Anticuerpos anti-esclerostina.

Un anticuerpo o un fragmento funcional del mismo que se une específicamente a la esclerostina humana,

en elque el anticuerpo o fragmento funcional del mismo comprende seis CDR con las siguientes secuencias deaminoácidos: HCDR1 con SEQ ID NO: 26, HCDR2 con SEQ ID NO: 27, HCDR3 con SEQ ID NO: 28, LCDR1con SEQ ID NO: 29, LCDR2 con SEQ ID NO: 30 y LCDR3 con SEQ ID NO: 31.

Anticuerpos anti-esclerostina La presente invención pertenece al campo de la medicina, en particular en el campo de los anticuerpos dirigidos contra la esclerostina. Más específicamente, la invención se refiere a anticuerpos de alta afinidad que se unen específicamente a la esclerostina humana y al uso terapéutico de los anticuerpos para varios trastornos o afecciones en sujetos humanos que se benefician de un incremento en al menos uno de masa ósea, densidad mineral ósea, contenido mineral óseo o resistencia ósea.

La osteoporosis es una enfermedad en la que se reduce la densidad mineral ósea (DMO) , se deteriora la microarquitectura ósea y los huesos osteoporósicos tienen un alto riesgo de fractura. La osteoporosis sigue siendo un causa principal de discapacidad a largo plazo y de mortalidad, en particular entre los ancianos. Aunque los tratamientos eficaces para la osteoporosis se presentan en forma de una modificación del estilo de vida y farmacoterapia, los tratamientos actualmente disponibles son limitados en número y eficacia, a menudo están asociados con efectos secundarios no deseados y no son universalmente aceptables para los pacientes. Varios agentes antirresortivos incluidos calcitonina, bisfosfonatos, reemplazo de estrógeno y moduladores selectivos de receptores de estrógeno (MSRE) evitan una pérdida ósea adicional, pero no reconstruyen el hueso una vez que se ha perdido. Está disponible un agente anabólico que incrementa la masa ósea y la densidad mineral ósea y restablece la arquitectura ósea en forma de PTH (1-34) humano. Sin embargo, este agente terapéutico requiere diariamente una inyección subcutánea, a menudo durante un año o más, lo que da como resultado un cumplimiento por parte del paciente menor del completo.

La esclerostina, el producto génico de SOST, se expresa fuertemente en los osteocitos dentro del hueso. Debido a su papel como regulador negativo potente de formación ósea, la esclerostina es un objetivo deseable para la intervención terapéutica para trastornos o afecciones lo que se beneficiaría de un incremento en al menos uno de masa ósea, densidad mineral ósea, contenido mineral óseo y resistencia ósea, por ejemplo, osteoporosis. Por lo tanto, los anticuerpos anti-esclerostina pueden resultar útiles como un enfoque anabólico para el tratamiento de dichos trastornos o afecciones. La publicación internacional PCT N.º WO 2006/119107 divulga secuencias de aminoácidos de anticuerpos humanizados anti-esclerostina particulares en los que todas las CDR son totalmente murinas, es decir, no están alteradas de las CDR de un anticuerpo generado en un ratón. El documento WO 2006/119062 divulga anticuerpos o fragmentos de los mismos que se pueden unir a la esclerostina, lo que se dice que es útil para tratar una amplia variedad de afecciones relacionadas con los huesos.

Existe la necesidad de obtener un anticuerpo anti-esclerostina alternativo que se una a la esclerostina humana con una fuerte afinidad de unión y que tenga un valor de CI50 bajo en un ensayo de bioactividad de esclerostina. Se podría prever que un anticuerpo de este tipo es más eficaz terapéuticamente, en particular para la osteoporosis, y requiere una dosificación menos frecuente que PTH (1-34) o un anticuerpo anti-esclerostina con una afinidad de unión menor (es decir, una KD mayor) o un valor de CI50 mayor. También existe una necesidad de obtener un anticuerpo específico para la esclerostina humana donde exista una disminución en el riesgo de una respuesta inmunitaria para el anticuerpo provocada por un sujeto humano administrado con el anticuerpo o una disminución en el riesgo de inestabilidad mientras que se mantienen las propiedades del anticuerpo de tener una alta afinidad de unión para esclerostina humana y un valor de CI50 bajo en un ensayo de bioactividad. Los anticuerpos antiesclerostina de la presente invención satisfacen estas necesidades y proporcionan ventajas relacionadas.

Los anticuerpos de la invención son anticuerpos monoclonales quiméricos o humanizados, comprenden una secuencia polipeptídica específica divulgada en el presente documento, se unen específicamente a la esclerostina humana con una alta afinidad de unión y se pueden usar para incrementar al menos uno de masa ósea, densidad mineral ósea, contenido mineral óseo y resistencia ósea en un mamífero, preferentemente un ser humano.

En un modo de realización, al menos una CDR en un anticuerpo de la invención difiere en la secuencia de aminoácidos de la CDR en la posición presente en un anticuerpo origina, es decir, el anticuerpo generado en un roedor (por ejemplo, un ratón) , a partir del que se deriva el anticuerpo variante, es decir, el anticuerpo humanizado o quimérico de la invención. Preferentemente, dicha (s) sustitución/sustituciones de aminoácidos en una secuencia de CDR de un anticuerpo de la invención da como resultado una mayor afinidad de unión (es decir, KD menor) con esclerostina humana, una CI50 menor en un ensayo de bioactividad de esclerostina, o ambas, que las presentes en el anticuerpo original. Una sustitución de aminoácidos en una secuencia de CDR de un anticuerpo de la invención de la presente en la CDR del anticuerpo original puede dar como resultado una disminución en la respuesta inmunógena para el anticuerpo por un ser humano administrado con el anticuerpo. Además, una sustitución de aminoácidos en una secuencia de CDR de un anticuerpo de la invención de la presente en la CDR del anticuerpo original puede disminuir el riesgo de inestabilidad del anticuerpo, por ejemplo, por la sustitución de un residuo de asparagina con un aminoácido diferente disminuyendo de este modo el riesgo de desaminación.

