Uso de un agente antitumoral para la fabricación de un medicamento para el tratamiento en combinación con un retinoide de un tumor de un cáncer humano seleccionado entre cáncer de ovario,

cáncer endometrial, tumor de riñón de Wilm, cáncer de colon, cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer gástrico, cáncer de pulmón, cáncer hepatocelular, melanoma o feocromocitoma, donde dicho agente antitumoral es un anticuerpo, una molécula antisentido, una ribozima o un ADN de triple hélice que se une a una proteína diana seleccionada del grupo que consiste en autotaxina, ligando 4-1BB, efrina b1, ISLR, M-ras, y ZO-1 o a un ácido nucleico que codifica dicha proteína diana

Métodos para aumentar la eficacia de la terapia contra el cáncer.

Antecedentes de la invención

La presente invención se refiere a la identificación de dianas de fármacos para la terapia del cáncer. En particular, la presente invención se refiere a la identificación de antígenos de tumores, la expresión de los cuales aumenta selectivamente mediante el tratamiento con retinoide, y a los métodos de tratamiento de reconocimiento de dichos antígenos.

Una aproximación para entender la base molecular del cáncer y para idear estrategias de tratamiento eficaces es identificar diferencias en la expresión génica entre células cancerosas y células normales. Se han utilizado estrategias basadas en suposiciones de que los niveles de ARNm en estado estacionario diferirán entre células normales y células malignas para clonar genes diferencialmente expresados (Zhang et al., Science 276: 1268-1272 (1997)), y han conducido a la identificación de nuevas dianas de fármacos.

El crecimiento aberrante y la supervivencia de células neoplásicamente transformadas se atribuyen a defectos genéticos subyacentes que alteran la homeostasis celular normal. La señalización de Wnt representa un mecanismo que contribuye a la progresión en un alto porcentaje de cánceres humanos para los que existen modelos animales y modelos de cultivo celular apropiados. La ß-catenina, un componente clave del mecanismo de señalización de Wnt, interacciona con la familia TCF/LEF de factores de transcripción y activa la transcripción de genes diana de Wnt. Estudios recientes han revelado que un conjunto de proteínas, tales como el supresor del tumor de la poliposis adenomatosa (APC) y la axina están implicadas en la regulación del mecanismo de señalización de Wnt. Además, se han hallado mutaciones en APC o ß-catenina que son responsables de la génesis de muchos cánceres humanos.

Por ejemplo, en el caso del cáncer colorrectal, la inactivación del supresor de tumores APC aparece de manera temprana en la progresión del tumor y proporciona una ventaja en el crecimiento resultante de la activación inapropiada de genes, tales como la ciclina D y c-myc (He et al., Science 281: 1509-1512 (1998)); Tetsu y McCormick, Nature 38: 422-426 (1999)). Estos genes son dianas de los factores de transcripción LEF/TCF que son activados por su interacción con ß-catenina, una proteína que normalmente disminuye su expresión mediante APC (Barker et al, Adv Cancer Res 77: 1-24 (2000); Polakis, Genes Dev 14: 1837-1851 (2000)). El favorecimiento de la expresión de este mecanismo de señalización en el cáncer también puede resultar de mutaciones sin sentido en el gen de ß-catenina (Rubinfeld et al., Science 275: 1790-1792 (1997)); Korinek et al., Science 275: 1784-1787 (1997)). Estas mutaciones hacen que la proteína ß-catenina sea resistente a la disminución de la expresión por APC. Recientemente se han identificado mutaciones en ß-catenina en una amplia variedad de tumores humanos y son particularmente frecuentes en cánceres hepatocelulares humanos (Polakis, 2000, supra). La activación de una señalización de ß-catenina también aparece cuando los receptores frizzled de la superficie celular son estimulados por ligandos Wnt secretados (Wodarz and Nusse, Annu Rev Cell Dev Biol 14: 59-88 (1998)). Aunque no se sabe si los ligandos Wnt per se contribuyen a los cánceres humanos, experimentos previos demostraron que su sobreexpresión en tejido mamario murino era tumorigénico (Nusse and Varmus, Cell 31: 99-109 (1982)). Se ha implicado el mecanismo de señalización de Wnt en la patogénesis de una variedad de cánceres, incluyendo el cáncer de colon, cáncer de mama, cáncer gástrico, cáncer de pulmón, y melanoma. De este modo, la gran mayoría de los tumores colorrectales contienen mutaciones en los genes que codifican para el supresor de tumores APC o ß-catenina (Polakis, Curr. Opin. Genet. Dev. 9: 15-21 (1999)). También se han identificado mutaciones activantes en la ß-catenina en cánceres de ovario y endometrio, tumores de riñón de Wilm y melanomas, demostrando que defectos en la señalización de Wnt-1 contribuye a la progresión de estos cánceres (Kobayashi et al., Jpn J Cancer Res 90: 55-9 (1999); Koesters et al, Cancer Res 59: 3880-2 (1999); Palacios and Hamallo, Cancer Res 58: 1344-7 (1998); Rimm et al., Am J Pathol 154: 325-9 (1999); Rubinfeld et al., Science 262: 1731-1734 (1993); Wright et al, Int J Cancer 82: 625-9 (1999)).

