DERIVADOS PIRAZOL Y USO DE LOS MISMOS COMO INHIBIDORES DE QUINASAS DEPENDIENTES DE CICLINA.

Derivados pirazol y uso de los mismos como inhibidores de quinasas dependientes de ciclina Ha sido de gran ayuda la búsqueda de nuevos agentes terapéuticos en años recientes mediante una mejor comprensión de la estructura de las enzimas y otras biomoléculas asociadas con enfermedades. Una clase importante de enzimas que ha sido el objeto de estudio extensivo es las proteínas quinasas. Las proteínas quinasas constituyen una gran familia de enzimas relacionadas estructuralmente que son responsables del control de una variedad de procesos de transducción de señal dentro de la célula. (Hardie, G. and Hanks, S. The Protein Kinase Facts Book, I y II, Academic Press, San Diego, Calif.: 1995). Se considera que las proteínas quinasas han evolucionado a partir de un gen ancestral común debido a la conservación de su estructura y función catalítica. Casi todas las quinasas contienen un dominio catalítico similar de 250-300 aminoácidos. Las quinasas se pueden categorizar en familias mediante los sustratos que fosforilan (por ejemplo, proteína tirosina, proteína-serina/treonina, lípidos, etc.). Se han identificado motivos de secuencia que corresponden de manera general a cada una de estas familias quinasa (Ver, por ejemplo, Hanks, S. K., Hunter, T., FASEB J. 1995, 9, 576- 596; Knighton et al., Science 1991, 253, 407-414; Hiles et al., Cell 1992, 70, 419-429; Kunz et al., Cell 1993, 73, 585- 596; Garcia-Bustos et al., EMBO J. 1994, 13, 2352-2361). En general, las proteínas quinasas median la señalización intracelular al afectar una transferencia fosforilo desde un trifosfato de nucleósido hasta una proteína receptora que está involucrada en una ruta de señalización. Estos eventos de fosforilación actúan como interruptores de activación/desactivación moleculares que pueden modular o regular la función biológica de la proteína objetivo. Estos eventos de fosforilación finalmente se activan en respuesta a una variedad de estímulos extracelulares y otros estímulos. Ejemplos de tales estímulos incluyen señales de estrés del medio ambiente y químico (por ejemplo, choque osmótico, choque térmico, radiación ultravioleta, endotoxina bacteriana, y H2O2), citoquinas (por ejemplo, interleuquina-1 (IL-1) y factor- de necrosis de tumor (TNF-)), y factores de crecimiento (por ejemplo, factor que estimula la colonia de macrófago de granulocito (GM-CSF), y factor de crecimiento de fibroblasto (FGF)). Un estímulo extracelular puede afectar una o más respuestas celulares que se relacionan con el crecimiento celular, migración, diferenciación, secreción de hormonas, activación de factores de transcripción, contracción de músculo, metabolismo de glucosa, control de síntesis de proteína, y regulación del ciclo celular. Muchas enfermedades se asocian con respuestas celulares anormales activadas por eventos mediados por la proteína quinasa como se describió anteriormente. Estas enfermedades incluyen, pero no se limitan a, enfermedades autoinmunitarias, enfermedades inflamatorias, enfermedades óseas, enfermedades metabólicas, enfermedades neurológicas y neurodegenerativas, cáncer, enfermedades cardiovasculares, alergias y asma, enfermedad de Alzheimer, y enfermedades relacionadas con hormonas. De acuerdo con lo anterior, ha habido un esfuerzo considerable en la química medicinal para encontrar inhibidores de proteína quinasa que son efectivos como agentes terapéuticos. El inicio, progresión, y terminación del ciclo celular de mamífero se regulan mediante diversos complejos de quinasa dependientes de ciclina (CDK), que son críticos para el crecimiento celular. Estos complejos comprenden por lo menos una subunidad catalítica (el CDK en sí mismo) y una subunidad reguladora (ciclina). Algunos de los complejos más importantes para la regulación del ciclo celular incluyen ciclina A (CDK1 también conocida como cdc2, y CDK2), ciclina B1-B3 (CDK1) y ciclina D1-D3 (CDK2, CDK4, CDK5, CDK6), ciclina E (CDK2). Cada uno de estos complejos está involucrado en una fase particular del ciclo celular. Sin embargo, no todos los miembros de la familia CDK están involucrados