Composiciones y procedimientos para tratar y prevenir la necrosis.

Un inhibidor de elastasa que penetra en las células para usar en el tratamiento y/o prevención de la necrosis celular,

en el que dicho inhibidor de elastasa inhibe la actividad enzimática de la elastasa intracelular implicada en la muerte celular necrótica en células que sufren necrosis, en el que la necrosis celular está asociada con una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en necrosis asociada con la administración y/o autoadministración de, y/o exposición a, cocaína, fármacos tales como paracetamol, toxinas químicas, productos agroquímicos, metales pesados u organofosfatos de guerra; distrofia vascular; complicaciones por carga de hierro; úlceras de decúbito; enfermedad celíaca; infección por ántrax; enfermedad de Anderson; enfermedad mitocondrial congénita; necrosis aséptica; leucemia; linfoma; asfixia; hernia encarcelada; diabetes mellitus; tuberculosis; endometriosis; lesiones por frío; complicaciones del tratamiento con esteroides; daño cerebrovascular; gangrena; hepatitis; hemoglobinuria; septicemia viral; quemaduras; hipertermia; síndrome compartimental; procolitis necrotizante; lesiones de la médula espinal; distrofia muscular; tirosemia; enfermedad metabólica hereditaria; enfermedad de micoplasma; infecciones virales; fenilcetonuria; infarto placentario, sífilis; necrosis avascular; alcoholismo.

Composiciones y procedimientos para tratar y prevenir la necrosis

Campo de la invención [0001] La presente invención se refiere a composiciones para usar en un procedimiento para tratar y prevenir la necrosis celular. Más específicamente, las composiciones para dicho uso previenen o tratan la necrosis mediante la inhibición de la actividad de la elastasa intracelular que actúa en células que sufren necrosis.

Antecedentes de la invención [0002] La elastasa es una serina proteasa que cataliza la degradación de proteínas, incluyendo la elastina, una proteína estructural principal del tejido conjuntivo de mamíferos. La técnica ha sugerido que la inhibición de la elastasa puede ser eficaz en el tratamiento de diferentes afecciones y enfermedades.

Por ejemplo, el documento US 4.683.241 indica que se cree que la elastasa tiene una función importante en la etiología de enfermedades inflamatorias del tejido conjuntivo. Esta patente describe una clase de ésteres fenólicos que presentan acción inhibidora de la elastasa.

El documento US 5.216.022 describe el uso de ésteres aromáticos de dialcanoatos de fenileno como inhibidores de la elastasa neutrófila humana (conocida también como elastasa leucocitaria) , para el tratamiento de numerosas afecciones mediadas por la elastasa neutrófila.

J.B. Herbert y col., The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, vol. 260, no. 2 (1992) , pág. 808-816 describe las actividades bioquímicas y farmacológicas de SR 26831 como un inhibidor de elastasa patente y selectivo de lesión pulmonar aguda y crónica mediada por elastasa leucocitaria.

El documento US 6.159.938 indica que la inhibición de la elastasa vascular endógena puede ser eficaz en el tratamiento de la enfermedad vascular pulmonar y otras afecciones relacionadas.

La necrosis es el procedimiento relativamente incontrolado de muerte celular después de perturbación del entorno celular, que da como resultado la rotura celular. La necrosis se puede tratar usando oxígeno a alta presión.

Resumen de la invención [0008] La presente invención se dirige a la reivindicación 1.

Los autores de la invención han encontrado de forma inesperada que la elastasa intracelular está implicada en la muerte celular necrótica, y que la inhibición de dicha enzima dentro de las células afectadas puede servir como una herramienta eficaz para tratar y/o prevenir la necrosis celular y enfermedades asociadas con la misma.

En el presente documento se describe un procedimiento para tratar y prevenir la necrosis de células y enfermedades asociadas con la misma, que comprende inhibir la actividad enzimática de una o más enzimas elastasa dentro de dichas células.

El procedimiento mencionado antes comprende administrar a un sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de uno o más agentes inhibidores de elastasa, en el que dichos agentes inhiben la actividad enzimática de la elastasa intracelular en las células que se van a tratar.

Los autores de la invención también han encontrado sorprendentemente que la inhibición de la elastasa dentro de las células afectadas puede desplazar la necrosis celular, al menos parcialmente, a muerte celular apoptótica. Por lo tanto, se describe un procedimiento para tratar y prevenir la necrosis celular y enfermedades asociadas con la misma, que comprende:

inhibir la actividad enzimática de la elastasa dentro de dichas células; e inhibir la muerte celular apoptótica.

