PROCEDIMIENTO QUÍMICO DE SULFONACIÓN IN SITU.

Un procedimiento para la fabricacion de un compuesto de la Formula IIa:

**Fórmula** en donde R es un ester de sulfonato adecuado; a partir de un compuesto 4-piperidincarboxilato de alquilo(C1-C6) de la Formula III: **Fórmula** alquilo(C1-C6) procedimiento que comprende las etapas de: (a) hacer reaccionar el compuesto 4-piperidincarboxilato de alquilo(C1-C6) de la Formula III con dicarbonato de di-terc-butilo en presencia de tolueno o xileno para formar una primera mezcla que comprende tolueno o xileno, tercbutanol y un compuesto de la Formula IV: **Fórmula** alquilo(C1-C6) (b) eliminar sustancialmente el terc-butanol de la primera mezcla; (c) hacer reaccionar el compuesto de la Formula IV con un agente reductor adecuado in situ en presencia de tolueno o xileno para formar una segunda mezcla que comprende tolueno, productos secundarios de reduccion que incluyen productos secundarios alcoholicos y un compuesto de la Formula V: **Fórmula** (d) eliminar sustancialmentelos productos secundarios alcohólicos de la segunda mezcla; y (e) hacer reaccionar el compuesto de la Formula V con un agente sulfonilante adecuado in situ para formar un ester de sulfonato en presencia de una base adecuada y tolueno para formar el compuesto de la Formula IIa

La presente invención se refiere a procedimientos para fabricar ciertos intermedios útiles en la fabricación de ciertos derivados de quinazolina. En particular, la presente invención se refiere a procedimientos químicos y a intermedios útiles en la fabricación del compuesto 4-(4-bromo-2-fluoroanilino)-6-metoxi-7-(1-metilpiperidin-4-ilmetoxi)quinazolina. Este compuesto está comprendido dentro de la descripción amplia del documento WO 98/13354 y se encuentra ilustrado en el documento WO 01/32651, en los Ejemplos 2a, 2b y 2c.

El compuesto 4-(4-bromo-2-fluoroanilino)-6-metoxi-7-(1-metilpiperidin-4-il-metoxi)quinazolina se describe en la presente memoria por medio de la Fórmula I:

**(Ver fórmula)**

y como ZD6474, el número de código por el cual es conocido el compuesto. El compuesto ZD6474 es conocido también como Vandetanib y como Zactima™.

15 La angiogénesis normal juega un importante papel en diversos procesos, que incluyen el desarrollo embrionario, la curación de heridas y diversos componentes de la función reproductora femenina. La angiogénesis indeseable o patológica ha sido asociada a estados morbosos que incluyen la retinopatía diabética, la psoriasis, el cáncer, la artritis reumatoide, el ateroma, el sarcoma de Kaposi y el hemangioma (Fan et al., 1995, Trends Pharmacol. Sci. 16: 57-66; Folkman, 1995, Nature Medicine

1: 27-31). Se cree que la alteración de la permeabilidad vascular juega un papel tanto en procesos fisiológicos normales como patológicos (Cullinan-Bove et al., 1993, Endocrinology 133: 829-837; Senger et al., 1993, Cancer and Metastasis Reviews,

12: 303-324). Se han identificado varios polipéptidos con actividad promotora del crecimiento celular endotelial in vitro, entre ellos factores ácido y básico de crecimiento de fibroblastos (aFGF y bFGF) y factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF). En virtud de la expresión restringida de sus receptores, la actividad de factor de crecimiento del VEGF, en contraste con la de los FGFs, es relativamente específica hacia las células endoteliales. Pruebas recientes indican que el VEGF es un importante estimulador de la angiogénesis tanto normal como patológica (Jakeman et al., 1993, Endocrinology, 133: 848-859; Kolch et al., 1995, Breast Cancer Research and Treatment, 36:139-155), y de la permeabilidad vascular (Connolly et al., 1989,

J. Biol. Chem. 264: 20017-20024). El antagonismo de la acción del VEGF por secuestro del VEGF con anticuerpo puede dar como resultado la inhibición del crecimiento tumoral (Kim et al., 1993, Nature 362: 841-844).