Se cree que las señales que provienen de los receptores Wnt continúan a través de la activación de "disheveled", que a su vez, regula de manera negativa de la glicógeno sintasa quinasa 3b (GSK3b) (Peifer and Polakis, Science 287: 1606-1609 (2000)). Esta quinasa fosforila normalmente la secuencia reguladora de ß-catenina que dirige la proteína a la degradación dependiente de ubiquitina (Miller and Moon, Genes & Dev. 10: 2527-2539 (1996)). La regulación negativa de GSK3b incrementa de este modo la estabilidad de ß-catenina y prolonga su activación de los factores de transcripción TCF/LEF (Molenaar, et al, Cell 86: 391-399 (1996); Behrens, et al., Nature 382: 638-642 (1996)). Aunque la activación de los factores de transcripción TCF/LEF por ß-catenina está bien establecida, aún existen mecanismos adicionales independientes de estos factores de transcripción por los que la ß-catenina podría iniciar la activación génica. Uno de estos mecanismos alternativos fue recientemente propuesto por Byers y colaboradores en un estudio que investiga el potencial por "cross-talk" entre la señalización por receptores de ácido retinoico (RAR) y ß-catenina (Easwaran, et al., Curr Biol 9: 1415-1418 (1999)). Se activó un gen informador sintético que contenía un elemento de respuesta a ácido retinoico de manera más robusta mediante retinoides siguiendo la sobreexpresión de ß-catenina en una línea celular cultivada.

El uso de anticuerpos monoclonales como agentes terapéuticos ha ganado una mayor aceptación con diversos anticuerpos monoclonales (mAbs) aprobados para uso humano o en la ultima fase de las pruebas clínicas. El primer mAb aprobado por la Administración de Alimentación y Fármacos (FDA) de Estados Unidos para el tratamiento del rechazo de aloinjertos fue anti-CD3 (OKT3) en 1986. Desde entonces, la pauta de progreso en el campo de los mAbs se ha acelerado considerablemente, particularmente desde 1994 en adelante, que condujo a la aprobación de siete mAbs adicionales para el tratamiento humano. Entre éstos se incluyen ReoPro® para el tratamiento de complicaciones de la angioplastia coronaria en 1994, Zenapax® (anti-CD25) para la prevención de rechazo de aloinjertos en 1997, Rituxan® (anti-CD20) para el tratamiento de linfomas de células B no de Hodgkin en 1997, Infliximab® (anti-TNF-a) inicialmente para el tratamiento de la enfermedad de Crohn en 1998 y posteriormente para el tratamiento de la artritis reumatoide en 1999, Simulect® (anti-CD25) para la prevención del rechazo de aloinjerto en 1998, Synagis® (proteína anti-F del virus sincitial respiratorio) para el tratamiento de infecciones respiratorias en 1998, y Herceptin® (anti-HER2/neu) para el tratamiento de tumores de mama metástasicos que sobreexpresan HER2 en 1998 (Glennie and Johnson, Immunol Today 21: 403-410 (2000)).

