Derivados de estilbeno y su uso para unión y formación de imágenes de placas amiloides.

Un compuesto de fórmula general I:**Fórmula**

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

en la que:

R5 es hidrógeno o alquilo C1-4;

R1, R2 y R3, en cada caso, están seleccionados independientemente del grupo constituido por hidrógeno, halógeno, alquilo C1-4, ciano, carboxialquilo (C1-5), trifluorometilo, nitro, metilamino, dimetilamino, haloalquilo (C1-4) y formilo;

R4 está seleccionado del grupo constituido por:

a. alquiltio C1-4,

b. haloalcoxi (C1-4),

c. carboxialquilo (C1-5),

d. hidroxi,

e. alcoxi C1-4,

f. NR6R7, en el que R6 es hidrógeno, fluoroalquilo (C1-4) o alquilo C1-4; y

R7 es hidrógeno, fluoroalquilo (C1-4) o alquilo C1-4;

g. fenilalquilo (C1-4),

h. arilo C6-10, i. heteroarilo,

j. heterociclo,

k. heterocicloalquilo (C1-4) y

l. cicloalquilo C3-6, en los que dicho fenilalquilo (C1-4), arilo C6-10, heteroarilo, heterociclo, heterocicloalquilo (C1-4) o cicloalquilo C3-6 está sustituido con uno de los siguientes:

alquiltio C1-4, alquilsulfonilo C1-4, metoxi, hidroxi, dimetilamino o metilamino; y

X' es 125I, 123I, 131I,18F, 18Fluoroalquilo (C1-4), [18Fluoroalquil (C1-4)]amino, [18Fluoroalquil (C1-4)]alquilamino, 76Br, o 77Br.

Derivados de estilbeno y su uso para unión y formación de imágenes de placas amiloides Antecedentes de la invención Campo de la invención Esta invención se refiere a compuestos bioactivos novedosos, procedimientos de formación de imágenes diagnóstica usando compuestos radiomarcados y procedimientos para fabricar compuestos radiomarcados.

Técnica anterior

La enfermedad de Alzheimer (AD) es un trastorno neurodegenerativo progresivo caracterizado por deterioro cognitivo, pérdida de memoria irreversible, desorientación y dificultad en el lenguaje. El examen post-mortem de secciones de 10 cerebro con AD revela placas seniles (SP) abundantes compuestas de péptidos ß-amiloides (Aß) y de numerosas marañas neurofibrilares (NFT) formadas por filamentos o por proteínas tau altamente fosforiladas (para recientes recapitulaciones y citas adicionales véase Ginsberg, S. D. y cols., "Molecular Pathology of Alzheimer's Disease and Related Disorders, " en Cerebral Cortex: Neurodegenerative and Age-related Changes in Structure and Function of Cerebral Cortex, Kluwer Academic/Plenum, NY (1999) , páginas 603-654; Vogelsberg-Ragaglia, V. y cols., "Cell 15 Biology of Tau and Cytoskeletal Pathology in Alzheimer's Disease", Alzheimer's Disease, Lippincot, Williams & Wilkins, Philadelphia, PA (1999) , páginas 359-372) . La AD familiar (FAD) está causada por mutaciones múltiples en los genes de proteína precursora de A (APP) , presenilina 1 (PS1) y presenilina 2 (PS2) (Ginsberg, S. D. y cols., "Molecular Pathology of Alzheimer's Disease and Related Disorders, " in Cerebral Cortex: Neurodegenerative and Age-related Changes in Structure and Function of Cerebral Cortex, Kluwer Academic/Plenum, NY (1999) , páginas 603-654;

Vogelsberg-Ragaglia, V. y cols., "Cell Biology of Tau and Cytoskeletal Pathology in Alzheimer's Disease, " Alzheimer's Disease, Lippincot, Williams & Wilkins, Philadelphia, PA (1999) , páginas 359-372) .

