Un compuesto de la fórmula (I):**(Ver fórmula)**en la que R1 se selecciona entre OH,

nitro, amina, alquilo C1 a C8, alcoxi C1 a C8, fosfato y halógeno; n es 1, 2, ó 3; Y1 es un enlace covalente, Y2 es -CO-; Y3 es un enlace covalente; A es hidrógeno; C es hidrógeno; B es fenilo sustituido con grupos n(R2) en el que R2 se selecciona entre H, OH, nitro, amina, alquilo C1 a C8, alcoxi C1 a C8, fosfato y halógeno y n es 0, 1, 2, 3, 4 ó 5

CAMPO DE LA INVENCIÓN

Se han descubierto ligandos de indol trimetoxifenil sustituidos que demuestran una citotoxicidad elevada además de una capacidad notable para inhibir la polimerización de tubulina. Esos compuestos, así como sus derivados relacionados, son candidatos clínicos excelentes para el tratamiento del cáncer en seres humanos. Además, algunos de estos ligandos, en forma de profármacos, pueden resultar ser buenos agentes quimioterapeúticos de acción vascular selectivos para tumores o tener una actividad de acción vascular que da como resultado la prevención y/o destrucción selectiva de vasculatura en proliferación no maligna.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

La proteína citoesquelética tubulina está entre las dianas de fármacos terapéuticos más atractivas para el tratamiento de tumores sólidos. Una clase de agentes quimioterapeúticos de éxito particular media su efecto antitumoral a través de una interacción de unión directa con la tubulina. Esta clase de agentes terapéuticos clínicamente prometedores, denominados agentes de unión a tubulina o agentes anti-tubulina, presenta una potente citotoxicidad contra células tumorales inhibiendo eficazmente el ensamblaje de los heterodímeros de αβ-tubulina a las estructuras de los microtúbulos que son necesarias para facilitar la división celular mitótica (Li & Sham, Expert Opin. Ther. Patents., 2002).

Actualmente, los agentes quimioterapeúticos anti-tubulina más ampliamente reconocidos y clínicamente útiles son los alcaloides de la vinca, tales como vinblastina y vincristina (Owellen y col., Cancer Res., 1976) junto con taxanos tales como el taxol (Schiff y col., Nature, 1979). Además, se sabe que productos naturales tales como la rizoxina (Rao y col., Tetrahedron Lett., 1992), las combretastatinas (Pettit y col., Can. J. Chem., 1982), curacina A (Gerwick y col., J. Org. Chem., 1994), podofilotoxina (Coretese y col., J. Biol. Chem., 1977), epotilonas A y B (Nicolau y col., Nature, 1997), dolastatina-10 (Pettit y col., J. Am. Chem. Soc., 1987), y welwistatina (Zhang y col., Molecular Pharmacology, 1996), así como ciertos análogos sintéticos incluyendo la fenstatina (Pettit GR y col., J. Med. Chem., 1998), 2-estirilquinazolin-4(3H)-onas ("SQOs", Jiang y col., J. Med. Chem., 1990), y derivados altamente oxigenados de cis-y trans-estilbeno y dihidrostilbeno (Cushman y col., J. Med. Chem., 1991) median todos en la actividad citotóxica tumoral a través de un modo de acción que incluye la unión a tubulina y la posterior inhibición de la mitosis.

Normalmente, durante la metafase de la mitosis celular, la membrana nuclear se ha roto y la tubulina es capaz de formar los centrosomas (también denominados centros de organización de los microtúbulos) que facilitan la formación del huso acromático de microtúbulos al cual quedan anclados los cromosomas en división. El ensamblaje y desensamblaje posterior del huso acromático mitiga la separación de los cromosomas hermanos durante la anafase de manera que cada célula hija contenga una dotación completa de cromosomas. Como agentes antiproliferativos o antimitóticos, los agentes de unión a tubulina aprovechan la mitosis relativamente rápida que se produce en las células tumorales en proliferación. Con la unión a la tubulina y con la inhibición de la formación del huso acromático en células tumorales, el agente de unión a tubulina puede provocar una citotoxicidad de las células tumorales significativa con efectos relativamente poco importantes sobre las células normales del paciente que se dividen lentamente.

La naturaleza exacta de las interacciones del sitio de unión a la tubulina sigue siendo desconocida en su mayoría, y varía definitivamente entre cada clase de agentes de unión a tubulina. El marcaje de fotoafinidad y otras técnicas de elucidación del sitio de unión han identificado tres sitios de unión claves sobre la tubulina: 1) el sitio de la colchicina (Williams y col., J. Biol. Chem., 19851); 2) el sitio de los alcaloides de la vinca (Safa y col., Biochemistry, 1987); y 3) un sitio sobre los microtúbulos polimerizados al cual se une el taxol (Lin y col., Biochemistry, 1989). Un aspecto importante de este trabajo requiere una comprensión detallada, a nivel molecular, del dominio de unión de "moléculas pequeñas" tanto de las subunidades α y β de la tubulina. La estructura terciaria del heterodímero de α,β-tubulina fue presentada en 1998 por Downing y sus colaboradores a una resolución de 3,7 Å usando una técnica conocida como cristalografía electrónica (Nogales y col., Nature, 1998). Esta brillante consecución culminó décadas de trabajo dirigidas a la elucidación de esta estructura y debe facilitar la identificación de sitios de unión de moléculas pequeñas, tales como el sitio de la colchicina, usando técnicas tales como el marcaje de fotoafinidad y la afinidad química (Chavan y col., Bioconjugate Chem., 1993; Hahn y col., Photochem. Photobiol., 1992).

