados de fármacos antitumorales escindibles por enzimas lisosómicas. Véase, por ejemplo, la patente de Estados Unidos Nº 6.214.345. Esta patente proporciona un oxicarbonilo de aminobencilo.

Seattle Genetics ha publicado las solicitudes de patente de Estados Unidos Nº 2003/0096743 y 2003/0130189, que describen p-aminobenciléteres en agentes de administración de fármacos. Los engarces descritos en estas solicitudes se limitan a composiciones de aminobenciléter.

Asimismo, otros grupos han descrito engarces. Véase, por ejemplo, de Groot et al., J. Med. Chem., 42, 5277, (1999) ; de Groot et al., J. Org. Chem., 43, 3093, (2000) ; de Groot et al., J. Med. Chem., 66, 8815, (2001) ; documento WO 02/083180; Carl et al., J. Med. Chem. Lett., 24, 479, (1981) ; Dubowchik et al., Bioorg & Med. Chem. Lett., 8, 3347, (1998) . Estos engarces incluyen espaciadores de aminobenciléter, sistemas espaciadores de ciclación y cascada electrónica alargada, espaciadores de eliminaciones de ciclaciones tales como aminocarbonilos de w-amino, y un engarce de p-aminobenci-oxicarbonilo.

La estabilidad de los fármacos de citotoxinas, incluyendo la estabilidad in vivo, todavía es una cuestión importante a la que es necesario enfrentarse. Además, la toxicidad de muchos compuestos les hace ser menos útiles, por lo que 5 se necesitan composiciones que reduzcan la toxicidad del fármaco, tal como la formación de un profármaco escindible. Por lo tanto, a pesar de los avances logrados en la técnica, sigue siendo necesario desarrollar agentes terapéuticos mejorados para el tratamiento de mamíferos, y en particular de seres humanos, más específicamente, citotoxinas que muestren una alta especificidad de acción, una toxicidad reducida y una estabilidad mejorada en sangre con relación a los compuestos conocidos de estructura similar. La presente invención se enfrenta a estas necesidades.

Resumen de la invención La presente invención se refiere a un compuesto seleccionado de entre:

y

en las que r es un número entero que varía 0 a 24.

La presente invención se refiere a compuestos que se pueden usar en conjugados de anticuerpo-fármaco en los que el fármaco y el anticuerpo están ligados a través de un engarce de peptidilo. Estos conjugados son potentes citotoxinas que se pueden administrar selectivamente a un sitio de acción de interés en forma activa y luego escindirse para liberar el fármaco activo. Los brazos del engarce de la invención se pueden escindir de los fármacos citotóxicos, por ejemplo, por medios enzimáticos o reductores in vivo, liberando un resto de fármaco activo del derivado de profármaco.

Una realización es un conjugado de anticuerpo-fármaco que incluye un anticuerpo que tiene especificidad al menos por un tipo de tumor; un fármaco; y un engarce que acopla el fármaco al anticuerpo. El engarce es escindible en presencia del tumor. El conjugado de anticuerpo-fármaco retarda o detiene el crecimiento del tumor cuando se administra en una cantidad correspondiente a una dosis diaria de 1 !mol/kg o inferior. Preferentemente, el conjugado de anticuerpo-fármaco retarda el crecimiento del tumor cuando se administra en una cantidad correspondiente a una dosis diaria de 1 !mol/kg o inferior (refiriéndose a moles del fármaco) durante un período de al menos cinco días.

El tumor es un tumor de tipo humano de un ratón SCID. Como ejemplo, el ratón SCID puede ser un ratón CB17.SCID (disponible en Taconic, Germantown, NY) .

En otro aspecto más, la invención se refiere a formulaciones farmacéuticas. Dichas formulaciones comprenden típicamente un compuesto de conjugado de la invención y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

En otro aspecto más, la invención se refiere a procedimientos de uso de los compuestos de conjugado de la invención. Por ejemplo, la invención proporciona compuestos para su uso en la destrucción de una célula, en la que se administra un compuesto de conjugado de la invención a la célula en una cantidad suficiente para matarla. En una realización preferida, la célula es una célula tumoral. En otra realización, la invención proporciona compuestos para su uso en el retardo o la detención del crecimiento de un tumor en un sujeto mamífero, en la que se administra un compuesto de conjugado de la invención al sujeto en una cantidad suficiente para retardar o detener el crecimiento del tumor.

Otros aspectos, ventajas y objetos de la invención... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto seleccionado de entre:

en los que r es un número entero que varía de 0 a 24.

2. Un procedimiento para preparar un conjugado de anticuerpo-fármaco que comprende la conjugación del compuesto de la reivindicación 1 con un anticuerpo o un fragmento del mismo.

3. Un conjugado de anticuerpo-fármaco preparado mediante el procedimiento de la reivindicación 2.

4. Una formulación farmacéutica que comprende el compuesto de la reivindicación 1 o el conjugado de anticuerpofármaco de la reivindicación 3 y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

5. El conjugado de anticuerpo-fármaco de la reivindicación 3 para su uso en terapia.