Medicamento que comprende una combinación de un anticuerpo recombinante que se une específicamente a un receptor 4 de quimiocina CC humana (CCR4) y por lo menos un agente,

en el que dicho agente se selecciona de entre G-CSF, M-CSF, vincristina, ciclofosfamida, etopósido y metotrexato

CAMPO TÉCNICO

La presente invención se refiere a un medicamento que comprende una combinación de un anticuerpo recombinante que se une específicamente a un receptor 4 de quimiocina CC humana (CCR4) o un fragmento de anticuerpo del mismo y por lo menos un agente.

ANTECEDENTES DE LA TÉCNICA

Cuando un ligando se une a un receptor de quimiocina se produce una migración de leucocitos. El receptor 4 de quimiocina CC humana (en adelante denominado CCR4) que se expresa principalmente en los linfocitos T colaboradores CD4 positivos tipo Th2 en un tejido normal es un tipo de la familia del receptor de quimiocina [Int. Immunol.; 11, 81 (1999)]. CCR4 se combina específicamente con TARC (quimiocina regulada por el timo y activación) o MDC (quimiocina procedente de macrófagos). Se considera que los linfocitos T colaboradores CD4 positivos tipo Th2 que controlan la inmunidad humoral, desempeñan una función importante en las enfermedades alérgicas o en las enfermedades autoinmunitarias.

En las células de leucemia/linfoma tipo linfocito T descritas anteriormente, se expresan varios receptores de quimiocina, y existe una relación entre los subtipos de leucemia/linfoma de linfocitos T y varios tipos de receptores expresados en las células. Se informó de que CCR4 se expresa con mucha frecuencia en las células de leucemia/linfoma [Blood, 96, 685 (2000)]. Ya que CCR4 se expresa con mucha frecuencia en el linfoma macrocítico anaplásico positivo a ALK y en la micosis fungoide, se sugirió una posibilidad de que CCR4 sea un marcador tumoral con selectividad muy alta en los carcinomas específicos [Blood, 96, 685 (2000), Mod. Pathol., 15, 838, (2002), J. Invest. Dermatol., 119, 1405 (2002)]. Se informó de que CCR4 se expresa completamente con una alta frecuencia también en la leucemia de linfocitos T en el adulto (en adelante denominada ATL) producida por infección con virus de leucemia tipo I de linfocitos T humanos) [Blood, 99, 1505 (2002)]. Con respecto a la expresión de CCR4 en ATL, la expresión de CCR4 se correlaciona significativamente con un mal pronóstico [Clin. Cancer Res., 9, 3625, (2003)]. Además, CCR4 se expresa selectivamente en las células de linfoma crónico de linfocitos T (en adelante denominado CTL) [J. Invest. Dermatol., 119, 1405 (2002)].

El procedimiento para tratar la leucemia/linfoma es principalmente la quimioterapia que utiliza una combinación de varios agentes anticancerosos de bajo peso molecular. Sin embargo, la quimioterapia que proporciona efectos terapéuticos satisfactorios ha sido desconocida hasta ahora [Ganto Kagaku Ryoho, 26, Supplement I, 165-172, (1999)].

Entre la leucemia/linfoma positivas a CCR4 descritos anteriormente, el pronóstico de ATL es escaso en particular. Con respecto a los pacientes que padecen leucemia aguda o linfática que ocupan más del 70% de ATL total y han experimentado terapia CHOP común (terapia que utiliza ciclofosfamida, vincristina, doxorrubicina y prednisona combinadas), la tasa de supervivencia en 4 años es aproximadamente del 5% [British J.

Haematol., 79, 428-437 (1991)].

En quimioterapia convencional, a veces es difícil provocar la remisión a causa de la venida de las células tumorales resistentes a fármacos. Sin embargo, a veces se obtienen excelentes resultados terapéuticos mediante combinación de quimioterapia y un anticuerpo. El anticuerpo rhuMAb HER2 humanizado anti-HER2/neu (Herceptina/trastuzumab, Roche) presentó un efecto sobresaliente contra el cáncer de mama en politerapia con un agente anticanceroso taxano [Clinical Therapeutics, 21, 309 (1999)]. El anticuerpo IDEC-C2B8 híbrido humano anti-CD20 (Rituxan/rituximab, IDEC) presentó un efecto sobresaliente contra el linfoma de linfocitos B por politerapia con polifarmacoterapia [J. Clin. Oncol., 17, 268 (1999)].

