Formulaciones de interferón beta pegilado.

Una composición farmacéutica líquida que comprende un interferón ß pegilado (PEG-IFN ß),

un excipiente de poliol, un agente tensioactivo de poloxámero 188 y un tampón de acetato sódico, en la que el pH de la composición farmacéutica es 4,2 ± 0,2.

Formulaciones de interferón beta pegilado

Campo de la invención.

La presente invención se refiere a formulaciones de interferón beta pegilado (PEG-IFN-β) .

Fundamento de la invención.

El interferón-β es una proteína y se ha identificado como medicamento útil actualmente aplicado, p. ej., para el tratamiento de la esclerosis múltiple (MS) .

Las proteínas pueden ser modificadas, bien sea en su secuencia o bien por medio de otras modificaciones con el fin de alterar o mejorar, p. ej., su actividad o su estabilidad. Una de estas modificaciones es la introducción de una unión con polímeros como el polietilenglicol (PEG) .

El interferón β unido a polietilenglicol (PEG-IFN β) se ha descrito por ejemplo, en los documentos WO99/55377 y EP 0 593 868 A1.

En el campo de la medicina, se han hecho diversos planteamientos para estabilizar las proteínas mediante liofilización o en forma de composición farmacéutica líquida. Los materiales liofilizados han de ser reconstituidos en forma de una solución antes de su uso. Más cómodas, y por lo tanto de un interés particular, son las composiciones farmacéuticas líquidas concentradas o listas para utilizar, que no necesitan ninguna otra preparación adicional para su aplicación al paciente.

Las formulaciones farmacéuticas líquidas de interferón β se describen por ejemplo en los documentos WO 95/31213 y WO 2004/096263.

El documento WO 2005/084303 describe composiciones de conjugado de polímero - interferón beta 1b.

La patente de EE.UU. nº 6.531.122 se refiere a variantes de interferón pegilado en una formulación con excipientes, agentes solubilizantes y un tampón.

El documento WO 2004/060299 proporciona métodos para la síntesis de conjugados de polímeros de citocinas incluyendo el interferón beta y los antagonistas de unión con los receptores de los mismos.

El documento US 20060051320 A1 se refiere a formulaciones liofilizadas de interferón pegilado preparadas usando trehalosa como crioprotector.

El documento WO 99/48535 proporciona formulaciones que previenen la pérdida y el daño de conjugados de PEGinterferón alfa durante la liofilización y después de la misma.

El documento WO 03002152 se refiere en particular a composiciones estabilizadas que comprenden un polipéptido de interferón y un derivado de ciclodextrina de sulfoalquil éter.

Ninguna de las referencias anteriores describe ni sugiere las formulaciones líquidas de acuerdo con la invención.

Sumario de la invención

De acuerdo con un aspecto de la invención, se proporciona una composición farmacéutica líquida que comprende un interferón beta pegilado (PEG-IFN-β) , un excipiente, un agente tensioactivo y un tampón, en el que dicho excipiente es un poliol, en donde el agente tensioactivo es un poloxámero 188, en donde tampón es un tampón de acetato sódico, y en donde el pH de la composición farmacéutica es 4, 2 ± 0, 2.

De acuerdo con otro aspecto de la invención, se proporciona un método para preparar una composición farmacéutica líquida, en donde dicho método comprende añadir una cantidad calculada de excipiente y agente tensioactivo a la solución tamponada y después añadir el PEG-IFN-β de acuerdo con la presente reivindicación 18ª.

De acuerdo con otro aspecto de la invención, se proporciona un recipiente cerrado herméticamente, en condiciones estériles y apropiadas para el almacenamiento antes de su uso, que comprende la formulación farmacéutica líquida de acuerdo con la invención.

De acuerdo con otro aspecto de la invención, se proporciona un kit de una composición farmacéutica, en la que el kit comprende un recipiente lleno con una composición farmacéutica según la invención.

Breve descripción de las tablas y de la figura.

Formulaciones de acuerdo con la invención que contienen 0, 044 mg/ml de PEG-IFN beta.

