USO DE UN AGENTE MODULADOR QUE ACTÚA SOBRE UN PRECURSOR DE FACTOR DE CRECIMIENTO CON EL FIN DE INHIBIR EL TRATAMIENTO DEL PRECURSOR DE FACTOR DE CRECIMIENTO.

Uso de un agente modulador que actúa sobre un precursor de factor de crecimiento con el fin de inhibir el tratamiento del precursor de factor de crecimiento. El presente invento se refiere al uso de un agente modulador que actúa sobre un precursor de factor de crecimiento, concretamente el HB-EGF para la producción de un medicamento destinado al tratamiento de un cáncer. La diafonía entre diferentes sistemas de señalización permite la integración de una gran diversidad de estímulos que una célula recibe en situaciones fisiológicas variables. La transactivación de trayectorias de señalización dependientes de receptores de EGF después de una estimulación de receptores acoplados a proteínas G (GPCR acrónimo de G protein coupled receptor), que son críticos para la actividad mitogénica de ligandos tales como LPA, endotelina, trombina, bombesina y carbacol, representa una evidencia de dicha red de comunicación interconectada. No se comprende el mecanismo de esta comunicación cruzada, pero basándose en los datos informados, se propuso que ésta es transmitida por elementos intracelulares 1-4 . Dong y colaboradores (Proc. Natl. Acad. Sci. USA, volumen 96, páginas 6235-6240, 1999) describen que la liberación de ligandos mediada por una metaloproteinasa regula la señalización autocrina a través del receptor del factor de crecimiento epidérmico. Los autores del invento informamos aquí de que la activación de receptores de factores de crecimiento, tales como el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR), después de una estimulación de los GPCR, requiere el dominio extracelular del receptor. Como elemento clave de este mecanismo hemos identificado a un precursor de ligando de factor de crecimiento que pasa a través de las membranas, tal como el proHB-EGF, y a una actividad de proteinasa que es inducida rápidamente después de una interacción entre un GPCR y un ligando. Nosotros hemos mostrado que la inhibición del tratamiento de un precursor de factor de crecimiento bloquea la transactivación del receptor de factor de crecimiento inducida por un GPCR y señales situadas corriente abajo. Como evidencia acerca de la importancia patofisiológica de este mecanismo, hemos demostrado una inhibición de la actividad constitutiva del EGFR después de un tratamiento de células humanas de carcinoma de próstata PC-3 con el agente inhibidor de metaloproteinasas batimastato. Juntos, estos resultados establecen un nuevo concepto mecanístico para la diafonía entre diferentes sistemas de señalización. Además, los resultados demuestran la importancia de las proteinasas como dianas para el tratamiento o la prevención de enfermedades que están asociadas con una sobreexpresión patológica de receptores de factores de crecimiento. El presente invento es definido por el adjunto conjunto de reivindicaciones. En un primer aspecto, el invento se refiere al uso de agentes moduladores de la transducción de señales mediada por proteínas G para la producción de un agente que modula la activación de un receptor de factor de crecimiento como se define en la reivindicación 1. La activación del receptor de factor de crecimiento es mediada por su dominio extracelular y por la vía de una trayectoria de señales extracelulares. Por lo tanto, el agente modulador puede actuar sobre células que son heterólogas con respecto a las células diana portadoras del receptor de factor de crecimiento. La activación del receptor de factor de crecimiento se realiza preferiblemente mediante una fosforilación en tirosina, por la cual se media una cascada de señales extracelulares. Ejemplos de apropiados receptores de factores de crecimiento son el EGFR, y otros miembros de la familia del EGFR tales como HER-2, HER-3 o HER-4, pero también otros receptores de factores de crecimiento tales como el receptor 1 de TNF, el receptor 2 de TNF, y los receptores de CD 30 y de IL-6. El agente modulador de la transducción de señales mediada por proteínas G actúa sobre un precursor de factor de crecimiento que es un elemento clave de la trayectoria de transducción de señales. Como comparación, se describen unos agentes moduladores que actúan sobre una proteína G, un receptor acoplado con una proteína G y una proteinasa. El substrato que ha sido sometido a disociación por la proteasa es un proHB-EGF que es disociado para dar el HB- EGF y el receptor de factor de crecimiento es el EGFR. Se hace referencia al hecho de que otros ejemplos de ligandos de factores de crecimiento que son disociados a partir de precursores son otros miembros de la familia del EGF tales como el TGF, anfiregulina, epiregulina, el EGF, betacelulina, miembros de la familia de heregulina/NDF incluyendo isoformas de la misma y el TNF. La proteinasa que se describe como referencia y que ha sido modulada, es usualmente una proteinasa asociada a membranas, preferiblemente una metaloproteinasa tal como una proteinasa dependiente del zinc. Ejemplos de estas proteinasas son miembros de la familia de ADAM. La modulación de la actividad de una proteinasa puede 2   comprender una estimulación o una inhibición. La