DIMERO PEPTIDICO.

Un dímero peptídico, en el que dos monómeros peptídicos están unidos entre sí mediante un enlace disulfuro y dicho monómero peptídico es Cys Tyr Thr Trp Asn Gln Met Asn Leu (SEC ID Nº: 44)

Dímero peptídico.

Campo técnico

La presente invención se refiere a un dímero peptídico que puede producir un péptido antigénico tumoral con actividad inductora de células T citotóxicas y a una composición farmacéutica que contiene el mismo.

Antecedentes

La inmunidad mediada por células, particularmente por células T citotóxicas (de aquí en adelante referidas como "CTL") desempeña una función significativa en el rechazo in vivo de células tumorales o de células infectadas por virus. Los CTLs reconocen un complejo entre un péptido antigénico ("péptido antigénico tumoral") derivado de una proteína antigénica tumoral y un antígeno del MHC (complejo principal de histocompatibilidad) de clase I, que es referido como "antígeno HLA" en el caso de humanos, sobre una célula cancerosa y atacan y destruyen la célula.

Ejemplos típicos de proteínas antigénicas tumorales incluyen las enumeradas en la Table of Immunity, vol. 10:281, 1999. Ejemplos específicos incluyen los antígenos del melanosoma tales como la proteína específica de un tejido gp100 de melanocitos (J. Exp. Med., 179:1005, 1994), MART-1 (Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 91:3515, 1994) y tirosinasa (J. Exp. Med., 178:489, 1993), y marcadores tumorales como proteínas antigénicas distintas de las del melanoma tales como HER2/neu (J. Exp. Med., 181:2109, 1995), CEA (J. Natl. Cancer. Inst., 87:982, 1995) y PSA (J. Natl. Cancer. Inst., 89:293, 1997).

Un péptido antigénico tumoral es un péptido de 8 a 11 aminoácidos aproximadamente que puede ser producido mediante el procesamiento intracelular de una proteína antigénica tumoral por una proteasa en las células (Cur. Opin. Immunol., 5:709, 1993; Cur. Opin. Immunol., 5:719, 1993; Cell, 82:13, 1995; Immunol. Rev., 146:167, 1995). Según se describió anteriormente, el péptido antigénico tumoral así producido es presentado en la superficie de la célula como un complejo con un antígeno del MHC de clase I (antígeno HLA) y reconocido por los CTLs. Por consiguiente, con el fin de desarrollar un agente inmunoterapéutico para el cáncer (vacuna contra el cáncer) que utilice la destrucción de las células tumorales por los CTLs, es muy importante identificar un péptido antigénico tumoral de una proteína antigénica tumoral, péptido que sea capaz de inducir CTLs eficazmente.

Di Modugno (J. Immunotherapy, 20 (1997), 431-436) describe estudios en los que péptidos derivados del antígeno ErbB-2 asociado a tumores, así como hetero y homodímeros derivados de los mismos, fueron examinados para determinar su capacidad para unirse a HLA-A2.1. Marastoni (Eur. J. Med. Chem., 35 (2000), 593-598) informa sobre estudios acerca del diseño de péptidos diméricos obtenidos a partir de un epítopo derivado de LMP2 del virus de Epstein-Barr subdominante y su capacidad para unirse a moléculas de HLA-A2.

WO 02/079253 describe un péptido antigénico del cáncer modificado derivado del antígeno WT1 asociado a tumores y su utilización como vacuna o como base para el desarrollo de vacunas de ADN.

Descripción de la invención

Uno de los fines de la presente invención es proporcionar un nuevo antígeno tumoral derivado de un péptido antigénico tumoral útil in vivo.

Los presentes inventores han encontrado que algunos péptidos que se ha demostrado que son péptidos antigénicos tumorales contienen residuo(s) de cisteína y que un dímero formado por tales péptidos muestra sorprendentemente actividad para inducir de CTLs ("actividad inductora de CTLs") equivalente a la del monómero tras su administración, y establecieron la presente invención.

Por tanto, la presente invención incluye lo siguiente.

        (1) Un dímero peptídico, en el que dos monómeros peptídicos están unidos entre sí mediante un enlace disulfuro y dicho monómero peptídico es Cys Tyr Thr Trp Asn Gln Met Asn Leu (SEC ID Nº: 44).

        (2) Una composición farmacéutica que contiene el dímero peptídico de acuerdo con (1) junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable.

        (3) La composición farmacéutica de acuerdo con (2) que es una vacuna contra el cáncer.

        (4) Utilización del dímero peptídico de acuerdo con (1) en la producción de una vacuna contra el cáncer.

        (5) El dímero peptídico de (1) para ser utilizado como vacuna contra el cáncer.

        (6) La utilización de una cantidad terapéuticamente eficaz del dímero peptídico de acuerdo con (1) para la preparación de una composición farmacéutica para tratar o prevenir el cáncer en un paciente.

        (7) El dímero peptídico de (1) para ser utilizado en el tratamiento o la prevención del cáncer en un paciente.

        (8) La utilización de (6) o del dímero peptídico de (7), donde dicho paciente es un paciente positivo para WT1.

Breve descripción de las figuras

La Fig. 1 es una gráfica que muestra que un dímero peptídico (SEC ID Nº: 44) induce CTLs en ratones transgénicos.

Modo mejor de llevar a cabo la invención

En el dímero peptídico de la presente invención, dos monómeros peptídicos (SEC ID Nº: 44) son dimerizados mediante enlace(s) disulfuro entre grupos SH de al menos un par de residuos de cisteína presentes en los monómeros peptídicos.

El dímero peptídico de la presente invención tiene actividad inductora de CTLs y los CTLs así inducidos pueden ejercer una actividad antitumoral a través de los efectos citotóxicos o de la producción de linfoquinas. Por consiguiente, el dímero peptídico de la presente invención puede ser utilizado como vacuna contra el cáncer para el tratamiento o la prevención de cánceres (tumores).

El monómero peptídico que constituye el dímero peptídico de la presente descripción consta de 7-30 residuos de aminoácidos que contienen al menos un residuo de cisteína, y produce un péptido antigénico tumoral que tiene actividad inductora de CTLs. La frase "produce un péptido antigénico tumoral" significa que el monómero peptídico tiene la característica de hacer que un péptido antigénico tumoral sea capaz de unirse a un antígeno HLA y ser reconocido por células T citotóxicas (CTL). Cualquier monómero peptídico puede ser utilizado en la presente descripción sin limitación, siempre que tenga actividad inductora de CTL; sin embargo, se prefiere un monómero peptídico derivado del gen supresor de tumores WT1 del tumor de Wilms humano y que contenga al menos un residuo de cisteína. El gen supresor de tumores WT1 es expresado en varios tipos de tumores (Cell, 60: 509, 1990; Nº de Acceso de la base de datos NCBI XP_034418, SEC ID Nº: 1). El gen WT1 fue aislado del cromosoma 11p13 como uno de los genes causantes de los tumores de Wilms sobre la base del análisis del síndrome de WAGR que estaba complicado con tumores de Wilms, aniridia, anomalía urogenital, retraso mental, etc. (Nature, 343:774, 1990). El ADN genómico de WT1 tiene 50 kb aproximadamente, y está compuesto por diez exones, de los cuales el ADNc comprende 3 kb aproximadamente. La secuencia de aminoácidos deducida a partir del ADNc es como la mostrada en la SEC ID Nº: 1 (Cell, 60:509, 1990). Se ha sugerido que el gen WT1 estimula el crecimiento de células leucémicas a partir de los hechos de que el gen WT1 está altamente expresado en la leucemia humana, y de que las células leucémicas son suprimidas en su crecimiento celular por el tratamiento con oligómeros antisentido de WT1 (JP-A-104627/1997). Posteriormente, se ha demostrado el gen WT1 es una nueva proteína antigénica tumoral de la leucemia y de cánceres sólidos (J. Immunol., 164:1873-80, 2000 y J. Clin. Immunol., 20:195-202, 2000) a partir de los hechos de que el gen WT1 está también altamente expresado en cánceres sólidos tales como el cáncer gástrico, el cáncer de colon, el cáncer de pulmón, el cáncer de mama, el cáncer embrionario, el cáncer de piel,...

1. Un dímero peptídico, en el que dos monómeros peptídicos están unidos entre sí mediante un enlace disulfuro y dicho monómero peptídico es Cys Tyr Thr Trp Asn Gln Met Asn Leu (SEC ID Nº: 44).

2. Una composición farmacéutica que contiene el dímero peptídico de acuerdo con la reivindicación 1 junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable.

3. La composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 2, que es una vacuna contra el cáncer.

4. Utilización del dímero peptídico de acuerdo con la reivindicación 1 en la preparación de una vacuna contra el cáncer.

5. El dímero peptídico de la reivindicación 1 para ser utilizado como vacuna contra el cáncer.

6. Utilización de una cantidad terapéuticamente eficaz del dímero peptídico de acuerdo con la reivindicación 1 para la preparación de una composición farmacéutica para el tratamiento o la prevención del cáncer en un paciente.

7. El dímero peptídico de la reivindicación 1 para ser utilizado en el tratamiento o la prevención del cáncer en un paciente.

8. La utilización de la reivindicación 6, en la que dicho paciente es un paciente positivo para WT1.

9. El dímero peptídico de la reivindicación 7 para ser utilizado en el tratamiento o la prevención del cáncer en un paciente, donde dicho paciente es un paciente positivo para WT1.