La Tabla 1 ilustra diversas formulaciones de acuerdo con la invención, que contienen 0, 044 mg/ml de PEG-IFN-beta.

La Tabla 2 describe una prueba de estabilidad (SE-HPLC) a 40 ºC, 25 ºC y 2 - 8 ºC, respectivamente, de las formulaciones de acuerdo con la invención, con un pH de 4, 2, a lo largo del tiempo.

La Tabla 3 describe una prueba de estabilidad (RP-HPLC) a 40 ºC, 25 ºC y 2 - 8 ºC, respectivamente, de las formulaciones de acuerdo con la invención, con un pH de 4, 2, a lo largo del tiempo

La Tabla 4 ilustra los títulos (mcg/mL) de las formulaciones de acuerdo con la invención, por SE-HPLC.

La Tabla 5 ilustra los títulos (mcg/mL) de las formulaciones de acuerdo con la invención por SE-HPLC, antes y después de la filtración, con el % de recuperación y una representación en forma de gráfico (Figura 1: % de recuperación mostrado como recuperación de AF y TO en %) .

La Tabla 6 muestra los valores del pH de las formulaciones de acuerdo con la invención a lo largo de 4 a 26 semanas a 25 ºC y 2 - 8 ºC, respectivamente.

La Tabla 7 representa los resultados del bioensayo de formulaciones de acuerdo con la invención a lo largo del tiempo.

II. Formulaciones de acuerdo con la invención que contienen 0, 055 y 0, 110 mg/ml de PEG-IFN beta, respectivamente:

En estas formulaciones la cantidad de PEG-IFN-beta se ha aumentado a 0, 055 y 0, 110 mg/ml de PEG-IFN beta 1a, respectivamente.

La Tabla 8 ilustra una prueba SE-HPLC que mide la pureza a 40 °C, 25 ºC y 8, 2 ºC, respectivamente, de las formulaciones de acuerdo con la invención con un pH de 4, 2, a lo largo del tiempo.

La Tabla 9 ilustra una prueba de SE-HPLC que mide el contenido de proteína a 40 ºC, 25 ºC y 2 – 8 ºC, respectivamente, de las formulaciones de acuerdo con la invención con un pH de 4, 2, a lo largo del tiempo.

La Tabla 10 ilustra una prueba de RP-HPLC que mide la pureza a 40 ºC, 25 ºC y 2 - 8 ºC, respectivamente, de las formulaciones de acuerdo con la invención con un pH de 4, 2, a lo largo del tiempo.

La Tabla 11 muestra los valores del pH de las formulaciones de acuerdo con la invención a lo largo de 4 a 13 semanas a 25 ºC y 2 – 8 ºC, respectivamente, a lo largo del tiempo.

La Tabla 12 muestra los datos de bioensayos de formulaciones de acuerdo con la invención a 25 ºC y 2 – 8 ºC, respectivamente, a lo largo del tiempo.

La Tabla 13 ilustra los datos relacionados con las formas oxidadas por mapeo de péptidos de PEG-IFN-beta de las formulaciones de acuerdo con la invención.

Descripción detallada de la invención.

En un aspecto la invención se refiere a una composición farmacéutica líquida que comprende un PEG-IFN β, un excipiente, un agente tensioactivo y un tampón, en el que dicho excipiente es un poliol, en el que dicho agente tensioactivo es un poloxámero 188, en el que dicho tampón es un tampón de acetato sódico, y en el que el pH de la composición farmacéutica es 4, 2 ± 0, 2.

Los párrafos que siguen proporcionan definiciones de los diversos compuestos que constituyen la formulación de acuerdo con la invención, y se entiende que son válidos de manera uniforme a lo largo de la memoria y las reivindicaciones, a menos que una definición expresamente establecida proporcione una definición más amplia.

El interferón beta pegilado de la formulación puede ser cualquier interferón beta que lleve como modificación covalente un polietilen glicol o una modificación comparable a esta. Un ejemplo de PEG-interferón beta es un PEGinterferón beta en el que la pegilación puede ser llevada a cabo por métodos conocidos, tales como los descritos en el documento WO 99/55377.

