Composición farmacéutica que comprende proteínas tirosina quinasas Src y Yes, junto con un portador farmacéuticamente aceptable.

Composiciones farmacéuticas que comprenden Src y/o Yes y su utilización.

Referencia cruzada a las solicitudes relacionadas La presente invención reivindica prioridad a la patente US nº 09/470.881 presentada el 22 de diciembre de 1999, y nº 09/538.248 presentada el 29 de marzo de 2000, reivindicando ambas prioridad a la solicitud de patente internacional nº PCT/US99/11780, que designa a los Estados Unidos de América y fue presentada el 28 de mayo de 1999, que reivindica prioridad a la solicitud provisional US para la patente nº de serie nº 60/087.220 registrada el 29 de mayo de 1998.

Declaración de los derechos gubernamentales Parte del trabajo dado a conocer se ha respaldado en parte con subvenciones del NIH en nombre de los Estados Unidos de América. Por consiguiente, el gobierno de los Estados Unidos de América puede tener determinados derechos sobre la presente invención.

Campo técnico

La presente invención se refiere en general al ámbito de la medicina y se refiere específicamente a composiciones destinadas a modular e inhibir la permeabilidad vascular (VP) .

Antecedentes La angiogénesis es un proceso de vascularización de los tejidos que implica el crecimiento de nuevos vasos sanguíneos en un tejido y al que se hace asimismo referencia como neovascularización. El proceso está mediado por la infiltración de células endoteliales y células de músculo liso. Se cree que el proceso procede en una de tres formas: los vasos pueden brotar de un vaso preexistente, el nuevo desarrollo de vasos puede originarse a partir de células precursoras (vasculogénesis) , o se pueden ensanchar en diámetro pequeños vasos ya existentes. [Blood et al. Bioch. Biophys. Acta. 1032:89-118 (1990) ]. Para que tenga lugar la angiogénesis, las células endoteliales deben primero degradar y cruzar la membrana basal de los vasos de modo semejante al utilizado por las células tumorales durante la invasión y la generación de metástasis. La angiogénesis generalmente no se produce en los adultos o en los tejidos maduros, aunque si tiene lugar durante la cicatrización y el ciclo de crecimiento del corpus luteum. Ver por ejemplo Moses et al., [Science, 248:1408-1410 (1990) ].

Mientras que la angiogénesis es un proceso importante en el crecimiento neonatal, también es importante en la cicatrización y es un factor en la patogénesis de gran número de patologías clínicas que comprenden la inflamación tisular, artritis, crecimiento tumoral, retinopatía diabética, degeneración macular por neovascularización de la retina, y trastornos semejantes. Estas manifestaciones clínicas asociadas a la angiogénesis se refieren como enfermedades angiogénicas. [Folkman et al., Science, 235:442-447 (1987) ].

Se ha propuesto que la inhibición de la angiogénesis podría ser una terapia de utilidad con el fin de restringir el crecimiento tumoral. Se ha propuesto la inhibición de la angiogénesis mediante (1) la inhibición de la liberación de "moléculas angiogénicas" tales como el bFGF (factor de crecimiento fibroblástico básico) , (2) la neutralización de las moléculas angiogénicas, tal como mediante la utilización de anticuerpos antiºbFGF, (3) la utilización de inhibidores del receptor de la vitronectina avº3 y (4) la inhibición de la respuesta de las células endoteliales a los estímulos angiogénicos. Esta última estrategia ha recibido atención, Folkman et al., [Cancer Biology, 3:89-96 (1992) ], han descrito múltiples inhibidores de la respuesta de las células endoteliales, que comprenden inhibidor de la colágena, inhibidores del reemplazo de la membrana basal, esteroides angiostáticos, inhibidores de la angiogénesis derivados de hongos, factor 4 de las plaquetas, trombospondina, fármacos artríticos tales como la D-penicilinamina y el tiomalato de oro, análogos de la vitamina D3, interferón a y similares, que se pueden utilizar con el fin de inhibir la angiogénesis. Para más inhibidores de la angiogénesis propuestos, [ver Blood et al., Biochem. Biophys. Acta., 1032:89-118 (1990) , Moses et al., Science, 248:1408-1410 (1990) , Ingber et al., Lab. Invest., 59:44-51 (1988) , y las patentes US nº 5.092.885, nº 5.112.946, nº 5.192.744, nº 5.202.352, nº 5.753.230 y nº 5.766.591]. Sin embargo, ninguno de los inhibidores de la angiogénesis descritos en las referencias anteriores implica las proteínas Src.