Aunque los mecanismos exactos que subyacen a la AD no se entienden completamente, todas las mutaciones de FAD patógenas estudiadas hasta ahora incrementan la producción de la forma de 42-43 aminoácidos de largo más amiloidogénica del péptido Aß. Así, al menos en FAD, la desrregulación de la producción de Aß parece ser suficiente 25 para inducir una cascada de eventos que conducen a neurodegeneración. De hecho, la hipótesis de la cascada amiloide sugiere que la formación de los agregados Aß fibrilares estructurales en el cerebro pueden ser un evento esencial en patogénesis de AD (Selkoe, D. J., "Biology of B-amyloid Precursor Protein and the Mechanism of Alzheimer's Disease, " Alzheimer's Disease, Lippincot Williams & Wilkins, Philadelphia, PA (1999) , páginas 293-310; Selkoe, D. J., J Am. Med. Assoc. 283: 1615-1617 (2000) ; Naslund, J. y cols., J. Am. Med. Assoc. 283: 1571-1577

(2000) ; Golde, T. E. y cols., Biochimica et Biophysica Acta 1502: 172-187 (2000) ) .

Diversos enfoques para intentar inhibir la producción y reducir la acumulación de Aß fibrilar en el cerebro están evaluándose actualmente como terapias potenciales para AD (Skovronsky, D. M. y Lee, V. M., Trends Pharmacol. Sci.

21: 161-163 (2000) ; Vassar, R. y cols., Science 286: 735-741 (1999) ; Wolfe, M. S. y cols., J. Med. Chem. 41: 6-9 (1998) ; Moore, C. L. y cols., J. Med. Chem. 43: 3434-3442 (2000) ; Findeis, M. A., Biochimica et Biophysica Acta 1502:

76-84 (2000) ; Kuner, P., Bohrmann y cols., J Biol. Chem. 275: 1673-1678 (2000) ) . Es por lo tanto de gran interés desarrollar ligandos que se unen específicamente a agregados Aß fibrilares. Dado que las SP extracelulares son objetivos accesibles, estos nuevos ligandos podrían usarse como herramientas diagnósticas in vivo y como sondas para visualizar la deposición progresiva de Aß en estudios de amiloidogénesis de AD en pacientes vivos.

Para este fin, se han comunicado varios enfoques interesantes para desarrollar ligandos específicos de agregados de Aß fibrilares (Ashburn, T. T. y cols., Chem. Biol. 3: 351-358 (1996) ; Han, G. y cols., J Am. Chem. Soc. 118: 4506-4507 (1996) ; Klunk, W. E. y cols., Biol. Psychiatr y 35: 627 (1994) ; Klunk, W. E. y cols., Neurobiol. Aging 16: 541-548 (1995) ; Klunk, W. E. y cols., Society for Neuroscience Abstract 23: 1638 (1997) ; Mathis, C. A. y cols., Proc. XIIth Intl. Symp. Radiopharm. Chem., Uppsala, Suecia: 94-95 (1997) ; Lorenzo, A. y Yankner, B. A., Proc. Natl. Acad Sci. EE.UU. 91: 12243-12247 (1994) ; Zhen, W. y cols., J. Med. Chem. 42: 2805-2815 (1999) ) . El enfoque más atractivo se basa en 45 crisamina-G (CG) y rojo Congo (CR) altamente conjugados y el último se ha utilizado para tinción fluorescente de SP y NFT en secciones de cerebros con AD post-mortem (Ashburn, T. T. y cols., Chem. Biol. 3: 351-358 (1996) ; Klunk, W.

