Un compuesto de la fórmula **Fórmula**

X es -Cl;

R1 y R3 son hidrógeno;

R4 es 3-cloro-fenilo;

R2 es -fenilo, que está sin sustituir o sustituido una o dos veces por un sustituyente elegido con independencia entre halógeno, -OH, -alquinilo C2-6, -O-alquenilo C2-8, o -alquilo C1-8 y -O-alquilo C1-8, dichos alquilo C1-8 pueden estar sin sustituir o sustituidos una o dos veces por -OH, o -alquenilo C2-8; y

R es hidrógeno, o

alquilo C1-8, que está sin sustituir o sustituido por

-N-(alquilo C1-8)2,

-O-alquilo C1-8,

-O-C(O)-alquilo C1-8,

-OH,

-NH-C(O)-alquilo C1-8,

-C(O)-OH,

-C(O)-NH-alquilo C1-8, dicho grupo alquilo está sin sustituir o sustituido una o dos veces por -OH,

-C(O)-NH-cicloalquilo C3-6,

-C(O)-NH2,

-C(O)-NH-piperidinilo, dicho piperidinilo está sin sustituir o sustituido por -S(O)2-CH3; y

sus sales farmacéuticamente aceptables.

Derivados de espiroindolinona como inhibidores de MDM2-p53

La p53 es una proteína supresora tumoral que desempeña un papel fundamental en la protección contra el desarrollo del cáncer. Guarda la integridad celular e impide la propagación de clones permanentemente dañados de las células por inducción del paro de su crecimiento o apóptosis. A nivel molecular, la p53 es un factor de transcripción que puede activar un abanico de genes implicados en la regulación del ciclo celular y en la apóptosis. La p53 es un potente inhibidor de ciclo celular, que está estrechamente regulado por la MDM2 a nivel celular. La MDM2 y la p53 forman un bucle de control de realimentación. La MDM2 puede fijar la p53 e inhibir su capacidad de transactivar los genes regulados por la p53. Además, la MDM2 interviene en la degradación de la p52, dependiente de la ubiquitina. La p53 puede activar la expresión del gen de la MDM2, aumentando de este modo el nivel celular de la proteína MDM2. Este bucle de control de realimentación asegura que tanto la MDM2 como la p53 se mantienen a un nivel bajo en las células que proliferan normalmente. La MDM2 es además un cofactor de la E2F, que desempeña un papel central en la regulación del ciclo celular.

La proporción entre la MDM2 y la p53 (E2F) queda desregulada en muchos tipos de cáncer. Se ha constatado que los defectos moleculares que aparecen con frecuencia en el lugar p16INK4/p19ARF, por ejemplo, afectan la degradación de la proteína MDM2. La inhibición de la interacción MDM2-p53 en células tumorales de p53 de tipo salvaje podría conducir a la acumulación de la p53, paro del ciclo celular y/o apóptosis. Por lo tanto, los antagonistas de la MDM2 pueden ofrecer una nueva estrategia de terapia del cáncer en forma de agentes individuales o en combinación con un amplio espectro de otras terapias antitumorales. La viabilidad de esta estrategia se ha puesto de manifiesto con el uso de diferentes herramientas macromoleculares para la inhibición de la interacción MDM2p53 (p.ej. anticuerpos, oligonucleótidos antisentido, péptidos) . La MDM2 se fija también sobre la E2F en la región de fijación conservada, al igual que la p53 y activa la transcripción de la ciclina A, dependiente de la E2F, lo cual sugiere que los antagonistas de la MDM2 pueden tener efectos en las células mutantes de p53.

Se ha descrito anteriormente una serie de espiroindolinonas como antagonistas de la MDM2 en J. Am. Chem. Soc. 127, 10130, 2005. Inhibidors de la interacción de MDM2-p53 se han descrito en DING ET AL, "J. Med. Chem.", vol 49, 2006, págs. 3432-3435.

La presente invención proporciona derivados de espiroindolinona que son inhibidores de molécula pequeña de la interacción MDM2-p53. En los ensayos sin células y en los basados en células se observa que los compuestos de la presente invención inhiben la interacción de la proteína MDM2 con un péptido similar a la p53. En los ensayos basados en células, estos compuestos despliegan actividad mecanística. La incubación de células cancerosas con la p53 de tipo salvaje conduce a la acumulación de la proteína p53, la inducción del gen p21 regulado por la p53 y la interrupción del ciclo celular en la fase G1 y G2, traduciéndose en una potente actividad antiproliferante contra las células p53 de tipo salvaje "in vitro". En cambio, estas actividades no se observan en las células cancerosas con el mutante p53 en concentraciones equiparables de compuesto. Por lo tanto, la actividad de los antagonistas de la MDM2 es probable que esté asociada a este mecanismo de acción. Estos compuestos pueden ser agentes anticancerosos potentes y selectivos.

