VACUNAS MULTIVALENTES CANINAS CONTRA LEPTOSPIRA BRATISLAVA Y OTROS PATÓGENOS.

Vacunas multivalentes caninas contra Leptospira bratislava y otros patógenos Campo de la invención La presente invención se refiere a vacunas que contienen Leptospira bratislava y al uso de las mismas para proteger a l os p erros contra i nfecciones causadas por Leptospira bratislava. La pr esente invención t ambién se r efiere a vacunas de combinación que contienen Leptospira bratislava y uno o más antígenos de otro patógeno canino, tal como el virus del moquillo canino (CD), el adenovirus canino de tipo 2 (CAV-2), el virus de la parainfluenza canina (CPI), e l co ronavirus ca nino (C CV), e l p arvovirus ca nino (C PV), Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira icterohaemorrhagiae o Leptospira pomona. La pr esente i nvención se r efiere ad icionalmente a u na combinación de vacunas de dichos antígenos sin Leptospira Bratislava. También se proporcionan procedimientos para proteger a los perros contra enfermedades producidas por patógenos caninos usando las vacunas de combinación. Antecedentes de la invención El actual producto de vacuna canina contra Bordetella bronchiseptica disponible comercialmente está compuesto por una bacterina de células enteras de Bordetella bronchiseptica inactivada no adyuvada. Dicha bacterina de células enteras puede producir reacciones posvacunación relacionadas con las proteínas celulares. La proteína p68 de B. bronchiseptica es antigénicamente similar a la proteína de membrana externa (PME) de B. pertussis y a la PME de B. parapertussis (Shahin y col., "Characterization of the Protective Capacity and Immunogenicity of the 69-kD Outer Membrane Protein of Bordetella pertussis", J. Exp. Med., 171: 63-73, 1990). Se ha demostrado una función protectora de esta PME para ratones (Shahin y col., supra; Novotny y col., "Biologic and Protective Properties of the 69-kD O uter M embrane P rotein of B ordetella per tussis: A N ovel F ormulation f or a A cellular P ertussis vaccine", J. Infect. Dis. 16 4:114-22, 1 991), se res humanos (He y c ol., " Protective R ole of I mmunoglobulin G A ntibodies to Filamentous Hemagglutinin and P ertactin of B ordetella per tussis in B ordetella par apertussis Infection", E ur. J Clin Microbiol Infect Dis. 10:793-798, 1996) y cerdos (Kobisch y col., "Identification of a 6 8-Kilodalton Outer Membrane Protein as the Major Protective Antigen of Bordetella bronchiseptica by Using Specific-Pathogen-Free Piglets", Infect. Immun. 58(2):352-357, 1990). El C D es una enf ermedad ví rica uni versal co n m anifestaciones variables que t iene u na m ortalidad el evada. Aproximadamente el 50 % d e l os perros no va cunados no i nmunes infectados con el virus CD d esarrolla si gnos clínicos y aproximadamente el 90 % de dichos perros muere. La hepatitis canina infecciosa o ICH, causada por el adenovirus canino de tipo 1 (CAV-1) es una enfermedad vírica universal, en ocasiones mortal, de perros que se caracteriza por lesiones hepáticas y endoteliales generalizadas. El CAV-2 produce enfermedad respiratoria, que, en los casos graves, puede incluir neumonía y bronconeumonía. El CPI es una frecuente enfermedad vírica de las vías respiratorias superiores. La CPI sin complicaciones puede ser leve o subclínica, en la que los signos se convierten en más graves si existe una infección concurrente con otros patógenos respiratorios. La infección por CPV tiene como resultado una enfermedad entérica que se caracteriza por un inicio repentino de vómitos y diarrea, a menudo hemorrágica. Habitualmente los signos clínicos se acompañan de leucopenia. Puede afectar a perros susceptibles de cualquier edad, pero la mortalidad es mayor en los cachorros. En los cachorros de 4-12 se manas de eda d, el C PV pued e pr oducir, en ocasiones, m iocarditis que puede d ar co mo r esultado insuficiencia c ardíaca d espués de una e nfermedad breve e i nadvertida. T ras la infección, m uchos perros son resistentes a la enfermedad durante un año o más. De forma similar, las perras seropositivas pueden transmitir a sus cachorros anticuerpos contra el CPV que pueden interferir en la inmunización activa de los cachorros hasta las 16 semanas de edad. El C CV t ambién p roduce enfermedad e ntérica e n p erros su sceptibles de t odas las edades en t odo el m undo. E l virus, altamente contagioso, se transmite principalmente mediante contacto directo con heces infecciosas y puede producir enteritis clínica en un plazo de 1-4 días desde la exposición. La gravedad de la enfermedad se puede agravar por l a i nfección co ncurrente c on otros agentes. Los principales signos de i nfección p or C CV i ncluyen anorexia, vómitos y diarrea. La frecuencia