Las tirosina-cinasas de receptor (RTK, por sus siglas en inglés) son importantes en la transmisión de señales bioquímicas a través de la membrana plasmática de las células. Estas moléculas transmembranarias se componen, de manera característica, de un dominio extracelular de fijación al ligando conectado, mediante un segmento situado en la membrana plasmática, a un dominio intracelular de tirosina-cinasa. La fijación del ligando al receptor da como resultado la estimulación de la actividad de la tirosina-cinasa asociada al receptor, lo cual conduce a la fosforilación de los restos de tirosina tanto en el receptor como en otras moléculas intracelulares. Estos cambios en la fosforilación de la tirosina inician una cascada de señales que conduce a diversas respuestas celulares. Se han identificado hasta la fecha al menos diecinueve subfamilias distintas de RTK, definidas por la homología de secuencias de aminoácidos. Una de estas subfamilias está compuesta actualmente por el receptor de tirosina-cinasa similar a fms, Flt-1 (denominado también VEGFR-1), el receptor que contiene el dominio de inserción de cinasa, KDR (denominado también VEGFR-2 ó Flk-1) y otro receptor de tirosina-cinasa similar a fms, el Flt-4. Se ha demostrado que dos de estas RTK relacionadas, Flt-1 y KDR, se unen a VEGF con gran afinidad (De Vries et al., 1992, Science 255: 989-991; Terman et al., 1.992, Biochem. Biophys. Res. Comm. 1.992, 187: 1579-1586). Se ha asociado la fijación de VEGF a estos receptores expresados en células heterólogas a cambios en el estado de fosforilación de la tirosina de las proteínas celulares y en los flujos de calcio.

El VEGF es un estímulo clave para la vasculogénesis y la angiogénesis. Esta citocina induce un fenotipo de crecimiento vascular rápido a través de la inducción de la proliferación de células endoteliales, la expresión y migración de proteasas, y la posterior organización de las células para formar un tubo capilar (Keck, P.J., Hauser, S.D., Krivi, G., Sanzo, K., Warren, T., Feder, J., y Connolly, D.T., Science (Washington DC), 246: 1309-1312, 1989; Lamoreaux, W.J., Fitzgerald, M.E., Reiner, A., Hasty, K.A.; y Charles, S.T., Microvasc. Res., 55: 29-42, 1998; Pepper, M.S., Montesano, R., Mandroita, S.J., Orci, L. y Vassalli, J.D., Enzyme Protein, 49: 138-162, 1996). Además, el VEGF induce una significativa permeabilidad vascular (Dvorak, H.F., Detmar, M., Claffey, K.P., Nagy, J.A., van de Water, L., y Senger, D.R., (Int. Arch. Allergy Immunol., 107: 233-235, 1995; Bates, D.O., Heald, R.I., Curry, F.E. y Williams, B.

J. Physiol. (Lond.), 533: 263-272, 2001), promoviendo la formación de una red vascular inmadura, hiperpermeable, que es característica de la angiogénesis patológica.

Se ha demostrado que la activación del KDR es por sí sola suficiente para promover todas las respuestas fenotípicas principales al VEGF, entre ellas la proliferación, migración y supervivencia de células endoteliales, y la inducción de permeabilidad vascular (Meyer, M., Clauss, M., Lepple-Wienhues, A., Waltenberger, J., Augustin, H.G., Ziche, M., Lanz, C., Büttner, M., Rziha, H-J., y Dehio, C., EMBO J.,

18: 363-374,1999; Zeng, H., Sanyal, S. y Mukhopadhyay, D., J. Biol. Chem., 276: 32714-32719, 2001; Gille, H., Kowalski, J., Li, B., LeCouter, J., Moffat, B, Zioncheck, T.F., Pelletier, N. y Ferrara, N., J. Biol. Chem., 276: 3222-3230, 2001).

El ZD6474 es un potente inhibidor de la RTK de VEGF, y presenta también cierta actividad contra la RTK del factor de crecimiento epidérmico (EGF). El ZD6474 inhibe los efectos del VEGF, y tiene interés por sus efectos antiangiogénicos y/o de permeabilidad vascular. La angiogénesis y/o el incremento de la permeabilidad vascular están presentes en una amplia gama de estados morbosos que incluyen el cáncer (que comprende la leucemia, el mieloma múltiple y el linfoma), diabetes, psoriasis, artritis reumatoide, sarcoma de Kaposi, hemangioma, nefropatías agudas y crónicas, ateroma, restenosis arterial, enfermedades autoinmunitarias, inflamación aguda, formación excesiva de cicatrices y adhesiones, linfoedema, endometriosis, metrorragia funcional y enfermedades oculares con proliferación de vasos retinianos, entre ellas la degeneración macular asociada con la edad. Se ha demostrado que el ZD6474 muestra una actividad antitumoral de amplio espectro en diversos modelos, después de ser administrado por vía oral una vez al día (Wedge S.R., Ogilvie D.J., Dukes M. et al., Proc. Am. Assoc. Canc. Res. 2001; 42: resumen 3126).