actividad de una proteinasa puede ser inhibida, lo cual a su vez da como resultado una inhibición de la activación de un receptor de factor de crecimiento. La modulación de la actividad de proteinasa se puede efectuar añadiendo al sistema un agente activador o inhibidor de la actividad de proteinasa, que en una forma de realización particularmente preferida modula directamente la actividad de proteinasa. Un ejemplo de dicho agente modulador para la actividad de proteinasa es el agente inhibidor de proteinasa batimastato. Otros ejemplos adicionales son el marimastato (de British Biotech), el TAPI (de Immunex) y las TIMP-1, -2, -3 o -4, particularmente laTIMP-3 31 . Un ejemplo de acuerdo con el invento es el CRM197, que es una forma inactiva catalíticamente de la toxina de difteria, que se fija específicamente a un proHB- EGF y que es capaz de bloquear el tratamiento del proHB-EGF por metaloproteinasas. La modulación de la transducción de señales mediada por proteínas G tiene una gran importancia para aplicaciones de diagnóstico y clínicas. Por ejemplo, la modulación de la transducción de señales mediada por proteínas G es una diana para la prevención o el tratamiento de trastornos que están asociados con, o acompañados por, una activación de receptores de factores de crecimiento, intensificada patológicamente. Se describen unos métodos para prevenir o tratar, entre otras enfermedades, unas enfermedades hiperproliferativas tales como tumores de colon, riñón, hígado, vejiga, pancreáticos, de próstata, gástricos, de mama, pulmón, tiroides, pituitaria, adrenales y de ovario o glioblastomas, así como también hiperplasia de tiroides, retinitis pigmentosa, pubertad precoz, acromegalia y asma. Más particularmente, el crecimiento de células humanas de cáncer de próstata puede ser inhibido mediante un tratamiento con agentes inhibidores de proteinasas tales como el batimastato (BB-94). En investigaciones adicionales se encontró que los agentes inhibidores de proteinasas son eficaces contra células humanas de cáncer gástrico, de ovario, riñón, hígado, colon, mama, páncreas, pulmón y vejiga y células humanas de glioblastoma. Se describe además un método para modular la activación de factores de crecimiento, que comprende poner en contacto una célula o un organismo que contiene un receptor de factor de crecimiento, capaz de ser activado con un agente modulador de la transducción de señales mediada por proteínas G. La etapa de puesta en contacto puede realizarse in vitro, p.ej. en un cultivo de células, o in vivo, p.ej. en un individuo que tiene la necesidad de un tratamiento médico, tal como un ser humano. El agente activo es añadido en una cantidad suficiente para modular la activación del receptor de factor de crecimiento, particularmente en una cantidad suficiente para inhibir por lo menos parcialmente la activación del receptor de factor de crecimiento. Preferiblemente, el agente activo es administrado como una composición aceptable farmacéuticamente, que puede contener apropiados diluyentes, vehículos y agentes auxiliares. La composición puede contener también otros agentes activos farmacéuticamente, p.ej. agentes citotóxicos para el tratamiento de un cáncer. Las composiciones farmacéuticas que son apropiadas para el uso en el presente invento, incluyen unas composiciones en los que los ingredientes activos están contenidos en una cantidad efectiva para conseguir su finalidad pretendida. El concepto de una dosis efectiva terapéuticamente se refiere a la cantidad del compuesto que da como resultado un mejoramiento de los síntomas o una prolongación de la supervivencia en un paciente. La toxicidad y la eficacia terapéutica de dichos compuestos se pueden determinar mediante procesos farmacéuticos... [Seguir leyendo]

1. Uso de un agente modulador que actúa sobre un precursor de factor de crecimiento, que inhibe el tratamiento del precursor de factor de crecimiento, inhibiendo de esta manera la activación del dominio extracelular de un receptor de factor de crecimiento, para la producción de un medicamento destinado a la prevención o al tratamiento de cánceres que son inducidos por una transducción de señales mediada por proteínas G, en que el medicamento comprende el agente modulador en una cantidad suficiente para inhibir por lo menos parcialmente una activación del receptor de factor de crecimiento, en donde dicho modulador actúa sobre el pro-HB-EGF. 2. El uso de la reivindicación 1, en el que el receptor de factor de crecimiento es un receptor de factor de crecimiento de la familia de los EGFR, particularmente el EGFR. 3. El uso de la reivindicación 1 en el que dicho agente modulador es el CRM 197. 4. El uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en el que dicho precursor de factor de crecimiento es el proHB-EGF y dicho receptor de factor de crecimiento es el EGFR. 5. El uso de una cualquiera de las precedentes reivindicaciones en el que dicho modulador es formulado en la forma de una composición farmacéuticamente aceptable.   Fig.1a 11   12 Fig. 1b   13 Fig. 1c   14 Fig. 1d   Fig, 1e   Fig. 2a 16   Fig. 2b 17   Fig. 2c 18   Fig. 3a 19   Fig. 3b   Fig. 3c 21   Fig. 3d 22   Fig. 4a 23   Fig.4b 24   Fig. 4c   Fig. 4d 26   Fig. 4e 27   Fig. 4f 28   Fig. 4g 29