de los vómitos suele disminuir en uno o dos días desde el inicio de la diarrea, per o l a di arrea puede e xtenderse a l o l argo de l a i nfección y l as heces en ocasiones pueden co ntener rastros de sa ngre. C on la i nfección por C CV, l a m ayoría de l os perros permanecen a febriles y en l os casos sin complicaciones no se observa leucopenia. La leptospirosis se produce en perros de todas las edades, generalmente con una amplia gama de signos clínicos y nefritis crónica tras la infección aguda. Se han desarrollado algunas vacunas de combinación, incluidas las comercializadas con la marca Vanguard®. El documento W O 200 4/067031 d escribe v acunas de co mbinación q ue pr otegen a l os perros contra Bordetella bronchiseptica y uno o más de otros patógenos caninos, tales como el virus CD, el CAV-2, el virus CPI, CPV, CCV y 2   especies de Leptospira tales co mo L. bratislava, L. canicola, L. grippotyphosa, L icterohaemorrhagiae and L. pomona. N o o bstante, no h a habi do ni nguna va cuna de combinación e ficaz que co mprenda L. Bratislava contra estos otros p atógenos caninos pero si n Bordetella bronchiseptica. U n problema e n el d esarrollo d e va cunas de combinación implica interferencia en la eficacia, a saber un fallo de uno o más antígenos en una composición de combinación para m antener o co nseguir eficacia por la pr esencia de los dem ás antígenos en la composición. S e cree qu e es un r esultado de l a i nterferencia co n u n ant ígeno e n l a c omposición administrada a un h uésped, po r ejemplo un perro, en la respuesta inmunológica, antigénica de anticuerpo o protectora, tal como la inducida por el antígeno en el huésped debido a los otros antígenos presentes en la composición. No obstante, para otros huéspedes, tales como gatos, se conocen vacunas de combinación. Se cree que la interferencia de la eficacia en perros se debe a alguna peculiaridad del sistema biológico canino o debido a la reacción de los antígenos con el sistema biológico canino. Por tanto, existe la necesidad de desarrollar una vacuna de combinación adecuada para administrar a perros contra Leptospira bratislava y uno o más patógenos caninos distintos, que no exhiba interferencia en la eficacia en caninos sin Bordetella bronchiseptica. Sería todavía más ventajoso si dichas vacunas de combinación son seguras para administrar a los cachorros y proporcionar protección a largo plazo. Sumario de la invención La presente invención pr oporciona v acunas y procedimientos p ara proteger a l os p erros contra enfermedades causadas por patógenos caninos. La presente invención proporciona vacunas contra Leptospira bratislava adecuadas para la administración a perros y capaces de proteger a los perros contra enfermedades causadas por Leptospira bratislava. Dichas vacunas incluyen una preparación de células de Leptospira bratislava y un vehículo veterinario aceptable, tal como un adyuvante. En el presente documento t ambién se describen pr ocedimientos de proteger a l os perros contra e nfermedades causadas por Leptospira bratislava administrando a un perro una vacuna que incluye una preparación de células de Leptospira bratislava y un vehículo veterinario aceptable, tal como un adyuvante. Una combinación preferida incluye dos o más antígenos de patógenos caninos capaces de inducir una respuesta inmunitaria pr otectora en p erros contra l a enf ermedad ca usada por dicho(s) pat ógeno(s). D ichos pat ógenos se pueden seleccionar del virus del moquillo canino (CD), el adenovirus de tipo 2 (CAV-2), el virus de la parainfluenza canina (CPI), el parvovirus canino (CPV), el coronavirus canino (CCV), el herpesvirus canino, el virus de la rabia, Leptospira bratislava, Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira icterohaemorrhagiae, Leptospira pomona, Leptospira hardjobovis, Porphyromonas spp., Bacteriodes spp., Leishmania spp., Borrelia spp., Ehrlichia spp., Mycoplasma spp. y Microsporum canis. Otra vacuna de combinación preferida incluye cepas atenuadas del virus del moquillo canino (CD), el adenovirus de tipo 2 (CAV-2), el virus de la parainfluenza canina (CPI) y el parvovirus canino (CPV); y una preparación inactivada de una c epa del co ronavirus canino ( CCV); y un... [Seguir leyendo]