La utilidad demostrada de los anticuerpos terapéuticos en el tratamiento del cáncer humano en clínicas ha incitado recientemente una actividad intensa dirigidas al desarrollo y mejora de agentes inmunoterapéuticos. Idealmente, estas terapias requieren la presencia de antígenos de la superficie celular expresados en las células cancerosas a niveles significativamente más elevados que los presentes en tejidos normales en el cuerpo. Dicho criterio para la expresión diferencial en tumores en relación al tejido normal limitará obviamente el número de antígenos considerados deseables como dianas para el tratamiento del cáncer, tal como la inmunoterapia. Por lo tanto, sería deseable encontrar vías de aumentar selectivamente la expresión de antígenos de la superficie celular en células tumorales. En particular, los reactivos que selectivamente aumentarían el nivel de expresión de antígenos de células cancerosas en relación a células normales tendrían un gran potencial en la mejora del índice terapéutico para el tratamiento, tal como agentes inmunoterapéuticos dirigidos contra estos antígenos.

Descripción resumida de la invención

Se pueden identificar nuevas dianas de fármacos mediante análisis...

1. Uso de un agente antitumoral para la fabricación de un medicamento para el tratamiento en combinación con un retinoide de un tumor de un cáncer humano seleccionado entre cáncer de ovario, cáncer endometrial, tumor de riñón de Wilm, cáncer de colon, cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer gástrico, cáncer de pulmón, cáncer hepatocelular, melanoma o feocromocitoma, donde dicho agente antitumoral es un anticuerpo, una molécula antisentido, una ribozima o un ADN de triple hélice que se une a una proteína diana seleccionada del grupo que consiste en autotaxina, ligando 4-1BB, efrina b1, ISLR, M-ras, y ZO-1 o a un ácido nucleico que codifica dicha proteína diana.

2. Uso de un retinoide y un agente antitumoral para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un tumor de un cáncer humano seleccionado entre cáncer de ovario, cáncer endometrial, tumor de riñón de Wilm, cáncer de colon, cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer gástrico, cáncer de pulmón, cáncer hepatocelular, melanoma o feocromocitoma, donde dicho agente antitumoral es un anticuerpo, una molécula antisentido, una ribozima o un ADN de triple hélice que se une a una proteína diana seleccionada del grupo que consiste en autotaxina, ligando 4-1BB, efrina b1, ISLR, M-ras, y ZO-1, o a un ácido nucleico que codifica dicha proteína diana.

3. Uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que dicha proteína es una proteína de la superficie celular.

4. Uso según la reivindicación 1, en el que dicha proteína se selecciona del grupo que consiste en ligando 4-1BB, efrina b1, ISLR, M-ras, y ZO-1.

5. Uso según la reivindicación 4, en el que dicha proteína se selecciona del grupo que consiste en ligando 4-1BB, efrina b1 e ISLR.

6. Uso según la reivindicación 5, en el que dicha proteína se selecciona del grupo que consiste en ligando 4-1BB y efrina b1.

7. Uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que dicho retinoide se administra antes de la administración de dicho agente antitumoral.

8. Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que dicho retinol se administra simultáneamente con la administración de dicho agente antitumoral.

9. Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que dicho retinoide se administra después de la administración de dicho agente antitumoral.

10. Uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que dicho retinoide es ácido retinoico.

11. Uso según la reivindicación 1, en el que dicho anticuerpo es un fragmento de anticuerpo.

12. Uso según la reivindicación 11, en el que dicho fragmento de anticuerpo se selecciona del grupo que consiste en los fragmentos Fab, Fab', F(ab')₂, y Fv, diabodies, moléculas de anticuerpos de cadena única, y anticuerpos multiespecíficos formados a partir de fragmentos de anticuerpos.

13. Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, en el que el anticuerpo es un anticuerpo monoclonal, quimérico, humano o humanizado.

14. Uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, en el que el anticuerpo se conjuga a un agente citotóxico.

15. Uso según la reivindicación 14, en el que el agente citotóxico se selecciona del grupo que consiste en un agente quimioterapéutico, un maitansinoide, una caliqueamicina, un antifolato, una toxina enzimáticamente activa y un isótopo radioactivo.