La politerapia que utiliza un anticuerpo y una citocina es esperada también como nueva inmunoterapia contra tumores. Una citocina es un término general para varios factores humorales que controlan la interacción intracelular en una reacción inmunitaria. Una actividad citotóxica mediada por células dependientes de anticuerpos (en adelante denominada ADCC), una de las actividades citotóxicas, se provoca combinando un anticuerpo a una célula efectora tal como una célula mononuclear, un macrófago o una célula NK [J. Immunol.; 138, 1992 (1987)]. Con objeto de activar una célula efectora, se ha intentado la politerapia que utiliza una combinación de un anticuerpo y una citocina. Con respecto a la leucemia/linfoma de linfocitos B se ha realizado una prueba clínica administrando IDEC-C2B8 e interleucina (IL-2) [British J. Haematol., 117, 828-834 (2002)]

o IDEC-C2B8 y factor estimulante de colonias de granulocitos [Leukemia, 17, 1658-1664, (2003)] combinados. Sin embargo, no se ha observado un efecto terapéutico sobresaliente en comparación con la utilización del anticuerpo solo.

El anticuerpo KM 2760 anti-CCR4 se ha conocido como agente terapéutico contra la leucemia/linfoma positivo a CCR4 que reduce selectivamente las células tumorales mediante ADCC (documento WO 03/18635). La patente EP 1270595 describe un anticuerpo recombinante o el fragmento de anticuerpo del mismo que reacciona específicamente con un dominio extracelular de CCR4 humano. Flieger et al., (HIBRIDOMA, 18, 63-68, 1999) informan de un aumento de citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos (ADCC) por combinación de citocinas, en el que se diferencia entre citocinas que aumentan ADCC, las que disminuyen ADCC y las que no tienen ningún efecto. La utilización combinada de un anticuerpo anti-CCR4 y un agente quimioterapéutico o una citocina se ha desconocido hasta ahora.

En el tratamiento de cánceres, especialmente leucemia y linfoma, un método terapéutico que da lugar a efectos satisfactorios ha sido desconocido hasta ahora.

DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN

El objetivo de la presente invención consiste en proporcionar un medicamento que comprende una combinación de anticuerpo recombinante anti-CCR4 o un fragmento de anticuerpo del mismo y por lo menos un agente seleccionado de entre G-CSF, M-CSF, vincristina, ciclofosfamida, etopósido y metotrexato.

La presente invención se refiere a los apartados (1) a (20) siguientes.

(1) Un medicamento que comprende una combinación de un anticuerpo recombinante que se une específicamente a un receptor 4 de quimiocina CC humana (CCR4) y por lo menos un agente, en el que dicho agente se selecciona de entre G-CSF, M-CSF, vincristina, ciclofosfamida, etopósido y metotrexato.

(2) Medicamento según el apartado (1), en el que dicho anticuerpo y dicho por lo menos un agente deben administrarse simultánea o sucesivamente.

(3) Medicamento según el apartado (1) o (2), que es un fármaco antitumoral.

(4) Medicamento según el apartado (3), en el que el tumor es un tumor en el que se expresa CCR4.

(5) Medicamento según el apartado (4), en el que el tumor en el que se expresa CCR4 es un tumor de órgano hematopoyético.

(6) Medicamento según cualquiera de los apartados (1) a (5), en el que el anticuerpo recombinante que se une específicamente a CCR4 es un anticuerpo que se une específicamente a una región extracelular de CCR4 y no presenta reactividad con una plaqueta humana.

(7) Medicamento según el apartado (6), en el que el anticuerpo recombinante que se une específicamente a la región extracelular de CCR4, no tiene una actividad de inhibición del enlace de TARC (quimiocina regulada por el timo y activación) o MDC (quimiocina procedente de macrófagos) como un ligando de CCR4 a CCR4.

(8) Medicamento según los apartados (6) o (7), en el que la región extracelular es una región extracelular seleccionada de entre el grupo constituido por 1 a 39, 98 a 112, 176 a 206 y 271 a 284 de una secuencia de aminoácidos representada por la SEC. ID. nº 1.

(9) Medicamento según cualquiera de los apartados (6) a (8), en el que la región extracelular es un epítopo existente en las posiciones 2 a 29 de la secuencia de aminoácidos representada por la SEC. ID. nº 1.

(10) Medicamento según cualquiera de los apartados (6) a (9), en el que la región extracelular es un epítopo existente en las posiciones 13 a 29 de la secuencia de aminoácidos representada por la SEC. ID. nº 1.

(11) Medicamento según cualquiera de los apartados (6) a (10), en el que la región extracelular es un epítopo existente en las posiciones 13 a 25 de la secuencia de aminoácidos representada por la SEC. ID. nº 1.

(12) Medicamento según el apartado (11), en el que en el anticuerpo recombinante que se une específicamente a CCR4, una actividad de unión...

1. Medicamento que comprende una combinación de un anticuerpo recombinante que se une específicamente a un receptor 4 de quimiocina CC humana (CCR4) y por lo menos un agente, en el que dicho agente se selecciona de entre G-CSF, M-CSF, vincristina, ciclofosfamida, etopósido y metotrexato.

2. Medicamento según la reivindicación 1, en el que dicho anticuerpo y dicho por lo menos un agente deben administrarse simultánea o sucesivamente.

3. Medicamento según la reivindicación 1 ó 2, que es un fármaco antitumoral.

4. Medicamento según la reivindicación 3, en el que el tumor es un tumor en el que se expresa CCR4.

5. Medicamento según la reivindicación 4, en el que el tumor en el que se expresa CCR4 es un tumor de un órgano hematopoyético.