E. y cols., J. Histochem. Cytochem. 37: 1273-1281 (1989) ) . Las constantes de inhibición (Ki) para unión a agregados de Aß fibrilares de CR, CG y derivados de 3'-bromo-y 3'-yodo de CG son 2.800, 370, 300 y 250 nM, respectivamente (Mathis, C. A. y cols., Proc. XIIth Intl. Symp. Radiopharm. Chem., Uppsala, Suecia: 94-95 (1997) ) . Estos compuestos 50 han mostrado unirse selectivamente a agregados peptídicos Aß (1-40) in vitro así como a depósitos de Aß fibrilares en secciones de cerebros con AD (Mathis, C. A. y cols., Proc. XIIth Intl. Symp. Radiopharm. Chem., Uppsala, Suecia: 94-95 (1997) ) .

La amiloidosis es una afección caracterizada por la acumulación de diversas proteínas fibrilares, insolubles en los tejidos de un paciente. Un depósito amiloide está formado por la agregación de proteínas amiloides, seguida por la 55 combinación adicional de agregados y/o proteínas amiloides. La formación y acumulación de agregados de péptidos ß-amiloides (Aß) en el cerebro son factores críticos en el desarrollo y la progresión de AD. Los agregados fibrilares de péptidos amiloides, Aß1-40 y Aß1-42, son péptidos metabólicos principales derivados de proteína precursora amiloide encontrada en placas seniles y depósitos amiloides cerebrovasculares en pacientes de AD (Xia, W. y cols., J. Proc.

Natl. Acad. Sci. EE.UU. 97: 9299-9304 (2000) ) . La prevención y regresión de formación de placas de Aß están en el punto de mira como un tratamiento para esta enfermedad (Selkoe, D., J. JAMA 283: 1615-1617 (2000) ; Wolfe, M.S. y cols., J. Med. Chem. 41: 6-9 (1998) ; Skovronsky, D.M. y Lee, V.M., Trends Pharmacol. Sci. 21: 161-163 (2000) ) .

Además del papel de los depósitos amiloides en la enfermedad de Alzheimer, la presencia de depósitos amiloides se ha mostrado en enfermedades tales como fiebre mediterránea, síndrome de Muckle-Wells, mieloma idiopático, polineuropatía amiloide, cardiomiopatía amiloide, amiloidosis senil sistémica, polineuropatía amiloide, hemorragia cerebral hereditaria con amiloidosis, síndrome de Down, tembladera, enfermedad de Creutzfeldt-Jacob, Kuru, síndrome de Gerstamnn-Straussler-Scheinker, carcinoma medular de tiroides, depósitos amiloides aislados en la aurícula, microglobulina ß2-amiloide en pacientes de diálisis, miositis por cuerpos de inclusión, depósitos ß2-amiloides en enfermedad degenerativa muscular e insulinoma de los islotes de Langerhans en diabetes tipo II.

Así, se ha buscado ansiosamente un procedimiento simple, no invasivo para detectar y cuantificar depósitos amiloides en un paciente. Actualmente, la detección de depósitos amiloides implica análisis histológicos de materiales de biopsia o autopsia. Ambos procedimientos tienen inconvenientes. Por ejemplo, una autopsia puede usarse solamente para un diagnóstico post-mortem.

Los agentes de formación de imágenes pueden estar basados en dos tipos de isótopos. El 99mTc (T1/2, 6 h; 140 KeV) y el 123I (T1/2, 13 h; 159 KeV) se usan de forma rutinaria para tomografía computerizada de emisión de fotones individual (SPECT) , mientras que el 11C (T1/2, 20 minutos; 511 KeV) y el 18F (T1/2, 110 minutos; 511 KeV) se usan comúnmente para tomografía de emisión de positrones (PET) .

