Anticuerpo anti-IFNy monoclonal completamente humano aislado o fragmento del mismo,

comprendiendo dicho anticuerpo:

(a) una región CDR1 de VH que comprende la secuencia de aminoácidos SYAMS (SEQ ID NO:3);

(b) una región CDR2 de VH que comprende la secuencia de aminoácidos AISGSGGSTYYADSVKG (SEQ ID NO:4), y

(c) una región CDR3 de VH que comprende la secuencia de aminoácidos DGSSGWYVPHWFDP (SEQ ID NO:5);

(d) una región CDR1 de VL que comprende la secuencia de aminoácidos TRSSGSIASNYVQ (SEQ ID NO:8);

(e) una región CDR2 de VL que comprende la secuencia de aminoácidos EDNQRPS (SEQ ID NO:9); y

(f) una región CDR3 de VL que comprende la secuencia de aminoácidos QSYDGSNRWM (SEQ ID NO:10); y

uniéndose dicho anticuerpo al IFNy humano.

Anticuerpos anti-interferón gamma humanos y métodos de uso de los mismos

Campo de la invención

Esta invención se refiere en general a anticuerpos anti-interferón gamma completamente humanos así como a métodos para el uso de los mismos.

Antecedentes de la invención

El interferón gamma humano (IFNy, IFN-gamma) es una linfocina producida por linfocitos-T activados y células citotóxicas naturales. Manifiesta actividades antiproliferativas, antivirales e inmunomoduladoras y se une al IFNy-R, un receptor heterodimérico en la mayoría de las células primarias del sistema inmunitario, y desencadena una cascada de eventos que llevan a la inflamación. Se sabe que la actividad antiviral e inmunomoduladora del IFNy tiene efectos beneficiosos en varios estados clínicos. Sin embargo, hay muchos entornos clínicos en los que se sabe que la actividad del IFNy tiene efectos perjudiciales. Por ejemplo, las enfermedades autoinmunitarias están asociadas con niveles altos de IFNy en la sangre y tejido enfermo de pacientes autoinmunes. La actividad del IFNy también se ha relacionado con estados patológicos tales como caquexia y choque septicémico.

El documento WO2004/035747 da a conocer anticuerpos humanos que inhiben la actividad del IFNy.

Por consiguiente, existe la necesidad de terapias que se dirijan a la actividad del IFNy.

Sumario de la invención

La presente invención proporciona anticuerpos monoclonales completamente humanos dirigidos específicamente contra el interferón gamma (IFNy, también denominado en el presente documento IFN-gamma) como se define en las reivindicaciones. Los anticuerpos monoclonales incluyen NI-0501; AC1.2R3P2_A6 (también denominado en el presente documento "A6") ; AC1.2R3P2_B4 (también denominado en el presente documento "B4") ; AD1.4R4P1_B9 (también denominado en el presente documento "B9") ; AD1.4R4P2_C9 (también denominado en el presente documento "C9") ; AC1.4R4P2_C10 (también denominado en el presente documento "C10") ; AC1.2R3P7_D3 (también denominado en el presente documento "D3") ; AD1.2R2P2_D6 (también denominado en el presente documento "D6") ; AC1.2R2P2_D8 (también denominado en el presente documento "D8") ; AD1.3R3P6_E1 (también denominado en el presente documento "E1") ; AD1.3R3P5_F8 (también denominado en el presente documento "F8") ; AD1.3R3P6_F9 (también denominado en el presente documento "F9") ; AD1.4R4P2_G7 (también denominado en el presente documento "G7") ; AD1.1R3P3_G9 (también denominado en el presente documento "G9") ; y AD1.3R3P6_G10 (también denominado en el presente documento "G10") descritos en el presente documento.