Se ha informado anteriormente de que la angiogénesis depende de la interacción entre las integrinas vasculares y las proteínas de la matriz extracelular. Brooks et al., [Science, 264:569-571 (1994) ]. Además, se ha informado de que la muerte celular programada (apoptosis) de las células vasculares angiogénicas se inicia mediante la interacción, que se inhibiría mediante ciertos antagonistas de la integrina vascular avº3. [Brooks et al, Cell, 79:1157-1164 (1994) ]. Más recientemente, se ha informado de que la unión de la metaloproteinasa-2 de matriz (MMP-2) al receptor de la vitronectina (avº5) se puede inhibir mediante la utilización de antagonistas de la avº5 inhibiendo así la función enzimática de la proteinasa. [Brooks et al., Cell, 85:683-693 (1996) ]. Las integrinas av se han identificado como componentes importantes de la supervivencia de las células endoteliales en los vasos sanguíneos angiogénicos. Los antagonistas de las integrinas específicos de la integrina av bloquean las sendas angiogénicas inducidas por factores de crecimiento discretos. Por ejemplo, la angiogénesis inducida por el factor de crecimiento vascular endotelial (VEGF) se bloquea mediante los antagonistas de la integrina av 5, mientras que la angiogénesis inducida por el factor de crecimiento fibroblástico básico (bFGF) se bloquea mediante los antagonistas de la integrina av 3.

El sistema vascular cerebral está caracterizado porque presenta una barrera hetamoencefálica muy restrictiva que prohibe la extravasación de pequeñas moléculas en los tejidos cerebrales circundantes. La naturaleza de la barrera hematoencefálica de los mamíferos ha recibido atención específica en los estudios farmacológicos, ya que debido a la elevada restrictividad de la barrera hetamoencefálica, evita rutinariamente el paso de muchos fármacos del sistema vascular al tejido cerebral. La presente invención implica el inesperado descubrimiento de que la VP, tal como se mide mediante el escape vascular de sangre, se puede modular mediante Src o Yes. Además, la VP ha sido asociada a la angiogénesis y otras patologías. El incremento en la permeabilidad vascular inducida por la inflamación está asociado con edema e hinchazón.

La necesidad de actividad de tirosina quinasa Src para la angiogénesis inducida por VEGF, pero no por bFGF, demostró la existencia de una diferencia significativa en la regulación y en las señales de activación entre estas sendas, tanto en los modelos de embrión de pollo como de ratón [Eliceiri et al., Molecular Cell, 4:915-924 (1999) ].

Los cambios en la permeabilidad vascular debidos a las señales angiogénicas de las células tumorales han proporcionado un modelo para examinar las sendas de señalización relacionadas con el cáncer, sin embargo, la permeabilidad vascular debida al daño, la enfermedad u otros traumas de los vasos sanguíneos es la causa principal de pérdida vascular y edema asociada con el daño tisular. Por ejemplo, la enfermedad cerebrovascular asociada con el accidente cerebrovascular (CVA) u otro daño vascular en el cerebro o tejido espinal son las causas más comunes de trastorno neurológico y una de las principales fuentes de discapacidad. Típicamente, el daño del tejido cerebral o espinal en la región de un CVA implica la pérdida vascular y/o el edema. Típicamente, el CVA puede comprender daño causado por isquemia cerebral, interrupción del flujo sanguíneo normal al cerebro; la insuficiencia cerebral debida a perturbaciones transitorias en el flujo; infarto, debido a embolismo o trombosis de las arterias craneales internas o externas; hemorragia y malformaciones arteriovenosas. La embolia isquémica y la hemorragia cerebral pueden ocurrir súbitamente y el impacto del incidente refleja generalmente la zona dañada del cerebro. [ver el Manual Merk, 16ª ed. Capítulo. 123, (1992) ].

Además del CVA, las infecciones o enfermedades del sistema nervioso central (SNC) también pueden afectar los vasos sanguíneos del cerebro y la columna espinal y pueden implicar inflamación y edema, tal como por ejemplo la meningitis bacteriana, encefalitis vírica y la formación de abscesos cerebrales. [ver el Merk Manual, 16ª ed., Capítulo 125, (1992) ]. Los trastornos sistémicos también pueden debilitar... [Seguir leyendo]

1. Composición farmacéutica que comprende proteínas tirosina quinasas Src y Yes, junto con un portador farmacéuticamente aceptable.

2. Composición farmacéutica según la reivindicación 1, en la que dicha proteína Src es Src-A, o presenta en el residuo de aminoácido 527 cualquier residuo de aminoácido excepto tirosina, serina o treonina, o en la que dicha proteína Src es inactiva.

3. Composición farmacéutica según la reivindicación 2, en la que dicha proteína Src inactiva es Src K295M o Src

251.