La presente invención se refiere a espiroindolinonas de la fórmula II

R

N

O

X

II, X es -Cl; R1 y R3 son hidrógeno; R4 es 3-cloro-fenilo; R2 es -fenilo, que está sin sustituir o sustituido una o dos veces por un sustituyente elegido con independencia entre halógeno, -OH, -alquinilo C2-6, -O-alquenilo C2-8, o -alquilo C1-8 y -O-alquilo C1-8, dichos alquilo C1-8

pueden estar sin sustituir o sustituidos una o dos veces por -OH, o -alquenilo C2-8; y R es hidrógeno, o alquilo C1-8, que está sin sustituir o sustituido por

-N- (alquilo C1-8) 2, -O-alquilo C1-8, -O-C (O) -alquilo C1-8,

-OH, -NH-C (O) -alquilo C1-8,

-C (O) -OH,

-C (O) -NH-alquilo C1-8, dicho grupo alquilo está sin sustituir o sustituido una o dos veces por -OH,

-C (O) -NH-cicloalquilo C3-6,

-C (O) -NH2,

- C (O) -NH-piperidinilo, dicho piperidinilo está sin sustituir o sustituido por -S (O) 2-CH3; y sus sales farmacéuticamente aceptables.

Son especialmente preferidos los compuestos de las fórmulas siguientes: (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -6'- (5-fluor-2-metilfenil) -2'-metil-6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2Hpirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -6'- (5-fluor-2-metilfenil) -2'-metil-6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2Hpirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona quiral, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -6'- (5-fluor-2-metilfenil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -6'- (1-metileno-propil) -2'-metil-6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2Hpirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -6'- (1-metileno-propil) -2'-metil-6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2Hpirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona quiral, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona quiral, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'- (3-dimetilaminopropil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3Hindol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'- (2-metoxietil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7' (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -2'- (2-acetoxietil) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7' (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'- (2-hidroxietil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7' (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'- (2-hidroxietil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7' (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona quiral, (6'R, 3R, 8'S) -2'- (2-acetilaminoetil) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol3, 7'- (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'- (2-hidroxicarbonil-metil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3Hindol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'- (2-fluorcarbonil-metil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3Hindol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'-[ (2-hidroxietilamino) carbonil-metil]-6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'-[ (2-hidroxietilamino) carbonil-metil]-6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona quiral, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'-[ (2-ciclopropilamino) carbonil-metil]-6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'-[ (2-ciclopropilamino) carbonil-metil]-6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona quiral, (6'R, 3R, 8'S) -2'- (2-aminocarbonil-metil) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7',... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto de la fórmula R

N O

X 5

II

X es -Cl; R1 y R3 son hidrógeno; R4 es 3-cloro-fenilo;

R2 es -fenilo, que está sin sustituir o sustituido una o dos veces por un sustituyente elegido con independencia entre halógeno, -OH, -alquinilo C2-6, -O-alquenilo C2-8, o -alquilo C1-8 y -O-alquilo C1-8, dichos alquilo C1-8 pueden estar sin sustituir o sustituidos una o dos veces por -OH, o -alquenilo C2-8; y R es hidrógeno, o alquilo C1-8, que está sin sustituir o sustituido por

-N- (alquilo C1-8) 2, -O-alquilo C1-8, -O-C (O) -alquilo C1-8, -OH, -NH-C (O) -alquilo C1-8, -C (O) -OH, -C (O) -NH-alquilo C1-8, dicho grupo alquilo está sin sustituir o sustituido una o dos veces por -OH, -C (O) -NH-cicloalquilo C3-6, -C (O) -NH2, -C (O) -NH-piperidinilo, dicho piperidinilo está sin sustituir o sustituido por -S (O) 2-CH3; y sus sales farmacéuticamente aceptables.

2. Un compuesto de la reivindicación 1, elegido entre el grupo formado por: (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -6'- (5-fluor-2-metilfenil) -2'-metil-6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2Hpirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -6'- (5-fluor-2-metilfenil) -2'-metil-6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2Hpirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona quiral, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -6'- (5-fluor-2-metilfenil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -6'- (1-metileno-propil) -2'-metil-6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2H

pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -6'- (1-metileno-propil) -2'-metil-6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2Hpirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona quiral, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona quiral, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'- (3-dimetilaminopropil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3Hindol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'- (2-metoxietil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'

45 (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica y (6'R, 3R, 8'S) -2'- (2-acetoxietil) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7' (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica.

3. Un compuesto de la reivindicación 1, elegido entre el grupo formado por:

50 (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'- (2-hidroxietil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7' (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'- (2-hidroxietil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7' (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona quiral,

(6'R, 3R, 8'S) -2'- (2-acetilaminoetil) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol3, 7'- (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'- (2-hidroxicarbonil-metil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3Hindol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'- (2-fluorcarbonil-metil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3Hindol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'-[ (2-hidroxietilamino) carbonil-metil]-6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'-[ (2-hidroxietilamino) carbonil-metil]-6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona quiral, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'-[ (2-ciclopropilamino) carbonil-metil]-6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'-[ (2-ciclopropilamino) carbonil-metil]-6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona quiral, (6'R, 3R, 8'S) -2'- (2-aminocarbonil-metil) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3Hindol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica y (6'R, 3R, 8'S) -2'- (2-aminocarbonil-metil) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -6'- (1-metileno-propil) -6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3Hindol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica.

4. Un compuesto de la reivindicación 1, elegido entre el grupo formado por: (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'-[ (1-metanosulfonil-piperidin-4-il) aminocarbonil-metil]-6'- (1-metileno-propil) 6', 7', 8', 9'-tetrahidroespiro[3H-indol-3, 7'- (2H-pirido[2, 1-c][1, 2, 4]triazina) ]-2, 3' (1H) -diona racémica, (6'R, 3R, 8'S) -6-cloro-8'- (3-clorofenil) -2'-