Un anticuerpo anti-lFNyhu contiene una región variable de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NOS: 2, 12, 20, 28, 36, 42, 51, 58, 63, 68, 75, 81, 88, 94 o 103 y una región variable de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NOS: 7, 15, 23, 31, 38, 47, 54, 60, 66, 71, 78, 83, 91, 96 o 105. Preferiblemente, las tres regiones determinantes de complementariedad (CDR) de cadena pesada incluyen una secuencia de aminoácidos tiene una identidad de al menos el 90%, 92%, 95%, 97% 98%, 99% o superior con una secuencia seleccionada del grupo que consiste en SYAMS (SEQ ID NO:3) ; AISGSGGSTYYADSVKG (SEQ ID NO:4) ; DGSSGWYVPHWF DP (SEQ ID NO:5) ; DHSSGWYVISGMDV (SEQ ID NO:13) ; DLTVGGPWYYFDY (SEQ ID NO:21) ; DGWNALGWLES (SEQ ID NO:29) ; SNAMS (SEQ ID NO:43) ; TLTGSGGTAYYADSVEG (SEQ ID NO:44) ; GTELVGGGLDN (SEQ ID NO:45) ; RSFDSGGSFEY (SEQ ID NO:64) ; VGSWYLEDFDI (SEQ ID NO:69) ; GGNYGDYFDYFDY (SEQ ID NO:76) ; y DFWVITSGNDY (SEQ ID NO:89) ; y una cadena ligera con tres CDR que incluyen una secuencia de aminoácidos con una identidad de al menos el 90%, 92%, 95%, 97% 98%, 99% o superior con una secuencia seleccionada del grupo que consiste en la secuencia de aminoácidos de TRSSGSIASNYVQ (SEQ ID NO:8) ; EDNQRPS (SEQ ID NO:9) ; QSYDGSNRWM (SEQ ID NO:10) ; TRSSGSIASNYVQ (SEQ ID NO:16) ; EDNQRPS (SEQ ID NO:17) ; QSNDSDNVV (SEQ ID NO:18) ; DDDQRPS (SEQ ID NO:25) ; QSYDSSNVV (SEQ ID NO:26) ; TRSGGSIGSYYVQ (SEQ ID NO:32) ; DDKKRPS (SEQ ID NO:33) ; QSYDSNNLVV (SEQ ID NO:34) ; TRSSGTIASNYVQ (SEQ ID NO:39) ; QSYDNSNHWV (SEQ ID NO:40) ; TGSGGSIATNYVQ (SEQ ID NO:48) ; QSYDSDNHHVV (SEQ ID NO:49) ; TGSSGSIASNYVQ (SEQ ID NO:55) ; QSYDSSNQEVV (SEQ ID NO:56) ; QSYDSNNFWV (SEQ ID NO:61) ; TRSSGSIASNYVH (SEQ ID NO:72) ; QSSDTTYHGGVV (SEQ ID NO:73) ; QSYEGF (SEQ ID NO:79) ; TGRNGNIASNYVQ (SEQ ID NO:84) ; EDTQRPS (SEQ ID NO:85) ; QSSDSNRVL (SEQ ID NO:86) ; QSFDSTNLVV (SEQ ID NO:92) ; AGSSGSIASNYVQ (SEQ ID NO:97) ; QSYSYNNQVV (SEQ ID NO:98) ; TRSSGSIVSNYVQ (SEQ ID NO:106) ; EDNRRPS (SEQ ID NO:107) . El anticuerpo se une al IFNy.

Los anticuerpos anti-lFNyhu incluyen una región CDR1 de VH que comprende la secuencia de aminoácidos SYAMS (SEQ ID NO: 3) o SNAMS (SEQ ID NO:43) ; una región CDR2 de VH que comprende la secuencia de aminoácidos AISGSGGSTYYADSVKG (SEQ ID NO:4) o TLTGSGGTAYYADSVEG (SEQ ID NO:44) , y una región CDR3 de VH

que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en DGSSGWYVPHWFDP (SEQ ID NO:5) ; DHSSGWYVISGMDV (SEQ ID NO:13) ; DLTVGGPWYYFDY (SEQ ID NO:21) ; DGWNALGWLES (SEQ ID NO:29) ; GTELVGGGLDN (SEQ ID NO:45) ; RSFDSGGSFEY (SEQ ID NO:64) ; VGSWYLEDFDI (SEQ ID NO:69) ; GGNYGDYFDYFDY (SEQ ID NO:76) ; y DFWVITSGNDY (SEQ ID NO:89) .

