Defibrotida en combinación con un factor hematopoyético que tiene la capacidad de movilizar progenitores hematopoyéticos,

para el uso para aumentar la cantidad de células madre y/o progenitores hematopoyéticos en circulación en la sangre periférica de un mamífero, caracterizada porque la defibrotida y dicho al menos un factor hematopoyético que tiene la capacidad de movilizar progenitores hematopoyéticos se administran por vía intravenosa

Mezcla de defibrotida y G-CSF y su uso para activar progenitores hematopoyéticos.

La presente invención se refiere a una nueva formulación capaz de aumentar la cantidad de células madre y células progenitoras en circulación en la sangre periférica de un mamífero; la formulación se caracteriza por que contiene defibrotida en combinación con al menos un factor hematopoyético que tiene la capacidad de movilizar progenitores hematopoyéticos, preferiblemente G-CSF.

Campo de la invención

La posibilidad de obtener una cantidad aumentada de células madre y progenitores hematopoyéticos en circulación en la sangre periférica de un mamífero y en particular en la de un ser humano, ha sido durante años objeto de una actividad investigadora intensa; de hecho, la disponibilidad de células madre y/o progenitores hematopoyéticos es particularmente importante en sectores tales como el trasplante autólogo de progenitores hematopoyéticos circulantes, el alotrasplante de progenitores hematopoyéticos circulantes y en programas para la terapia génica de células hematopoyéticas circulantes.

Aunque después del nacimiento las células madre y células progenitoras se localizan casi exclusivamente en la médula ósea, presentan sin embargo propiedades migratorias; es decir, en condiciones fisiológicas, migran a través de las cavidades de la médula ósea y pasan a la circulación. Ese proceso, conocido comúnmente como movilización, puede amplificarse en mamíferos mediante diversos tratamientos, tales como, por ejemplo, la administración de citocinas y, en particular, el factor de crecimiento de colonias de granulocitos (G-CSF); el proceso inverso, conocido como colonización, se produce, por ejemplo, en receptores irradiados después del trasplante de células hematopoyéticas; no obstante, los mecanismos en los que se basan la movilización y la colonización son todavía poco conocidos (C. F. Craddock et al. Antibodies to VLA4 Integrin Mobilize Long-Term Repopulating Cells and Augment Cytokine-Induced Mobilization in Primates and Mice, Blood, Vol. 90, nº 12, 1997, págs. 4779-4788; F. Prosper et al. Mobilization and Homing of Peripheral Blood Progenitors is Related to Reversible Downregulation of a4ß1 Integrin Expression and Function, J. Clin. Invest., Vol. 101, nº 11, 1998, págs. 2456-2467; M. Vermeulen et al., Role of Adhesion Molecules in the Homing and Mobilization of Murine Hematopoietic Stem and Progenitor Cells, Blood Vol. 92, nº 3, 1998, págs. 894-900).

El G-CSF (número de registro CAS 143011-2-7/Merck Index, 1996, página 4558) es un factor de crecimiento hematopoyético que es indispensable en la proliferación y diferenciación de las células progenitoras de granulocitos; es una glicoproteína de 18-22 kDa producida normalmente en respuesta a una estimulación específica por una diversidad de células, incluyendo monocitos, fibroblastos y células endoteliales. El término defibrotida (número de registro CAS 83712-60-1) identifica normalmente un polidesoxirribonucleótido obtenido por extracción (documentos US 3.770.720 y US 3.899.481) a partir de tejido animal y/o vegetal; este polidesoxirribonucleótido se usa normalmente en forma de sal de un metal alcalino, generalmente sodio. La defibrotida se usa principalmente por su actividad antitrombótica (documento US 3.829.567), aunque puede usarse en diferentes aplicaciones, tales como, por ejemplo, el tratamiento de la insuficiencia renal aguda (documento US 4.694.134) y el tratamiento de la isquemia miocárdica aguda (documento US 4.693.995). Las patentes de Estados Unidos US 4.985.552 y US 5.223.609, por último, describen un proceso para la producción de defibrotida que permite que se obtenga un producto que tiene características físico-químicas constantes y bien definidas y además carece de cualquier efecto secundario no deseado.

Para los fines de la presente invención, debería entenderse por lo tanto que el término defibrotida se refiere a cualquier oligonucleótido y/o polinucleótido obtenido por extracción a partir de tejido animal y/o vegetal, en particular de los órganos de mamíferos. Preferiblemente, la defibrotida se produce de acuerdo con los métodos descritos en las patentes enumeradas anteriormente que, por tanto, deberían considerarse parte integral de la presente descripción; aún más preferiblemente, se produce de acuerdo con el método descrito en las patentes de Estados Unidos US 4.985.552 y 5.223.609.

Descripción detallada de la invención

Sorprendentemente, se ha descubierto ahora que es posible obtener una movilización aumentada de células madre y progenitores hematopoyéticos mediante la administración de defibrotida en combinación y/o en estrecha proximidad temporal con un factor hematopoyético que tiene la capacidad de movilizar progenitores hematopoyéticos.