1. Una composición de vacuna para usar en la inmunización de perros contra la infección causada por Leptospira bratislava, que comprende una preparación celular de Leptospira de Leptospira bratislava y un vehículo. 2. La composición de vacuna de la reivindicación 1, en la que dicha preparación celular de Leptospira comprende además una p reparación ce lular d e a l m enos uno d e Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira icterohaemorrhagiae o Leptospira pomona, en la que la cantidad de cada cepa de Leptospira en la composición de vacuna está en el intervalo de aproximadamente 100-3500 unidades nefelométricas por dosis de vacuna. 3. Una vacuna de composición para usar en la inmunización de perros contra patógenos caninos, que comprende la composición de la reivindicación 2 y que además comprende una cepa atenuada del virus del moquillo canino (CD), una cepa atenuada del adenovirus canino de tipo 2 (CAV-2), una cepa atenuada del virus de la parainfluenza canina (CPI), una cepa atenuada del parvovirus canino (CPV) y un vehículo, en la que la cantidad de cada cepa atenuada de virus en dicha vacuna está en el intervalo de 10 2 a 109 de TCDI50 por dosis. 4. La vacuna de combinación de la reivindicación 3, que comprende además una preparación de células parciales o enteras inactivadas de una cepa del coronavirus canino (CCV). 5. Una vacuna de composición para su uso en la inmunización de perros contra patógenos caninos, que comprende una preparación ce lular de L eptospira de Leptospira canicola, Leptospira grippotyphosa, Leptospira icterohaemorrhagiae, y Leptospira pomona y qu e ad emás co mprende u na ce pa at enuada d el vi rus del m oquillo canino (CD), una cepa atenuada del adenovirus canino de tipo 2 (CAV-2), una cepa atenuada del virus de la parainfluenza canina (CPI), una cepa atenuada del parvovirus canino (CPV) y un vehículo. 6. La vacuna de combinación de la reivindicación 5, que comprende además una preparación de células parciales o enteras inactivadas de una cepa del coronavirus canino (CCV). 7. La co mposición de va cuna de c ualquiera de las reivindicaciones 1, 5 y 6, en la q ue l a ca ntidad de ca da d e Leptospira está en el intervalo de aproximadamente 100 a 3500 unidades nefelométricas por dosis. 8. La c omposición de va cuna d e cu alquiera d e l as reivindicaciones 1 a 6, en la que l a c antidad de c ada d e Leptospira está en el intervalo de aproximadamente 200 a 2000 unidades nefelométricas por dosis. 9. La vacuna de combinación de la reivindicación 5 o la reivindicación 6, en la que la cantidad de dicha cepa de virus CD en dicha vacuna está en el intervalo de 10 2 a 10 9 TCID50 por dosis. 10. La vacuna de combinación de la reivindicación 5 o la reivindicación 6, en la que la cantidad de dicha cepa de virus CAV-2 en dicha vacuna está en el intervalo de 10 2 a 10 9 TCID50 por dosis. 11. La vacuna de combinación de la reivindicación 5 o la reivindicación 6, en la que la cantidad de dicha cepa de virus CPI en dicha vacuna está en el intervalo de 10 2 a 10 9 TCID50 por dosis. 12. L a v acuna de co mbinación de l a r eivindicación 5 o la r eivindicación 6, en l a q ue l a ca ntidad de d icha ce pa atenuada de CPV en dicha vacuna está en el intervalo de 10 2 a 10 9 TCID50 por dosis. 13. La vacuna de combinación de cualquiera de las reivindicaciones 4 y 6, en la que la cantidad de la preparación celular de dicha cepa de CCV en dicha vacuna es de al menos aproximadamente 100 unidades relativas por dosis. 14. La co mposición de va cuna de c ualquiera de l as reivindicaciones 1 a 6, en l a que e l ve hículo co mprende saponina y un tensioactivo. 15. La composición de vacuna de la reivindicación 14, en la que la saponina es Quil A y el tensioactivo es colesterol. 16. La composición de vacuna de la reivindicación 15, en la que la cantidad de Quil A está en el intervalo de 1 a 1000 µg por dosis y la cantidad de colesterol está en el intervalo de 1 a 1000 µg por dosis. 17. La co mposición de va cuna de c ualquiera de l as reivindicaciones 1 a 6, en l a que e l ve hículo co mprende hidróxido de aluminio. 18. La c omposición de v acuna de cu alquiera d e l as reivindicaciones 1 a 6, en la que dicha co mposición s e administra mediante una vía intravenosa, intranasal, oral, intramuscular o subcutánea. 19. La composición de vacuna de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en la que dicho perro recibe dicha composición dos o tres veces con un intervalo de aproximadamente 2-4 semanas entre administraciones. 58   Figura 1: Resumen de la media geométrica de los títulos finales de P68 ELISA en perros no vacunados y vacunados con p68 de Bordetella (15 µg/dosis) en exposición en aerosol a Bordetella Bronchiseptica 59   Figura 2: Resumen de los títulos de amiloide A sérico en perros tras la exposición en aerosol a Bordetella Bronchiseptica   Figura 3. Resumen de la media geométrica de los títulos finales de p68 ELISA en perros no vacunados y vacunados con p68 de Bordetella tras la vacunación y la exposición en aerosol con Bordetella Bronchiseptica 61   Figura 4. Resumen de los títulos de amiloide A sérico en perros tras la exposición en aerosol a Bordetella bronchiseptica 62   63   64