16. Uso según la reivindicación 14, en el que el agente citotóxico es un maitansinoide.

17. Metodo de diagnóstico de un tumor de un cáncer humano seleccionado entre cáncer de ovario, cáncer endometrial, tumor de riñón de Wilm, cáncer de colon, cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer gástrico, cáncer de pulmón, cáncer hepatocelular, melanoma o feocromocitoma que comprende:

a) poner en contacto una muestra biológica obtenida de dicho paciente con ácido retinoico; y

b) detectar la expresión aumentada de una proteína diana en la muestra biológica tratada con el retinoide en relación a un tejido normal, donde la proteína diana se selecciona del grupo que consiste en autotaxina, ligando 4-1BB, efrina b1, ISLR, M-ras, y ZO-1.

18. Método según la reivindicación 17, en el que dicha proteína es una proteína de la superficie celular.

19. Método según la reivindicación 17, en el que dicha proteína diana se selecciona del grupo que consiste en ligando 4-1BB, efrina b1, ISLR, M-ras, y ZO-1.

20. Método según cualquiera de las reivindicaciones 17 a 19, en el que dicha detección de la expresión aumentada en la muestra biológica comprende detectar la expresión de la proteína con un anticuerpo o un fragmento de anticuerpo.

21. Método según la reivindicación 21, en el que dicho fragmento de anticuerpo se selecciona del grupo que consiste en los fragmentos Fab, Fab', F(ab')₂, y Fv, diabodies, moléculas de anticuerpos de cadena única, y anticuerpos multiespecíficos formados a partir de fragmentos de anticuerpos.

22. Método según cualquiera de las reivindicaciones 17 a 21, en el que el anticuerpo está marcado de manera detectable.

23. Método según cualquiera de las reivindicaciones 17 a 22, en el que dicha detección de la expresión aumentada de una proteína diana en la muestra biológica comprende detectar la expresión del ácido nucleico que codifica dicha proteína diana utilizando una sonda o cebadores.

24. Composición farmacéutica que comprende un retinoide y un agente antitumoral, en el que el agente antitumoral es un anticuerpo, una molécula antisentido, una ribozima o un ADN de triple hélice que se une a una proteína diana seleccionada del grupo que consiste en autotaxina, ligando 4-1BB, efrina b1, ISLR, M-ras, y ZO-1 o a un ácido nucleico que codifica dicha proteína diana

25. Composición farmacéutica según la reivindicación 24, en la que dicha proteína es una proteína de la superficie celular.

26. Composición farmacéutica según la reivindicación 24, en la que dicha proteína diana se selecciona del grupo que consiste en ligando 4-1BB, efrina b1, ISLR, M-ras, y ZO-1.

27. Composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 24 a 26, en la que el agente antitumoral es un fragmento de anticuerpo seleccionado del grupo que consiste en los fragmentos Fab, Fab', F(ab')₂, y Fv, diabodies, moléculas de anticuerpos de cadena única, y anticuerpos multiespecíficos formados a partir de fragmentos de anticuerpos.

28. Composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 24 a 27, en la que el agente antitumoral es un anticuerpo monoclonal, humano o humanizado o un fragmento de anticuerpo.

29. Composición farmacéutica según la reivindicación 28, en la que el anticuerpo se conjuga a un agente citotóxico.

30. Composición farmacéutica según la reivindicación 29, en la que el agente citotóxico se selecciona del grupo que consiste en un agente quimioterapéutico, un maitansinoide, una caliqueamicina, un antifolato, una toxina enzimáticamente activa y un isótopo radioactivo.

31. Composición farmacéutica según la reivindicación 30, en la que el agente citotóxico es un maitansinoide.

32. Agente antitumoral para su uso en el tratamiento en combinación con un retinoide de un tumor de un cáncer humano seleccionado entre cáncer de ovario, cáncer endometrial, tumor de riñón de Wilm, cáncer de colon, cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer gástrico, cáncer de pulmón, cáncer hepatocelular, melanoma o feocromocitoma, donde dicho agente antitumoral es un anticuerpo, una molécula antisentido, una ribozima o un ADN de triple hélice que se une a una proteína diana seleccionada del grupo que consiste en autotaxina, ligando 4-1BB, efrina b1, ISLR, M-ras, y ZO-1 o a un ácido nucleico que codifica dicha proteína diana.