En particular, de acuerdo con la invención, el IFN beta tiene unido covalentemente el polímero hidrófilo polietilenglicol (PEG) , también conocido como poli (óxido de etileno) (PEO) . El PEG puede ser un polímero lineal que tiene grupos hidroxilo en cada terminal:

HOCH2CH2O (CH2CH2O) nCH2CH2OH

También puede ser usado como metoxi-PEG-OH (m-PEG) , en el que un terminal es el grupo metoxi relativamente inerte, mientras que el otro terminal es... [Seguir leyendo]

1ª. Una composición farmacéutica líquida que comprende un interferón β pegilado (PEG-IFN β) , un excipiente de poliol, un agente tensioactivo de poloxámero 188 y un tampón de acetato sódico, en la que el pH de la composición farmacéutica es 4, 2 ± 0, 2.

2ª. Una composición según la reivindicación 1ª, en la que dicho excipiente de poliol es manitol

3ª. La composición según la reivindicación 1ª o 2ª, en la que dicho PEG-IFN β está presente en una concentración de 0, 01 mg/ml a 0, 1 mg/ml.

4ª. La composición según la reivindicación 3ª, en la que dicho PEG-IFN β está presente en una concentración de 0, 044 mg/ml, 0, 055 mg/ml o 0, 110 mg/ml.

5ª. La composición según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que el PEG-IFN β contiene un PEG lineal o ramificado, preferentemente un PEG ramificado.

6ª. La composición según la reivindicación 5ª, en la que el PEG tiene un peso molecular de al menos 20 kDa, preferentemente al menos 40 kDa, más preferentemente 40 kDa.

7ª. La composición según la reivindicación 1ª o 2ª, en la que dicho excipiente de poliol está presente en una concentración de 30 mg/ml a 50 mg/ml.

8ª. La composición según la reivindicación 1ª o 2ª, en la que dicho excipiente de poliol está presente en una concentración de 40 mg/ml a 50 mg/ml.

9ª. La composición según la reivindicación 1ª o 2ª, en la que dicho excipiente de poliol está presente en una concentración de 45 mg/ml.

10ª. La composición según la reivindicación 1ª o 2ª, en la que dicho poloxámero 188 está presente en una concentración de 0, 1 mg/ml a 1 mg/ml.

11ª. La composición según la reivindicación 1ª o 2ª, en la que dicho poloxámero 188 está presente en una concentración de 0, 4 mg/ml a 0, 7 mg/ml.

12ª. La composición según la reivindicación 1ª o 2ª, en la que dicho poloxámero 188 está presente en una concentración de 0, 5 mg/ml.

13ª. La composición según la reivindicación 1ª o 2ª, en la que dicho tampón de acetato sódico está presente en una concentración de 5 mM a 500 mM.

14ª. La composición según la reivindicación 13ª, en la que dicho tampón de acetato sódico está presente en una concentración de 10 mM.

15ª. La composición según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que dicha composición es una solución acuosa.

16ª. La composición según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que dicha composición comprende además metionina.

17ª. La composición según la reivindicación 16ª, en la que la metionina está presente en una concentración de 0, 10 a 0, 50 mg/ml, preferentemente de 0, 20 a 0, 40 mg/ml, más preferentemente de 0, 12 o 0, 25 mg/ml.

18ª. Un método para preparar una composición farmacéutica líquida según cualquiera de las reivindicaciones 1ª a 17ª, en el que dicho método comprende añadir una cantidad calculada de un excipiente de poliol y poloxámero 188 a la solución tamponada de acetato sódico, y después añadir el PEG-IFN β.

19ª. Un recipiente cerrado herméticamente en condiciones estériles y apropiadas para el almacenamiento antes de su uso, que comprende la formulación farmacéutica líquida según cualquiera de las reivindicaciones 1ª a 17ª.

20ª. El recipiente según la reivindicación 19ª, en donde dicho recipiente es una jeringuilla pre-llenada, o un frasco para un auto-inyector.

21ª. Un kit de una composición farmacéutica, en donde el kit comprende un recipiente llenado con una composición farmacéutica según cualquiera de les reivindicaciones 1ª a 17ª.