Los anticuerpos anti-lFNyhu incluyen una región CDR1 de VL que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en TRSSGSIASNYVQ (SEQ ID NO:8) ; TRSSGSIASNYVQ (SEQ ID NO:16) ; TRSGGSIGSYYVQ (SEQ ID NO:32) ; TRSSGTIASNYVQ (SEQ ID NO:39) ; TGSGGSIATNYVQ (SEQ ID NO:48) ; TGSSGSIASNYVQ (SEQ ID NO: 55) ; TRSSGSIASNYVH (SEQ ID NO:72) ; TGRNGNIASNYVQ (SEQ ID NO:84) ; AGSSGSIASNYVQ (SEQ ID NO:97) y TRSSGSIVSNYVQ (SEQ ID NO:106) ; una región CDR2 de VL que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en EDNQRPS (SEQ ID NO:9) ; EDNQRPS (SEQ ID NO:17) ; DDDQRPS (SEQ ID NO:25) ; DDKKRPS (SEQ ID NO:33) ; EDTQRPS (SEQ ID NO:85) y EDNRRPS (SEQ ID NO:107) ; y una región CDR3 de VL que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en QSYDGSNRWM (SEQ ID NO: 10) ; QSNDSDNVV (SEQ ID NO:18) ; QSYDSSNVV (SEQ ID NO:26) ; QSYDSNNLVV (SEQ ID NO:34) ; QSYDNSNHWV (SEQ ID NO:40) ; QSYDSDNHHVV (SEQ ID NO:49) ; QSYDSSNQEVV (SEQ ID NO:56) ; QSYDSNNFWV (SEQ ID NO:61) ; QSSDTTYHGGVV (SEQ ID NO:73) ; QSYEGF (SEQ ID NO:79) ; QSSDSNRVL (SEQ ID NO:86) ; QSFDSTNLVV (SEQ ID NO:92) ; y QSYSYNNQVV (SEQ ID NO:98) .

Los anticuerpos anti-lFNyhu incluyen, por ejemplo, una región CDR1 de VH que comprende la secuencia de aminoácidos SYAMS (SEQ ID NO:3) o SNAMS (SEQ ID NO:43) ; una región CDR2 de VH que comprende la secuencia de aminoácidos AISGSGGSTYYADSVKG (SEQ ID NO:4) o TLTGSGGTAYYADSVEG (SEQ ID NO:44) ; una región CDR3 de VH que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en DGSSGWYVPHWFDP (SEQ ID NO:5) ; DHSSGWYVISGMDV (SEQ ID NO:13) ; DLTVGGPWYYFDY (SEQ ID NO:21) ; DGWNALGWLES (SEQ ID NO:29) ; GTELVGGGLDN (SEQ ID NO: 45) ; RSFDSGGSFEY (SEQ ID NO:64) ; VGSWYLEDFDI (SEQ ID NO:69) ; GGNYGDYFDYFDY (SEQ ID NO:76) ; y DFWVITSGNDY (SEQ ID NO:89) ; una región CDR1 de VL que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en TRSSGSIASNYVQ (SEQ ID NO:8) ; TRSSGSIASNYVQ (SEQ ID NO:16) ; TRSGGSIGSYYVQ (SEQ ID NO:32) ; TRSSGTIASNYVQ (SEQ ID NO:39) ; TGSGGSIATNYVQ (SEQ ID NO:48) ; TGSSGSIASNYVQ (SEQ ID NO: 55) ; TRSSGSIASNYVH (SEQ ID NO:72) ; TGRNGNIASNYVQ (SEQ ID NO:94) ; AGSSGSIASNYVQ (SEQ ID NO:97) y TRSSGSIVSNYVQ (SEQ ID NO:106) ; una región CDR2 de VL que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en EDNQRPS (SEQ ID NO:9) ; EDNQRPS (SEQ ID NO:17) ; DDDQRPS (SEQ ID NO:25) ; DDKKRPS (SEQ ID NO:33) ; EDTQRPS (SEQ ID NO:85) y EDNRRPS (SEQ ID NO:107) ; y una región CDR3 de VL que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en QSYDGSNRWM (SEQ ID NO:10) ; QSNDSDNVV (SEQ ID NO:18) ; QSYDSSNVV (SEQ ID NO:26) ; QSYDSNNLVV (SEQ ID NO:34) ; QSYDNSNHWV (SEQ ID NO:40) ; QSYDSDNHHVV (SEQ ID NO:49) ; QSYDSSNQEVV (SEQ ID NO:56) ; QSYDSNNFWV (SEQ ID NO:61) ; QSSDTTYHGGVV (SEQ ID NO:73) ; QSYEGF (SEQ ID NO:79) ; QSSDSNRVL (SEQ ID NO:86) ; QSFDSTNLVV (SEQ ID NO:92) ; y QSYSYNNQVV (SEQ ID NO:98) .