La presente invención también se dirige a la reivindicación 4. Por lo tanto, las composiciones farmacéuticas mencionadas antes comprenden uno o más inhibidores de elastasa que son capaces de entrar en las células que se van a tratar, en combinación con uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.

De acuerdo con una realización preferida de la invención, las composiciones farmacéuticas mencionadas antes comprenden además uno o más inhibidores de apoptosis.

También se describe en el presente documento el uso de uno o más inhibidores de elastasa junto con uno o más inhibidores de apoptosis en la preparación de un medicamento para tratar y/o prevenir la necrosis de células y enfermedades asociadas con la misma, en el que dichos inhibidores de elastasa son capaces de entrar en dichas células.

Los inhibidores de la actividad de elastasa usados de acuerdo con la invención para tratar y prevenir la necrosis celular y enfermedades asociadas con la misma, son capaces de entrar en las células diana, de modo que dichos inhibidores ejercen sus acciones inhibidoras dentro de dichas células.

Preferiblemente, la necrosis se puede tratar o prevenir de acuerdo con la presente invención, en células seleccionadas del grupo que consiste en células neuronales, células de Purkinje, células piramidales del hipocampo, células gliales, células de origen hematopoyético (tales como linfocitos y macrófagos) , hepatocitos, timocitos, fibroblastos, células del miocardio, células epiteliales, células epiteliales bronquiales, glomérulos, células epiteliales pulmonares, queratinocitos, células gastrointestinales, células epidérmicas, células óseas y de cartílagos.

Preferiblemente, las enfermedades asociadas con la necrosis celular, que se pueden tratar y/o prevenir de acuerdo con la presente invención, se seleccionan del grupo que consiste en leucemias, linfomas, asfixia, hernia encarcelada, diabetes mellitus, tuberculosis, endometriosis, distrofia vascular, lesión por frío, complicaciones por carga de hierro, complicaciones del tratamiento con esteroides, daño cerebrovascular, gangrena, úlceras de decúbito, hepatitis, hemoglobinuria, septicemia viral, quemaduras, hipertermia, enfermedad celíaca, síndrome compartimental, procolitis necrotizante, lesión de la médula espinal, distrofia muscular, tirosemia, enfermedad metabólica hereditaria, enfermedad de micoplasma, infección por ántrax, infecciones virales, enfermedad de Anderson, enfermedad mitocondrial congénita, fenilcetonuria, infarto placentario, sífilis, necrosis aséptica, necrosis avascular, alcoholismo y necrosis asociada con la administración y/o autoadministración de, y/o exposición a, cocaína, fármacos (por ejemplo, paracetamol, antibióticos, adriamicina, AINE, ciclosporina) , toxinas químicas tales como tetracloruro de carbono, cianuro, metanol, etilenglicol y gas mostaza, productos agroquímicos tales como organofosfatos y paraquat, metales pesados (plomo, mercurio) , otros organofosfatos de guerra.

Breve descripción de los dibujos [0019]

La figura 1 representa gráficamente el porcentaje de células necróticas y apoptóticas observadas después de tratamiento con y sin oligomicina y anticuerpo dirigido contra Fas.

La figura 2 es una representación fotográfica de los resultados de la electroforesis en gel en sustrato de gelatina para los lisatos de células U-937 tratadas/no tratadas con oligomicina y/o anticuerpo dirigido contra Fas durante 3 h.

La figura 3 es una representación fotográfica de los resultados de la electroforesis en gel en sustrato de gelatina obtenidos para los lisatos de células U-937 tratadas/no tratadas con KCN 0, 5 mM durante 3 h.

La figura 4 es una representación fotográfica de un gel electroforético en sustrato de gelatina, que demuestra que el tratamiento de un lisato celular con KCN producía la aparición de una banda de actividad de proteasa (hilera B) . Esta banda desaparecía cuando se administraba KCN en presencia de inhibidor de elastasa 200 µM (hilera C) .

