Procedimientos para la retirada de dímeros de adaptadores de preparaciones para la secuenciación de ácidos nucleicos.
Un procedimiento para preparar dúplex de ADN diana para su secuenciación,
comprendiendo dicho procedimiento:
(a) proporcionar una pluralidad de adaptadores de secuenciación, en el que cada uno de dichos adaptadores comprende una región dúplex de polinucleótido bicatenario, en el que la región dúplex de polinucleótido bicatenario comprende una porción de una secuencia de reconocimiento para una endonucleasa dependiente de metilo en su extremo, en el que se formará una secuencia de reconocimiento completa para la endonucleasa dependiente de metilo si las regiones dúplex de dos adaptadores se enlazan de forma covalente entre sí para producir un dímero de adaptadores;
(b) enlazar de forma covalente las regiones dúplex de dichos adaptadores de secuenciación a los primer y segundo extremos de una pluralidad de dúplex de ADN diana de extremos romos, produciendo, de este modo, una pluralidad de dúplex de ADN diana enlazados a adaptador con un adaptador de secuenciación enlazado de forma covalente en cada extremo del dúplex de ADN diana; y
(c) retirar los dímeros de adaptadores, si los hay, por digestión con una endonucleasa dependiente de metilo seguido de digestión con una o más exonucleasas.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2017/069308.
Solicitante: F. HOFFMANN-LA ROCHE AG.
Inventor/es: DAVIS,RANDALL W, BIBILLO,ARKADIUSZ.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12Q1/6855 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › Adaptadores de ligadura.
PDF original: ES-2812261_T3.pdf
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