La cadena pesada de un anticuerpo anti-lFNyhu se deriva de un gen V (variable) de línea germinal tal como, por ejemplo, el gen de línea germinal DP47 (IGHV3-23) (n.º de registro de GenBank M99660) o una secuencia de ácido nucleico homóloga a la secuencia del gen humano de línea germinal DP47. La secuencia de ácido nucleico para el gen de línea... [Seguir leyendo]

1. Anticuerpo anti-IFNy monoclonal completamente humano aislado o fragmento del mismo, comprendiendo dicho anticuerpo:

(a) una región CDR1 de VH que comprende la secuencia de aminoácidos SYAMS (SEQ ID NO:3) ;

(b) una región CDR2 de VH que comprende la secuencia de aminoácidos AISGSGGSTYYADSVKG (SEQ ID NO:4) , y

(c) una región CDR3 de VH que comprende la secuencia de aminoácidos DGSSGWYVPHWFDP (SEQ ID NO:5) ;

(d) una región CDR1 de VL que comprende la secuencia de aminoácidos TRSSGSIASNYVQ (SEQ ID NO:8) ;

(e) una región CDR2 de VL que comprende la secuencia de aminoácidos EDNQRPS (SEQ ID NO:9) ; y

(f) una región CDR3 de VL que comprende la secuencia de aminoácidos QSYDGSNRWM (SEQ ID NO:10) ; y uniéndose dicho anticuerpo al IFNy humano.

2. Anticuerpo según la reivindicación 1, siendo dicho anticuerpo un isotipo de IgG.

3. Anticuerpo según la reivindicación 1, comprendiendo dicho anticuerpo una región variable de cadena pesada que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2 y una región variable de cadena ligera que comprende la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 7.

4. Composición farmacéutica que comprende un anticuerpo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 y un vehículo.

5. Uso de un anticuerpo anti-IFNy en la fabricación de un medicamento para aliviar un síntoma de una enfermedad autoinmunitaria o un trastorno inflamatorio en un sujeto que necesita el mismo, en el que dicho anticuerpo es un anticuerpo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, y en el que dicho anticuerpo está presente en dicho medicamento en una cantidad suficiente para aliviar el síntoma de la enfermedad autoinmunitaria o del trastorno inflamatorio en el sujeto.

6. Uso según la reivindicación 5, en el que dicho sujeto es un ser humano.

7. Uso según la reivindicación 5, en el que dicha enfermedad autoinmunitaria o dicho trastorno inflamatorio se selecciona del grupo que consiste en enfermedad de Crohn, lupus eritematoso sistémico, psoriasis, artritis reumatoide, vasculitis, dermatitis atópica y esclerosis múltiple secundaria progresiva.

8. Uso según la reivindicación 5, en el que dicho medicamento se formula para administración intravenosa.

9. Uso según la reivindicación 5, en el que dicho anticuerpo se administra conjuntamente con un segundo agente seleccionado del grupo que consiste en:

(a) una anticitocina que reconoce una o más citocinas seleccionadas de interleucina 1 (IL-1) , IL-2, IL-4, IL-6, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, IL-20, IL-21, IL-22, IL-23, IL-27 e IL-31;

(b) un reactivo antiquimiocina que reconoce una o más citocinas seleccionadas de IL-1, IL-2, IL-4, IL-6, IL12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, IL-20, IL-21, IL-22, IL-23, IL-27 e IL-31; y

(c) una quimiocina seleccionada de MIP1 alfa, MIP1 beta, RANTES, MCP1, IP-10, ITAC, MIG, SDF y fractalcina.