4. Composición farmacéutica según la reivindicación 1, en la que dicha proteína Yes es una proteína Yes inactiva.

5. Composición farmacéutica que comprende una proteína tirosina quinasa Yes inactiva, o una mezcla de proteínas tirosina quinasas inactivas Src y Yes para su utilización en un procedimiento para modular la permeabilidad vascular en un tejido que padece un estado patológico y que comprende poner en contacto dicho tejido con una cantidad moduladora de la VP terapéuticamente eficaz de dicha composición farmacéutica, en la que el estado patológico es seleccionado de entre el grupo constituido por daños inducidos por apoplejía, crecimiento de tumores, infarto de miocardio, ateroesclerosis, edema cerebral, traumatismo o enfermedad cerebrovascular, artritis reumatoide, retinopatía diabética, artritis, enfermedades inflamatorias, reumatismo articular crónico y psoriasis, restenosis, hemorragia cerebral, traumatismo cerebral y espinal, lesión espinal y cerebral inducida por hipoxia, trastornos inflamatorios del SNC, infecciones víricas o bacterianas del SNC, trastornos autoinmunes, enfermedades con un incremento crónico de la permeabilidad de la barrera hematoencefálica, síndrome de dificultad respiratoria del adulto (SDRA) ; y formación de metástasis.

6. Composición farmacéutica que comprende una proteína tirosina quinasa activa Yes o una mezcla de proteínas tirosina quinasas activas Src y Yes para su utilización en un procedimiento para modular la permeabilidad vascular en un tejido que padece un estado patológico y que comprende poner en contacto dicho tejido con una cantidad moduladora de la VP terapéuticamente eficaz de dicha composición farmacéutica, en la que el estado patológico es seleccionado de entre el grupo constituido por extremidades isquémicas y heridas crónicas.

7. Artículo de fabricación que comprende material de envasado y una composición farmacéutica contenida en dicho material de envasado, en el que dicha composición farmacéutica puede modular la permeabilidad vascular en un tejido que sufre un estado patológico, en el que dicho material de envasado comprende una etiqueta que indica que dicha composición farmacéutica se puede utilizar para el tratamiento de estados patológicos mediante la modulación de la permeabilidad vascular, y en el que dicha composición farmacéutica comprende una proteína Yes y proteína Src tirosina quinasa en un portador farmacéuticamente aceptable.

8. Artículo de fabricación que comprende material de envasado y una composición farmacéutica contenida en dicho material de envasado, en el que dicha composición farmacéutica puede modular la permeabilidad vascular en un tejido que sufre un estado patológico, en el que dicho material de envasado comprende una etiqueta que indica que dicha composición farmacéutica se puede utilizar para el tratamiento de estados patológicos mediante la modulación de la permeabilidad vascular, y en el que dicha composición farmacéutica comprende una proteína tirosina quinasa Yes, en un portador farmacéuticamente aceptable.

9. Composición farmacéutica que comprende un inhibidor de tirosina quinasas de la familia Src para su utilización en un procedimiento para mejorar un daño tisular relacionado con la fuga vascular o el edema que comprende poner en contacto dicho tejido con una cantidad moduladora de la permeabilidad vascular de dicha composición farmacéutica, en la que el inhibidor de la tirosina quinasa de la familia Src es seleccionado de entre el grupo constituido por una proteína Yes inactiva, una mezcla de una proteína Src inactiva y una proteína Yes inactiva, y una mezcla de una proteína Yes inactiva y/o una proteína Src inactiva junto con un inhibidor químico seleccionado de entre PP1, PP2, PD173955, AGL1872, PD162531, radicicol R2146, y geldanamicina.

10. Artículo de fabricación que comprende material de envasado y una composición farmacéutica contenida en dicho material de envasado, en el que dicha composición farmacéutica puede modular el aumento de la permeabilidad vascular en un tejido que sufre un estado patológico, en el que dicho material de envasado comprende una etiqueta que indica que dicha composición farmacéutica se puede utilizar para el tratamiento de estados patológicos asociados a edema o fuga vascular, y en el que dicha composición farmacéutica comprende un inhibidor de tirosina quinasa de la familia Src y un portador farmacéuticamente aceptable para el mismo, en el que el inhibidor de la tirosina quinasa de la familia Src es seleccionado de entre el grupo constituido por una proteína Yes inactiva, una mezcla de una proteína Src inactiva y una proteína Yes inactiva, y una mezcla de una proteína Yes inactiva y/o una proteína Src inactiva junto con inhibidor químico seleccionado de entre PP1, PP2, PD173955, AGL1872, PD162531, radicicol R2146, y geldanamicina.