TRATAMIENTO DE CÁNCER CON ANTICUERPOS ANTI-IL-1.

El cáncer generalmente mata invadiendo estructuras de tejido adyacente, afectando a la fisiología de órganos críticos. Se ha descubierto que el proceso de metástasis es simultáneo a la desdiferenciación de lesiones tumorales primarias. Un corolario de desdiferenciación tumoral es la heterogeneidad tumoral. La tríada de desdiferenciación, heterogeneidad y metástasis conduce a una mezcla mortal. Una vez que el cáncer se ha hecho metastásico y heterogéneo, la posibilidad de tratamiento antitumoral completo es remota. La esperanza que existe desde hace mucho tiempo es identificar algunos elementos comunes de tumores metastásicos, una característica crucial que se mantenga durante la proliferación y la desdiferenciación incluso en los tumores más heterogéneos, una características que sea tan intrínseca al proceso de metástasis que esté presente virtualmente en todas las célula tumorales con independencia del origen o tropismo. Con la identificación de tales elementos cruciales, la noción de tratar una enfermedad avanzada y diseminada puede tener una base en la realidad. Breve descripción de la figura Figura 1. Los gráficos que muestran respuestas tumorales en ratones desnudos con xenotransplantes de tumores humanos después del tratamiento con anticuerpos anti-IL-1. Los ratones se tratan con anticuerpo monoclonal de ratón anti-humano anti-IL-1a (mhIL-1) o anticuerpo monoclonal de hámster anti-humano IL-1a (hmIL-1) o ambos (mhIL-1 + hmIL-1). A los ratones se les administran dosis de 5 mg/kg de cada anticuerpo dos veces a la semana comenzando el día del xenotransplante (Tumor Día 1) o después del establecimiento de la enfermedad metastásica (Tumor Establecido). Los ratones se sacrifican cuando llevan una considerable carga tumoral y se encuentran en obvio malestar. La Figura 1A, tumor de próstata, día 1; Figura 1B; tumor de mama, día 1; Figura 1C, tumor de próstata establecido; Figura 1D, tumor de mama establecido. Figura 2. La formación de autoanticuerpo anti-IL-1 el día 56 en ratones C57BL/6 después de tres inyecciones subcutáneas con conjugado IL-1-PPD en alumbre (). Los ratones control se inmunizaron con PPD solamente en alumbre (). Figura 3. El complemento dependiente de anticuerpo medió la eliminación de células EL-4. Las células EL-4 se incubaron con diluciones en serie de antisuero policlonal de ratón IL-1 anti-ratón. La proporción de células eliminadas con células viables es proporcional a la concentración de suero. Un anticuerpo monoclonal humano IL-1 anti-ratón se usó como un control positivo. La incubación con suero murino que no había sido tratado o con solamente medio de cultivo sirvieron como los dos controles negativos. Descripción detallada de la invención Identificar IL-1 con un anticuerpo puede usarse como un tratamiento para el cáncer. En particular, el anticuerpo IL- 1 puede inhibir el potencial metastásico de tumores a través de la interrupción del papel fisiológico que IL-1 derivado del tumor juega en la metástasis tumoral. Además, debido a que los tumores expresan IL-1, un anticuerpo que se identifique IL-1 puede causar citotoxicidad tumoral directa a través de la citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (comúnmente referida como ADCC). Es muy inesperado que la interleuquina-1 alpha (IL-1) pueda ser una diana para la terapia de cáncer. Para entender esto es necesaria una breve revisión de la historia del llamado sistema interleuquina-1. El sistema IL-1 incluye IL-1, interleuquina-1 beta (IL-1ß), antagonista receptor de interleuquina-1 (IL-1ra) y receptor 1 de interleuquina (IL-1R1). Después de casi tres décadas desde el descubrimiento de IL-1 e IL-1ß, se ha progresado poco en la distinción de papeles biológicos separados para los dos productos genéticos. Esta inhabilidad para aclarar las funciones biológicas independientes de estas dos citoquinas está demostrada por la referencia común en la bibliografía científica simplemente a interleuquina-1, que ha sido durante décadas la nomenclatura que colectivamente se refiere a IL-1 y/o IL-1ß. Este fallo en la distinción de estas dos citoquinas es tan único como peculiar, considerando las diferencias bastante claras entre IL-1 e IL-1ß: no comparten una significativa homología de secuencia proteica; están bajo diferente regulación transcripcional, dando como resultado una separación temporal y espacial de expresión; están independientemente reguladas a través de maquinaria de procesos posttraslacionales separados e individualmente complejos; están sometidas a modificaciones post-traslacionales únicas y separadas; y tienen diferente distribución de tejido y se incrementan en respuesta a diferentes estímulos. Además, IL-1 es una membrana anclada a través de una cola de lípido y tiene actividad de enlace del tipo lectina, mientras que IL-1ß es una proteína segregada. Considerando las diferencias entre estas citoquinas, merece la pena entender por qué IL-1 e IL-1ß deberían haberse referido colectivamente como