La formación de imágenes directa de depósitos amiloides in vivo es difícil, ya que los depósitos tienen muchas de las mismas propiedades físicas (por ejemplo, densidad y contenido en agua) que los tejidos normales. Los intentos para formar imágenes de depósitos amiloides usando formación de imágenes de resonancia magnética (MRI) y tomografía asistida por ordenador (CAT) han sido decepcionantes y han detectado depósitos amiloides solamente en ciertas condiciones favorables. Además, los esfuerzos para marcar depósitos amiloides con anticuerpos, proteína P amiloide sérica, u otras moléculas de sondeo han proporcionado alguna selectividad en la periferia de los tejidos, pero han proporcionado formación de imágenes escasa del interior... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto de fórmula general I:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que: 5 R5 es hidrógeno o alquilo C1-4;

R1, R2 y R3, en cada caso, están seleccionados independientemente del grupo constituido por hidrógeno, halógeno, alquilo C1-4, ciano, carboxialquilo (C1-5) , trifluorometilo, nitro, metilamino, dimetilamino, haloalquilo (C1-4) y formilo; R4 está seleccionado del grupo constituido por:

a. alquiltio C1-4,

b. haloalcoxi (C1-4) ,

c. carboxialquilo (C1-5) ,

d. hidroxi,

e. alcoxi C1-4,

f. NR6R7, en el que

R6 es hidrógeno, fluoroalquilo (C1-4) o alquilo C1-4; y R7 es hidrógeno, fluoroalquilo (C1-4) o alquilo C1-4;

g. fenilalquilo (C1-4) ,

h. arilo C6-10,

i. heteroarilo, 20 j. heterociclo,

k. heterocicloalquilo (C1-4) y

l. cicloalquilo C3-6, en los que dicho fenilalquilo (C1-4) , arilo C6-10, heteroarilo, heterociclo, heterocicloalquilo (C1-4) o cicloalquilo C3-6 está sustituido con uno de los siguientes: alquiltio C1-4, alquilsulfonilo C1-4, metoxi, hidroxi, dimetilamino o metilamino;

y X' es 125I, 123I, 131I, 18F, 18Fluoroalquilo (C1-4) , [18Fluoroalquil (C1-4) ]amino, [18Fluoroalquil (C1-4) ]alquilamino, 76Br, o 77Br.

2. Un compuesto de la reivindicación 1, en el que R5 es hidrógeno o metilo; y R3 es hidrógeno.

3. Un compuesto de la reivindicación 1, en el que R1 y R2 son hidrógeno o alquilo C1-4.

4. Un compuesto de la reivindicación 3, en el que R5 es hidrógeno.

5. Un compuesto de la reivindicación 4, en el que

R1 es hidrógeno y

R4 es alquiltio C1-4, haloalcoxi (C1-4) , hidroxi, alcoxi C1-4 o NR6R7, en el que R6 y R7 son hidrógeno, fluoroalquilo (C1-4) o alquilo C1-4.

6. Un compuesto de la reivindicación 5, en el que 5 R2 es hidrógeno.

7. Un compuesto de la reivindicación 1, en el que R4 es metiltio, hidroxi, metoxi o NR6R7, en el que R6 y R7 son hidrógeno, fluoroalquilo (C1-4) o metilo.

8. Un compuesto de la reivindicación 1, en el que 10 X' es 123I.

9. Un compuesto de la reivindicación 1, en el que X' es 18fluorometilo, 18fluoroetilo o 18fluoropropilo.

10. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-9.

11. Una composición diagnóstica para formar imágenes de depósitos amiloides, que comprende un compuesto

radiomarcado de una cualquiera de las reivindicaciones 1-9; y un excipiente y/o diluyente farmacéuticamente 15 aceptable.

12. Uso de una cantidad efectiva de un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-9 para la elaboración de una composición farmacéutica para inhibir agregación de placa amiloide en un mamífero.

FIGURA 1

N.ºs 20, 21, 22, 19, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30 y 34 no de acuerdo con la invención. FIGURA 2 FIGURA 3

(E) -estilbeno y N.ºs 35, 37, 38 .

4. 52 no de acuerdo con la invención. FIGURA 4

N.º.

5. 66, Aldrich 39.

42. 1, N.º.

6. 69 y N.º.

7. 73 no de acuerdo con la invención. FIGURA 5

N.º.

7. 88, N.ºs 90 y 91, N.º.

9. 101 no de acuerdo con la invención.