El documento WO 98/13354 describe varias vías posibles para preparar compuestos de 4-anilinoquinazolina. Sin embargo, no hay en el documento WO 98/13354 ninguna divulgación específica de un procedimiento para preparar un compuesto de la Fórmula I.

El documento WO 98/10767 también describe varias vías posibles para preparar compuestos de 4-anilinoquinazolina. Sin embargo, no hay en el documento WO 98/10767 ninguna divulgación específica de un procedimiento para preparar un compuesto de la Fórmula I.

El documento WO 01/32651 describe varias vías alternativas para preparar un compuesto de la Fórmula I.

La vía que está descrita en el Ejemplo 2a del documento WO 01/32651 implica la reacción del compuesto 4-(4-bromo-2-fluoroanilino)-6-metoxi-7-(piperidin-4-ilmetoxi)quinazolina con formaldehído acuoso, seguido de cianoborohidruro de sodio en una mezcla de disolventes de tetrahidrofurano y metanol. El producto se purifica mediante cromatografía y se aísla como base libre. A continuación se convierte la base libre en la sal de hidrocloruro mediante reacción con cloruro de hidrógeno en una mezcla de disolventes de cloruro de metileno y metanol.

La vía que está descrita en el Ejemplo 2b del documento WO 01/32651 implica la reacción del compuesto 4-(4-bromo-2-fluoroanilino)-6-metoxi-7-(1-(terc. butoxicarbonil)piperidin-4-ilmetoxi)quinazolina con formaldehído acuoso en ácido fórmico, seguido de reacción con hidróxido sódico...

1. Un procedimiento para la fabricación de un compuesto de la Fórmula IIa:

**(Ver fórmula)**

en donde R es un éster de sulfonato adecuado; a partir de un compuesto 4-piperidincarboxilato de alquilo(C1-C6) de la Fórmula III:

**(Ver fórmula)**

procedimiento que comprende las etapas de:

(a) hacer reaccionar el compuesto 4-piperidincarboxilato de alquilo(C1-C6) de la Fórmula III con dicarbonato de di-terc-butilo en presencia de tolueno o xileno para formar una primera mezcla que comprende tolueno o xileno, tercbutanol y un compuesto de la Fórmula IV:

(b) eliminar sustancialmente el terc-butanol de la primera mezcla;

(c) hacer reaccionar el compuesto de la Fórmula IV con un agente reductor adecuado in situ en presencia de tolueno o xileno para formar una segunda mezcla que comprende tolueno, productos secundarios de reducción que incluyen productos secundarios alcohólicos y un compuesto de la Fórmula V:

**(Ver fórmula)**

**(Ver fórmula)**

)emimeelspsssa

diecunaro;y melanteadecuado insitu paraformarunésterdesulfonatoenpresenciadeuna baseadecuadaytoluenoparaformarelcompuestodelaFórmulaIIa.

dtrouco

otn(e) hacerreaccionarelcompuestodelaFórmulaVconunagentesulfoni-2. Unprocedimientosegúnlareivindicación1,endondeelcompuestodeFórmula

IIa es un compuesto de Fórmula II y el agente sulfonante es cloruro de tosilo.

iltnarsusanca

i

llzca

d

(ico

l

ólhco

deguna

sdelas

**(Ver fórmula)**

3. Un procedimiento según la reivindicación 1 ó 2, en donde el compuesto 4-piperidincarboxilato de alquilo(C1-C6) de la Fórmula III es 4-piperidincarboxilato de etilo.

4. Un procedimiento según la reivindicación 1 ó 2 ó 3, en donde en la etapa (c) el agente reductor se selecciona de hidruro de bis(2-metoxietoxi)aluminio y sodio, hidruro de litio y aluminio e hidruro de diisobutilaluminio.

15

5. Un procedimiento según la reivindicación 4, en donde en la etapa (c) el agente reductor es hidruro de bis(2-metoxietoxi)aluminio y sodio.

6. Un procedimiento según una cualquiera o más de las reivindicaciones 1 a 5, en donde en la etapa (e) la base es trietilendiamina.

7. Un procedimiento según una cualquiera o más de las reivindicaciones 1 a 6,

- 81que además incluye la etapa (f) de aislar el compuesto de la Fórmula IIa.

8. Un procedimiento según la reivindicación 7, en donde la etapa (f) comprende cristalización usando un sistema disolvente de tolueno e isohexano.