exclusivamente en el control del ciclo celular. Así los CDK 7, 8, y 9 están implicados en la regulación de la transcripción, y el CDK5 cumple una función en la función celular neuronal y secretora. La actividad de los CDK se regula post-transduccionalmente, mediante asociaciones transitorias con otras proteínas, y mediante alteraciones de su localización intracelular. El desarrollo del tumor está estrechamente relacionado con la alteración y la desregulación de los CDK y sus reguladores, que sugiere que los inhibidores de los CDK pueden ser terapéuticos anti-neoplásicos útiles. De hecho, los resultados tempranos sugieren que las células transformadas y normales difieren en su requerimiento de, por ejemplo, ciclina A/CDK2 y que puede ser posible desarrollar agentes antineoplásicos novedosos desprovistos de toxicidad de anfitrión general observada con fármacos citoestáticos y citotóxicos convencionales. Aunque la inhibición de los CDK relacionados con el ciclo celular es claramente relevante en, por ejemplo, aplicaciones de oncología, este no puede ser el caso para la inhibición de los CDK que regulan la polimerasa de ARN. Por otra parte, la inhibición de la función T de CDK9/ciclina está recientemente ligada a la prevención de la replicación de VIH y el descubrimiento de la nueva biología CDK que continúa abriendo nuevas indicaciones terapéuticas para los inhibidores CDK (Sausville, E. A. Trends Molec. Med. 2002, 8, S32-S37). La función de los CDK es fosforilar y así activar o desactivar ciertas proteínas, que incluyen por ejemplo proteínas retinoblastoma, láminas, histona H1, y componentes del huso mitótico. La etapa catalítica mediada por los CDK involucra una reacción desde fosfo-transferencia de ATP hasta el sustrato de la enzima macromolecular. Se ha 2  5  encontrado que diversos grupos de compuestos (revisados en por ejemplo Fischer, P. M. Curr. Opin. Drug Discovery Dev. 2001, 4, 623-634) poseen propiedades antiproliferativas por virtud del antagonismo ATP específico de CDK. En una mediación de nivel molecular de la actividad del complejo cdk/ciclina requiere una serie de eventos estimuladores y de fosforilación inhibidora, o de desfoforilación. La fosforilación Cdk se realiza mediante un grupo de quinasas activadoras de cdk (CAK) y/o quinasas tales como wee1, Myt1 y Mik1. La desfosforilación se realiza mediante fosfatasas tales como cdc25 (a & c), pp2a, o KAP. La actividad del complejo Cdk/ciclina se puede regular adicionalmente mediante las dos familias de inhibidores proteináceas celulares endógenos: la familia Kip/Cip, o la familia INK. Las proteínas INK unen específicamente el cdk4 y cdk6. Los p16ink4 (también conocidos como MTS1) son un gen supresor de tumor potencial que se muta, o elimina, en un gran número de cánceres principales. La familia Kip/Cip contiene proteínas tales como p21Cip1, 10  Waf1, p27Kip1 y p57kip2. Como se discutió previamente se induce p21 mediante p53 y es capaz de inactivar los complejos de cdk2/ciclina (E/A) y cdk4/ciclina (D1/D2/D3). Típicamente los niveles de expresión de p27 se han observado en cánceres de mama, de colon y de próstata. Por el contrario se ha mostrado que la sobreexpresión de 15  20  25  30  35  40  45    la ciclina E en tumores sólidos se correlaciona con pronóstico pobre del paciente. La sobreexpresión de la ciclina D1 se ha asociado con carcinomas esofágicos, de mama, de célula escamosa, y de pulmón no microcítico. Las funciones principales de los cdk, y sus proteínas asociadas, en coordinar y dirigir el ciclo celular en las células proliferantes se ha descrito anteriormente. También se han descrito algunas de las rutas bioquímicas en las que los cdk cumplen una función clave. El desarrollo de monoterapias para el tratamiento de trastornos proliferativos, tales como cánceres, utilizando terapéuticos dirigidos genéricamente a los cdk, o a los cdk específicos, es por lo tanto potencialmente altamente deseable. Los inhibidores Cdk posiblemente también se pueden utilizar para tratar otras afecciones tales como infecciones víricas, enfermedades autoinmunitarias y enfermedades neuro-degenerativas, entre otras. También se pueden proporcionar terapéuticos dirigidos a Cdk que proporcionan beneficios clínicos en el tratamiento de las enfermedades previamente descritas cuando se utiliza con terapia de combinación con agentes terapéuticos existentes, o con nuevos agentes terapéuticos. Las terapias anti-neoplásicas dirigidas a Cdk pueden tener ventajas potenciales sobre muchos agentes antineoplásicos actuales ya que ellos no interactúan directamente con el ADN y por lo tanto deben reducir el riesgo de desarrollo de tumor secundario. Así, subsiste una necesidad continúa de encontrar nuevos agentes terapéuticos... [Seguir leyendo]