6. Medicamento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que el anticuerpo recombinante que se une específicamente a CCR4 es un anticuerpo que se une específicamente a una región extracelular de CCR4 y no presenta reactividad a una plaqueta humana.

7. Medicamento según la reivindicación 6, en el que el anticuerpo recombinante que se une específicamente a la región extracelular de CCR4, no presenta una actividad de inhibición de la unión de TARC (quimiocina regulada por el timo y activación) o MDC (quimiocina procedente de macrófagos) como un ligando de CCR4 a CCR4.

8. Medicamento según la reivindicación 6 ó 7, en el que la región extracelular es una región extracelular seleccionada de entre el grupo constituido por 1 a 39, 98 a 112, 176 a 206 y 271 a 284 de una secuencia de aminoácidos representada por la SEC. ID. nº

1.

9. Medicamento según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 8, en el que la región extracelular es un epítopo existente en las posiciones 2 a 29 de la secuencia de aminoácidos representada por la SEC. ID. nº 1.

10. Medicamento según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 9, en el que la región extracelular es un epítopo existente en las posiciones 13 a 29 de la secuencia de

aminoácidos representada por la SEC. ID. nº 1.

11. Medicamento según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 10, en el que la región extracelular es un epítopo existente en las posiciones 13 a 25 de la secuencia de aminoácidos representada por la SEC. ID. nº 1.

12. Medicamento según la reivindicación 11, en el que en el anticuerpo recombinante que se une específicamente a CCR4, una actividad de unión a un péptido que comprende 13 a 25 de la secuencia de aminoácidos representada por SEC. ID. nº 1 en la que por lo menos uno de los restos 16, 19, 20 y 22 de tirosina está sulfatado es inferior a una actividad de unión a un péptido que comprende 13 a 25 de la secuencia de aminoácidos representada por SEC. ID. nº 1.

13. Medicamento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, en el que el anticuerpo recombinante que se une específicamente a la región extracelular de CCR4 es un anticuerpo que reacciona específicamente con un epítopo reconocido por un anticuerpo monoclonal que produce el hibridoma KM 2160 (FERM BP-10090).

14. Medicamento según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en el que el anticuerpo recombinante humano es un anticuerpo híbrido humano o un anticuerpo injertado con RDC humano.

15. Medicamento según la reivindicación 14, en el que el anticuerpo híbrido humano comprende las regiones determinantes de complementariedad (RDC) de una región variable (región V) de una cadena pesada (cadena H) y una región V de una cadena ligera (cadena L) de un anticuerpo monoclonal que se une específicamente a CCR4.

16. Medicamento según la reivindicación 14 ó 15, en el que el anticuerpo híbrido humano comprende RDC1, RDC2 y RDC3 de una región variable (región V) de cadena pesada (cadena H) de un anticuerpo que comprende las secuencias de aminoácidos representadas por las SEC. ID. nº 5, nº 6 y nº 7, respectivamente, y RDC1, RDC2 y RDC3 de una región variable (región V) de una cadena ligera (cadena L) de un anticuerpo que comprende unas secuencias de aminoácidos representadas por las SEC. ID. nº 8, nº 9 y nº 10, respectivamente.

17. Medicamento según la reivindicación 14 ó 15, en el que el anticuerpo híbrido humano comprende una región variable (región V) de una cadena pesada (cadena H) de una molécula de anticuerpo que comprende una secuencia de aminoácidos representada por la SEC. ID. nº 11 y una región V de una cadena ligera (cadena L) de una molécula de anticuerpo representada por la SEC. ID. nº 12.

18. Medicamento según la reivindicación 14, en el que el anticuerpo injertado con RDC humano comprende las regiones determinantes de complementariedad (RDC) de una región variable (región V) de una cadena pesada (cadena H) y de una región V de una cadena ligera (cadena L) de un anticuerpo monoclonal que se une específicamente a CCR4.

19. Medicamento según la reivindicación 14 ó 18, en el que el anticuerpo injertado con la RDC humano comprende RDC1, RDC2 y RDC3 de una región variable (región V) de una cadena pesada (cadena H) de un anticuerpo que comprende secuencias de aminoácidos representadas por las SEC. ID. nº 5, nº 6 y nº 7, respectivamente, y RDC1, RDC2 y RDC3 de una región V de una cadena ligera (cadena L) que comprende secuencias de aminoácidos representadas por las SEC. ID. nº 8, nº 9 y nº 10, respectivamente.

20. Medicamento según la reivindicación 14 ó 18, en el que el anticuerpo injertado con RDC humano comprende una región variable (región V) de una cadena pesada (cadena H) de una molécula de anticuerpo que comprende una secuencia de aminoácidos representada por la SEC. ID. nº 16 o nº 17 y una región V de una cadena ligera (cadena L) de una molécula de anticuerpo representada por la SEC. ID. nº 18.