La figura 5 presenta resultados que demuestran el efecto del inhibidor de elastasa III en la necrosis inducida por KCN en células PC-12. El panel A representa en un diagrama la proporción de células vivas, necróticas y apoptóticas después de diferentes tratamientos. Los valores numéricos para estas proporciones se dan en la tabla que acompaña. El panel B representa en una gráfica el porcentaje de supervivencia de células PC-12 después de tratamiento con KCN en presencia/ausencia de inhibidor de elastasa III.

La figura 6 representa en un diagrama la proporción de células U-937 vivas, necróticas y apoptóticas después de tratamiento con KCN en presencia/ausencia de inhibidor de elastasa III. Los valores numéricos para estas proporciones se dan en la tabla que acompaña.

La figura 7 ilustra gráficamente los efectos del inhibidor de elastasa III (panel B) y elastinal (panel C) en la apoptosis/necrosis inducida por Fas en células U-397.

La figura 8 ilustra gráficamente el porcentaje de células PC-12 necróticas y apoptóticas detectadas después de tratamiento con/sin oligomicina y/o STS.

La figura 9 demuestra el efecto de un inhibidor... [Seguir leyendo]

1. Un inhibidor de elastasa que penetra en las células para usar en el tratamiento y/o prevención de la necrosis celular, en el que dicho inhibidor de elastasa inhibe la actividad enzimática de la elastasa intracelular implicada en la muerte celular necrótica en células que sufren necrosis, en el que la necrosis celular está asociada con una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en necrosis asociada con la administración y/o autoadministración de, y/o exposición a, cocaína, fármacos tales como paracetamol, toxinas químicas, productos agroquímicos, metales pesados u organofosfatos de guerra; distrofia vascular; complicaciones por carga de hierro; úlceras de decúbito; enfermedad celíaca; infección por ántrax; enfermedad de Anderson; enfermedad mitocondrial congénita; necrosis aséptica; leucemia; linfoma; asfixia; hernia encarcelada; diabetes mellitus; tuberculosis; endometriosis; lesiones por frío; complicaciones del tratamiento con esteroides; daño cerebrovascular; gangrena; hepatitis; hemoglobinuria; septicemia viral; quemaduras; hipertermia; síndrome compartimental; procolitis necrotizante; lesiones de la médula espinal; distrofia muscular; tirosemia; enfermedad metabólica hereditaria; enfermedad de micoplasma; infecciones virales; fenilcetonuria; infarto placentario, sífilis; necrosis avascular; alcoholismo.

2. El inhibidor de elastasa que penetra en las células para usar de acuerdo con la reivindicación 1, en el que dicho inhibidor de elastasa desplaza la necrosis al menos parcialmente a muerte celular apoptótica.

3. El inhibidor de elastasa que penetra en las células para usar de acuerdo con la reivindicación 2, en el que la muerte celular apoptótica se va a inhibir por uno o más inhibidores de la apoptosis.

4. Una composición farmacéutica para usar en el tratamiento y/o prevención de la necrosis celular, en la que dicha composición comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un inhibidor de elastasa que penetra en las células que inhibe la actividad enzimática de una o más enzimas elastasa implicadas en la muerte celular necrótica en células que sufren necrosis, y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables, en el que la necrosis celular está asociada con una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en necrosis asociada con la administración y/o autoadministración de, y/o exposición a, cocaína, fármacos tales como paracetamol, toxinas químicas, productos agroquímicos, metales pesados u organofosfatos de guerra; distrofia vascular; complicaciones por carga de hierro; úlceras de decúbito; enfermedad celíaca; infección por ántrax; enfermedad de Anderson; enfermedad mitocondrial congénita; necrosis aséptica; leucemia; linfoma; asfixia; hernia encarcelada; diabetes mellitus; tuberculosis; endometriosis; lesiones por frío; complicaciones del tratamiento con esteroides; daño cerebrovascular; gangrena; hepatitis; hemoglobinuria; septicemia viral; quemaduras; hipertermia; síndrome compartimental; procolitis necrotizante; lesiones de la médula espinal; distrofia muscular; tirosemia; enfermedad metabólica hereditaria; enfermedad de micoplasma; infecciones virales; fenilcetonuria; infarto placentario, sífilis; necrosis avascular; alcoholismo.

5. La composición farmacéutica para usar de acuerdo con la reivindicación 4, en la que dicho inhibidor de elastasa desplaza la necrosis al menos parcialmente a muerte celular apoptótica.

6. La composición farmacéutica para usar de acuerdo con la reivindicación 5, que además comprende uno o más inhibidores de apoptosis.