Como se apreciará a partir de los Ejemplos, la administración de defibrotida en combinación y/o en estrecha proximidad temporal con un factor hematopoyético que tiene la capacidad de movilizar progenitores hematopoyéticos permite la obtención de niveles de movilización mucho mayores que los que pueden obtenerse mediante la administración del factor hematopoyético en solitario.

El objeto de la presente invención está representado por tanto por una formulación que contiene como agentes activos defibrotida en combinación con al menos un factor hematopoyético que tiene la capacidad de movilizar progenitores hematopoyéticos, preferiblemente G-CSF. En su realización preferida, esta formulación está constituida por una solución acuosa inyectable; como alternativa, la formulación podría estar constituida por dos soluciones diferentes, una que contenga la defibrotida y otra que contenga el factor hematopoyético que tiene la capacidad de movilizar progenitores hematopoyéticos.

La formulación de acuerdo con la presente invención se conforma por tanto como una preparación combinada para el uso simultáneo, separado o secuencial de los principios activos mencionados anteriormente para aumentar la cantidad de células madre y/o progenitores hematopoyéticos en circulación en la sangre periférica de un mamífero.

Un segundo objeto de la presente invención está representado por el uso de defibrotida, en combinación con al menos un factor hematopoyético que tiene la capacidad de movilizar progenitores hematopoyéticos, para la preparación de formulaciones capaces de aumentar la cantidad de células madre y/o progenitores hematopoyéticos en circulación en la sangre periférica de un mamífero, preferiblemente un ser humano.

Por último, un objeto adicional de la presente invención está representado por un método de aumento de la cantidad de células madre y/o progenitores hematopoyéticos en circulación en la sangre periférica de un mamífero, caracterizado por que la defibrotida se administra al mamífero en combinación o en proximidad temporal con al menos un factor hematopoyético que tiene la capacidad de movilizar progenitores hematopoyéticos.

El factor hematopoyético usado para realizar los experimentos que condujeron a la presente invención es G-CSF; sin embargo, no debe excluirse que puedan obtenerse resultados similares con factores hematopoyéticos distintos de G-CSF pero que tengan no obstante la capacidad de movilizar progenitores hematopoyéticos, tales como, por ejemplo, el factor de crecimiento de colonias de granulocitos y macrófagos (GM-CSF), ligando Flt3 (FL), factor de células madre (SCF), trombopoyetina (TPO), interleucina 8 (IL-8) y otros que serán evidentes para los especialistas en la técnica.

La defibrotida usada en combinación con G-CSF en esta primera fase experimental era la defibrotida comercializada actualmente por Crinos Spa con la marca Prociclide^TM y producida de acuerdo con el proceso descrito en las patentes de Estados Unidos US 4.985.552 y US 5.223.609.

En lo que se refiere a los métodos de administración de los dos ingredientes activos, no son limitantes para los fines de la invención. Es decir, la defibrotida y el factor hematopoyético que tiene la capacidad de movilizar progenitores hematopoyéticos pueden administrarse a mamíferos (y en particular a seres humanos) de acuerdo con los métodos y las posologías conocidas en la técnica; generalmente, se administran por vía oral, intramuscular, intraperitoneal, subcutánea o intravenosa, siendo la última vía mencionada la preferida.

Los dos ingredientes activos también pueden administrarse simultáneamente o sucesivamente. Es decir, en el primer caso, se administran...

1. Defibrotida en combinación con un factor hematopoyético que tiene la capacidad de movilizar progenitores hematopoyéticos, para el uso para aumentar la cantidad de células madre y/o progenitores hematopoyéticos en circulación en la sangre periférica de un mamífero, caracterizada porque la defibrotida y dicho al menos un factor hematopoyético que tiene la capacidad de movilizar progenitores hematopoyéticos se administran por vía intravenosa.

2. Defibrotida para el uso de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizada porque el factor hematopoyético que tiene la capacidad de movilizar progenitores hematopoyéticos se selecciona de G-CSF, GM-CSF, FL, SCF, TPO y/o IL-8.

3. Defibrotida para el uso de acuerdo con la reivindicación 2, caracterizada porque el factor hematopoyético que tiene la capacidad de movilizar progenitores hematopoyéticos es G-CSF.

4. Defibrotida para el uso de acuerdo con la reivindicación 3, caracterizada porque el G-CSF se administra a una dosificación de 5 a 24 µg/kg y la defibrotida se administra a una dosificación de 5 a 15 mg/kg/h.

5. Defibrotida para el uso de acuerdo con la reivindicación 4, caracterizada porque el G-CSF y la defibrotida se administran durante 2-7 días.

6. Defibrotida para el uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque el mamífero es un ser humano.

7. Defibrotida para el uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque la defibrotida y dicho al menos un factor hematopoyético que tiene la capacidad de movilizar progenitores hematopoyéticos se administran simultáneamente o sucesivamente.