10. Uso de un anticuerpo anti-IFNy en la fabricación de un medicamento para reducir la expresión del CMH clase II en una célula, en el que dicho anticuerpo anti-IFNy es un anticuerpo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que dicho medicamento se formula para entrar en contacto con una célula, y en el que dicho anticuerpo anti-IFNy está presente en dicho medicamento en una cantidad suficiente para reducir la expresión del CMH clase II en dicha célula.

11. Uso según la reivindicación 10, en el que dicha célula es una célula de melanoma humano.

12. Uso según la reivindicación 10, en el que dicha célula se pone en contacto con un segundo agente seleccionado del grupo que consiste en:

(a) una anticitocina que reconoce una o más citocinas seleccionadas de interleucina 1 (IL-1) , IL-2, IL-4, IL-6, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, IL-20, IL-21, IL-22, IL-23, IL-27 e IL-31;

(b) un reactivo antiquimiocina que reconoce una o más citocinas seleccionadas de IL-1, IL-2, IL-4, IL-6, IL12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, IL-20, IL-21, IL-22, IL-23, IL-27 e IL-31; y

(c) una quimiocina seleccionada de MIP1 alfa, MIP1 beta, RANTES, MCP1, IP-10, ITAC, MIG, SDF y fractalcina.

13. Anticuerpo anti-IFNy para su uso en un método para aliviar un síntoma de una enfermedad autoinmunitaria

o un trastorno inflamatorio en un sujeto que necesita el mismo, siendo dicho anticuerpo un anticuerpo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3.

14. Anticuerpo según la reivindicación 13 para su uso en el método según la reivindicación 13, en el que dicho sujeto es un ser humano.

15. Anticuerpo según la reivindicación 13 para su uso en el método según la reivindicación 13, en el que dicha enfermedad autoinmunitaria o dicho trastorno inflamatorio se selecciona del grupo que consiste en enfermedad de Crohn, lupus eritematoso sistémico, psoriasis, artritis reumatoide, vasculitis, dermatitis atópica y esclerosis múltiple secundaria progresiva.

16. Anticuerpo según la reivindicación 13 para su uso en el método según la reivindicación 13, administrándose dicho anticuerpo por vía intravenosa.

17. Anticuerpo según la reivindicación 13 para su uso en el método según la reivindicación 13, administrándose conjuntamente dicho anticuerpo con un segundo agente seleccionado del grupo que consiste en:

(a) una anticitocina que reconoce una o más citocinas seleccionadas de interleucina 1 (IL-1) , IL-2, IL-4, IL-6, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, IL-20, IL-21, IL-22, IL-23, IL-27 e IL-31;

(b) un reactivo antiquimiocina que reconoce una o más citocinas seleccionadas de IL-1, IL-2, IL-4, IL-6, IL12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, IL-20, IL-21, IL-22, IL-23, IL-27 e IL-31; y

(c) una quimiocina seleccionada de MIP1 alfa, MIP1 beta, RANTES, MCP1, IP-10, ITAC, MIG, SDF y fractalcina.

18. Anticuerpo anti-IFNy para su uso en un método para reducir la expresión del CMH clase II en una célula, siendo dicho anticuerpo anti-IFNy un anticuerpo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, formulándose dicho anticuerpo anti-IFNy para entrar en contacto con una célula en una cantidad suficiente para reducir la expresión del CMH clase II en dicha célula.

19. Anticuerpo anti-IFNy según la reivindicación 18 para su uso en el método según la reivindicación 18, en el que dicha célula es una célula de melanoma humano.

20. Anticuerpo anti-IFNy según la reivindicación 18 para su uso en el método según la reivindicación 18, en el que dicha célula se pone en contacto con un segundo agente seleccionado del grupo que consiste en:

(a) una anticitocina que reconoce una o más citocinas seleccionadas de interleucina 1 (IL-1) , IL-2, IL-4, IL-6, IL-12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, IL-20, IL-21, IL-22, IL-23, IL-27 e IL-31;

(b) un reactivo antiquimiocina que reconoce una o más citocinas seleccionadas de IL-1, IL-2, IL-4, IL-6, IL12, IL-13, IL-15, IL-17, IL-18, IL-20, IL-21, IL-22, IL-23, IL-27 e IL-31; y

(c) una quimiocina seleccionada de MIP1 alfa, MIP1 beta, RANTES, MCP1, IP-10, ITAC, MIG, SDF y fractalcina.