De acuerdo con un primer aspecto de la presente invención, se proporciona un anticuerpo o un fragmento funcional del mismo que se une específicamente a la esclerostina humana, en el que el anticuerpo o fragmento funcional del mismo comprende seis CDR con las siguientes secuencias de aminoácidos: HCDR1 con SEQ ID NO: 26, HCDR2 con SEQ ID NO: 27, HCDR3 con SEQ ID NO: 28, LCDR1 con SEQ ID NO: 29, LCDR2 con SEQ ID NO: 30 y LCDR3

con SEQ ID NO: 31.

Preferentemente, el anticuerpo o un fragmento funcional del mismo de acuerdo con la presente invención comprende una región variable de cadena pesada y una región variable de cadena ligera en el que, la región variable de cadena pesada tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 15 y la región variable de cadena ligera tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 18.

Aún más preferentemente, el anticuerpo o un fragmento funcional del mismo de acuerdo con la presente invención comprende un polipéptido de cadena pesada con la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 3 y un polipéptido de cadena ligera con la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 6.

De acuerdo con un segundo aspecto de la presente invención, se proporciona una composición farmacéutica, que comprende el anticuerpo de la presente invención, y un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

De acuerdo con otro aspecto de la presente invención, se proporciona un anticuerpo o un fragmento funcional del mismo de acuerdo con la presente invención para su uso como medicamento.

Preferentemente, el anticuerpo o un fragmento funcional del mismo de acuerdo con la presente invención se usa para incrementar al menos uno de masa ósea, densidad mineral ósea, contenido mineral óseo, o resistencia ósea en un sujeto humano, y más en particular para tratar una enfermedad o trastorno seleccionado de osteoporosis, osteopenia, artrosis, dolor asociado con artrosis, artritis reumatoide, enfermedad periodontal, o mieloma múltiple en un sujeto humano.

Un anticuerpo divulgado en el presente documento se une específicamente a la esclerostina humana y comprende seis regiones CDR con secuencias de aminoácidos seleccionadas del grupo que consiste en de (i) HCDR1 con SEQ ID NO: 20, HCDR2 con SEQ ID NO: 21, HCDR3 con SEQ ID NO: 22, LCDR1 con SEQ ID NO: 23, LCDR2 con SEQ ID NO: 24, y LCDR3 con SEQ ID NO: 25; (ii) HCDR1 con SEQ ID NO: 26, HCDR2 con SEQ ID NO: 27, HCDR3 con SEQ ID NO: 28, LCDR1 con SEQ ID NO: 29, LCDR2 con SEQ ID NO: 30, y LCDR3 con SEQ ID NO: 31; y (iii) HCDR1 con SEQ ID NO: 32, HCDR2 con SEQ ID NO: 33, HCDR3 con SEQ ID NO: 34, LCDR1 con SEQ ID NO: 35, LCDR2 con SEQ ID NO: 36, y LCDR3 con SEQ ID NO: 37.

En un caso, un anticuerpo se une específicamente a la esclerostina humana y comprende un polipéptido de región variable de cadena pesada ("HCVR") y un polipéptido de región variable de cadena ligera ("LCVR") en el que (i) la HCVR tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 14 y la LCVR tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 17; (ii) la HCVR tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID... [Seguir leyendo]

1. Un anticuerpo o un fragmento funcional del mismo que se une específicamente a la esclerostina humana, en el que el anticuerpo o fragmento funcional del mismo comprende seis CDR con las siguientes secuencias de aminoácidos: HCDR1 con SEQ ID NO: 26, HCDR2 con SEQ ID NO: 27, HCDR3 con SEQ ID NO: 28, LCDR1

con SEQ ID NO: 29, LCDR2 con SEQ ID NO: 30 y LCDR3 con SEQ ID NO: 31.

2. Un anticuerpo o un fragmento funcional del mismo de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende una región variable de cadena pesada y una región variable de cadena ligera en el que, la región variable de cadena pesada tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 15 y la región variable de cadena ligera tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 18.

3. Un anticuerpo o un fragmento funcional del mismo de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, que comprende un polipéptido de cadena pesada con la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 3 y un polipéptido de cadena ligera con la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 6.

4. Una composición farmacéutica que comprende el anticuerpo de una cualquiera de las reivindicaciones anteriores y un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

5. Un anticuerpo o un fragmento funcional del mismo de acuerdo con una cualquiera de reivindicaciones 1 a 3 para su uso como medicamento.

6. Un anticuerpo o un fragmento funcional del mismo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para su uso en el incremento de al menos uno de entre masa ósea, densidad mineral ósea, contenido mineral óseo, o resistencia ósea en un sujeto humano.

7. Un anticuerpo o un fragmento funcional del mismo de acuerdo con una cualquiera de reivindicaciones 1 a 3 para su uso en el tratamiento de una enfermedad o trastorno seleccionado de entre osteoporosis, osteopenia, artrosis, dolor asociado con artrosis, artritis reumatoide, enfermedad periodontal o mieloma múltiple en un sujeto humano.

8. Un anticuerpo o un fragmento funcional del mismo de acuerdo con la reivindicación 7 para su uso en el 25 tratamiento de osteoporosis.