R 1 es alquilo C1-6, cicloalquilo C3-14, un grupo cicloheteroalquilo de 3-14 miembros, arilo C6-14, alcoxi C1-6, alquilo C1-6 arilo C6-14, alquil C1-6cicloalquiloC3-14, grupo cicloheteroalquilo de 3-14 miembros alquilo C1-6, grupo heteroarilo de 5- 14 miembros alquilo C1-6, alquil C1-6OR 7 , alquil C1-6NR 5 R 6 , alcoxi C1-6 arilo C6-14, alquil C1-6CN, o alquil C1-6C(O)OR 7 , que se puede sustituir o no sustituir con uno o más de alquilo C1-6, arilo C6-14, hidroxilo, alquilhalo C1-6, alcoxihalo C1- 6, halo, alcoxi C1-6, alquilo C1-6 arilo C6-14, C(O)OR 8 , CN, oxo, o NR 9 R 10 ; R 2 es H, alquilo C1-6, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, hidroxilo, o halo; R 3 y R 4 son independientemente H, alquilo C1-6, cicloalquilo C3-14, o halo, que se puede sustituir o no sustituir; R 5 , R 6 , R 7 , R 8 , R 9 , y R 10 son independientemente hidrógeno, alquilo C1-6, alquenilo C2-6, alquinilo C2-6, cicloalquilo C3- 14, un grupo heteroarilo de 5-14 miembros, arilo C6-14, C(O)OR 11 , o C(O)R 11 , que se puede sustituir o no sustituir; X es N o CR 12 en donde R 11 y R 12 son independientemente H, halógeno, o alquilo C1-6. 2. El compuesto de la fórmula I de acuerdo con la reivindicación 1 en donde R 1 es alquilo C1-6, cicloalquilo C3-14, arilo C6-14, un grupo cicloheteroalquilo de 3-14 miembros, alquil C1-6 arilo C6-14, alquil C1-6cicloalquilo C3-14, grupo cicloheteroalquilo de 3-14 miembros alquilo C1-6, o grupo heteroarilo de 5-14 miembros alquilo C1-6, que se puede sustituir o no sustituir con uno o más de alquilo C1-6, arilo C6-14, hidroxilo, alquilhalo C1-6, halo, alcoxi C1-6, alquilo C1-6 arilo C6-14. 3. El compuesto de la fórmula I de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2 en donde R 1 Es cicloalquilo C3-14, arilo C6-14, un grupo cicloheteroalquilo de 3-14 miembros, alquilo C1-6 arilo C6-14, o alquil C1-6cicloalquilo C3-14, que se puede sustituir o no sustituir con uno o más de alquilo C1-6 o arilo C6-14. 4. El compuesto de la fórmula I de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 en donde R 3 y R 4 son independientemente H, alquilo C1-6, o cicloalquilo C3-14. 5. El compuesto de la fórmula I de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 en donde uno de R 3 y R 4 es H y el otro de R 3 y R 4 es alquilo C1-6, o cicloalquilo C3-14. 6. El compuesto de la fórmula I de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 en donde R 4 es H y R 3 es metilo, etilo, o propilo. 7. El compuesto de la fórmula I de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 en donde X es N o CH. 8. El compuesto de la fórmula I de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 en donde X es N. 9. El compuesto de la fórmula I de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-8 en donde R 1 se selecciona de: y   63  o 5  10    R 3 es metilo o isopropilo. 10. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula I de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-9. 11. Un compuesto de la fórmula I de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-9 para uso en el tratamiento de una enfermedad proliferativa. 12. Un compuesto de la fórmula I de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones la reivindicación 1-9 para uso en la inhibición de la proliferación celular en una célula o mamífero en necesidad de este. 13. Un compuesto de la fórmula I de acuerdo con las reivindicaciones 1-9 para uso en medicina. 14. Un compuesto de la fórmula I de acuerdo con las reivindicaciones 1-9 para uso en cáncer. 15. Un compuesto de la fórmula I de acuerdo con las reivindicaciones 1-9 en combinación con otro agente. 64