Se da una mayor importancia a nuevos fármacos que se unen al sitio de la colchicina puesto que recientemente se ha demostrado que muchos agentes de unión a tubulina también presentan actividad contra la vasculatura del tumor maligno en proliferación, en contraposición al propio tumor. La quimioterapia anti-vascular es un área emergente de la quimioterapia contra el cáncer que se centra en el desarrollo de fármacos dirigidos contra la proliferación de la vasculatura que mantiene el crecimiento del tumor. Mucha de la investigación en terapia anti-vascular del cáncer se ha centrado en la comprensión del proceso de formación de nuevos vasos sanguíneos, conocida como angiogénesis, y en la identificación de agentes antiangiogénicos que inhiban la formación de nuevos vasos sanguíneos. La angiogénesis está caracterizada por la proliferación de células endoteliales tumorales y la generación de la vasculatura para mantener el crecimiento de un tumor. Este crecimiento es estimulado por ciertos factores de crecimiento producidos por el propio tumor. Uno de estos factores de crecimiento, el factor de crecimiento endotelial vascular ("VEGF"), es relativamente específico de las células endoteliales, en virtud de la expresión restringida y regulada hacia arriba de su receptor cognado. Se han desarrollado diversas estrategias antiangiogénicas para inhibir este proceso de señalización en una o más etapas en la vía bioquímica para prevenir el crecimiento y el establecimiento de la vasculatura del tumor. No obstante, las terapias antiangiogénicas actúan lentamente y se deben administrar de manera crónica durante un periodo de meses a años para producir el efecto deseado.

Los agentes de acción vascular ("VTA") o agentes de daño vascular, son una clase independiente de agentes quimioterapeúticos antivasculares. A diferencia de los fármacos antiangiogénicos que interrumpen la formación de nuevos microvasos de tumores en desarrollo, los VTA atacan a tumores sólidos dirigiéndose selectivamente contra la vasculatura del tumor establecida y provocando un estrangulamiento masivo del flujo sanguíneo hacia el tumor. Una sola dosis de un VTA puede provocar un estrangulamiento rápido y selectivo de la neovasculatura del tumor en un período de minutos a horas, conduciendo eventualmente a la necrosis tumoral por inducción de hipoxia y agotamiento de nutrientes. Este mecanismo de citotoxicidad por mediación vascular de la acción de los VTA está bastante alejado del de los agentes antiangiogénicos, que inhiben la formación de nueva vascularización tumoral en lugar de interferir con la vasculatura del tumor existente. Se conocen otros agentes que alteran la vasculatura del tumor, pero difieren en que también pueden manifestar una toxicidad sustancial contra los tejidos normales a sus dosis toleradas máximas. En contraste, los VTA genuinos retienen su actividad de estrangulamiento vascular a una fracción de sus dosis toleradas máximas. Se piensa que los VTA que se unen a tubulina desestabilizan selectivamente el citoesqueleto de microtúbulos de las células endoteliales tumorales, provocando una alteración profunda en la forma de la célula que en último término da lugar a la oclusión de los vasos sanguíneos tumorales y al estrangulamiento del flujo sanguíneo hacia el tumor (Kanthou y col., Blood, 2002).

El profármaco fosfato de combretastatina A4 (CA4P) es uno de los principales candidatos novedosos entre una colección relativamente pequeña de compuestos mundiales conocidos con actividad de acción vascular (patente U.S. No. 5.561.122; Chaplin y col., Anticancer Res., 1999; Tozer y col., Cancer Res., 1999;...

1. Un compuesto de la fórmula (I): 5

**(Ver fórmula)**

**(Ver fórmula)**

**(Ver fórmula)**

3. Un compuesto de la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para uso en la inhibición del ensamblaje de la tubulina in vitro mediante la puesta en contacto de una célula con una cantidad eficaz.

10 4. Un compuesto de la reivindicación 3 en el que dicha célula es una célula tumoral.

5. Un compuesto de la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para uso en el tratamiento de un mamífero afectado con una enfermedad neoplásica.

15 6. Un compuesto de la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para uso en el tratamiento del cáncer, en el que dicho cáncer se selecciona entre leucemia, cáncer de pulmón, cáncer de colon, cáncer de tiroides, cáncer del SNC, melanoma, cáncer de ovario, cáncer renal, cáncer de próstata, cáncer pancreático y cáncer de mama.

20 7. Un compuesto de la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para uso en la destrucción selectiva de la vasculatura del tumor.

8. Un compuesto de la reivindicación 1 o la reivindicación 2 para uso en la reducción selectiva del flujo sanguíneo hacia al menos una porción de una región neoplásica, en la que se produce una necrosis sustancial de tejido en la región neoplásica sin una necrosis sustancial de tejido en las regiones adyacentes.

9. El compuesto de la reivindicación 8 en el que el efecto del flujo sanguíneo reducido del tumor es reversible.

10. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la reivindicación 1 o la 10 reivindicación 2 como componente activo junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable.