Procedimiento para producir proteínas.

Procedimiento para producir una proteína de interés, que comprende:



(i) introducir un vector de expresión que comprende un fragmento génico que comprende un ADN que codifica la proteína de interés y un gen marcador seleccionable atenuado y comprende asimismo un par de secuencias de transposón en ambos extremos del fragmento génico, en una célula de CHO en suspensión que puede sobrevivir y proliferar en un medio sin suero, en el que el gen marcador seleccionable atenuado es un gen marcador seleccionable modificado para codificar la misma secuencia de aminoácidos que el gen marcador seleccionable antes de la modificación y para comprender unos codones utilizados a una frecuencia baja en la célula de CHO de manera que el nivel de expresión en la célula de CHO se reduce y en el que el par de secuencias de transposón son secuencias de nucleótidos derivadas de un par de transposones Tol1 o Tol2;

(ii) integrar el fragmento génico que comprende el ADN que codifica la proteína de interés insertado entre el par de secuencias de transposón en un cromosoma de la célula de CHO;

(iii) obtener una célula de CHO que expresa la proteína de interés; y

(iv) cultivar en suspensión la célula de CHO.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/JP2011/078938.

Solicitante: KYOWA HAKKO KIRIN CO., LTD..

Nacionalidad solicitante: Japón.

Dirección: 1-6-1, Ohtemachi, Chiyoda-ku Tokyo JAPON.

Inventor/es: HAYASHI, YOKO, KUROKAWA MEGUMI, TSUKAHARA MASAYOSHI.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12N15/09 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Tecnología del ADN recombinante.
  • C12N5/10 C12N […] › C12N 5/00 Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales, p. ej. líneas celulares; Tejidos; Su cultivo o conservación; Medios de cultivo para este fin (reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00). › Células modificadas por introducción de material genético extraño, p. ej. células transformadas por virus.
  • C12P21/02 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA.C12P 21/00 Preparación de péptidos o de proteínas (proteína monocelular C12N 1/00). › que tienen una secuencia conocida de varios aminoácidos, p. ej. glutation.

PDF original: ES-2656079_T3.pdf

 

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