interleuquina-1. En primer lugar, la temprana suposición de que los dos productos genéticos representaban solamente una única actividad biológica, o quizás para matizar más esto, que IL- 1 tenía poca función biológica notable. Esto no tuvo en cuenta que IL-1 resultara del hecho de que no había ningún mecanismo secretor conocido para la citoquina, ninguna secuencia de transmembrana que pudiera permitir la integración en la membrana, y ninguna secuencia de señal codificada para la traslocación de vesículas 2   secretoras. Se pensaba que IL-1 estaba contenida en el citoplasma, y un papel como una molécula de señalización intracelular sugirió que tenía poca relevancia como verdadera citoquina. Por otro lado, un proceso posttraslacional y un recorrido secretor se establecieron rápidamente para IL-1ß. De hecho, la única relevancia de IL-1 en el llamado sistema interleuquina-1, parecía ser que demostró inducir señalización a través del receptor-1 IL-1, que se descubrió que inducía señalización en respuesta a IL-1 e IL-1ß. Debido a que no había mecanismo para la secreción, se postuló que IL-1 podía solamente realizar un papel fisiológico cuando se liberara desde el citoplasma de células muertas. Pero el fallo en encontrar niveles significativos de IL-1 en suero o tejidos bajo casi cualquier circunstancia pareció minimizar la posible importancia de IL-1. De este modo es bastante inesperado que el tratamiento de animales con un anticuerpo anti-IL-1 pueda proteger a los animales de formas agresivas de cáncer. Similarmente, la inmunización de animales para inducir un título de anticuerpo anti-IL-1 puede proteger a los animales de tumores. El mecanismo de acción aún no está claro y puede implicar una o más combinaciones de una neutralización de producción de IL-1 pro-tumor del huésped, la neutralización de producción de IL-1 tumoral o dirigir la citotoxicidad del tumor a través de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) o eliminación mediada complementar dependiente de anticuerpos (ADCK). Los pacientes que pueden tratarse de acuerdo con la invención incluyen tanto humanos como mamíferos no humanos, tales como animales de compañía, animales de laboratorio, modelos de animales, etc. (por ejemplo, gatos, perros, ovejas, cerdos, cabras). Los anticuerpos como se usan en el presente documento incluyen moléculas intactas de inmunoglobulina policlonales o monoclonales; fragmentos de inmunoglobulina, tales como Fab, F(ab)2, scFv y Fv monoméricos o diméricos; y moléculas que ocurren de manera no natural tales como diacuerpos, minicuerpos, cuerpos Kappa, Janusins, y similares. Los anticuerpos útiles en procedimientos terapéuticos de la invención comprenden un sitio de enlace de IL-1 y un enlace específicamente con IL-1. Los sitios de enlace de IL-1 como se usan en el presente documento incluyen sitios de enlace de IL-1 que ocurren de manera natural en la parte variable de anticuerpos. Los sitios de enlace IL-1 también incluyen sitios de enlace que difieren de los sitios de enlace de IL-1 que ocurren de manera natural en entre 1 y 15 sustituciones de aminoácido conservador (por ejemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 13, 11, 12, 13, 14 o 15) y que específicamente se enlazan con IL-1. Típicamente, un anticuerpo que se enlaza específicamente con IL-1 proporciona una señal de detección al menos 10, 20 o 100 veces más alta que una señal de detección proporcionada con un antígeno no IL-1 cuando se usa en un ensayo inmunoquímico. Preferentemente, los anticuerpos que se enlazan específicamente con IL-1 no detectan otras proteínas en ensayos inmunoquímicos y pueden inmunoprecipitar IL-1 de una solución. Los anticuerpos policlonales pueden obtenerse inmunizando un huésped apropiado con IL-1 usando procedimientos bien conocidos. Sin embargo, los anticuerpos monoclonales son preferentes. Los anticuerpos... [Seguir leyendo]

1. Los anticuerpos anti-IL-1 para su uso en el tratamiento del cáncer en un paciente mamífero. 2. Los anticuerpos anti-IL-1 de la reivindicación 1 en los que el paciente es un ser humano. 3. Los anticuerpos anti-IL-1 de la reivindicación 1 en los que el paciente se selecciona del grupo que consiste en un ratón, un cerdo, una cabra, un perro, un gato y una oveja. 4. Los anticuerpos anti-IL-1 de la reivindicación 1 en los que el cáncer es metastásico. 5. Los anticuerpos anti-IL-1 de la reivindicación 1 en los que el cáncer es cáncer de mama o de próstata. 6. Los anticuerpos anti-IL-1 de la reivindicación 1 en los que los anticuerpos son policlonales. 7. Los anticuerpos anti-IL-1 de la reivindicación 1 en los que los anticuerpos son monoclonales. 8. Los anticuerpos anti-IL-1 de la reivindicación 1 en los que los anticuerpos se seleccionan del grupo que consiste en Fab, F(ab)2, scFv, Fv, diacuerpos, minicuerpos, cuerpos Kappa y Janusins. 9. IL-1 para su uso en el tratamiento del cáncer, por el que el paciente genera autoanticuerpos IL-1. 10. IL-1 de la reivindicación 9 en el que el paciente es un ser humano. 12   13   14     16