METODO Y APARATO PARA AMPLIFICACION DE SECUENCIAS DE ACIDO NUCLEICO POR UTILIZACION DE CONVECCION TERMICA.
Un método de amplificación de secuencias de ácido nucleico utilizando la reacción en cadena de la polimerasa (PCR),
método que comprende: un paso de inyectar en un recipiente de reacción una muestra que contiene un DNA molde que tiene secuencias de ácido nucleico diana a amplificar, DNA-polimerasa, desoxiadenosina-trifosfato, desoxicitidina-trifosfato, desoxiguanosina-trifosfato, desoxitimidina-trifosfato, y al menos dos iniciadores oligonucleotídicos complementarios al término 3'' de cada una de las secuencias de ácido nucleico diana; y un paso de mantenimiento de una distribución espacial específica de temperatura en la muestra por puesta en contacto térmicamente con la muestra de una pluralidad de fuentes de calor que suministran calor a, o disipan calor de regiones específicas de la muestra de tal modo que una región de temperatura relativamente alta está localizada a una altura inferior que una región de temperatura relativamente baja, en donde la distribución espacial específica de temperatura comprende regiones espaciales específicas cada una de las cuales satisface una condición de temperatura adecuada para (i) un paso de desnaturalización en el cual los DNAs bicatenarios llegan a separarse en DNAs monocatenarios, (ii) un paso de reasociación en el cual los DNAs monocatenarios formados en el paso de desnaturalización se hibridan a los iniciadores para formar complejos DNA-iniciador, o (iii) un paso de polimerización en el cual los iniciadores contenidos en los complejos DNA-iniciador se extienden por la reacción de polimerización, y en donde la distribución espacial específica de temperatura es una distribución de temperatura que induce circulación de la mezcla por convección térmica de tal modo que los pasos de desnaturalización, reasociación, y polimerización tienen lugar secuencial y repetidamente en el interior de la muestra.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: AHRAM BIOSYSTEMS INC.
Nacionalidad solicitante: República de Corea.
Dirección: 405 JANGAN BUILDING, 464-1 JANGAN-3-DONG, DONGDAEMOON-GU,SEOUL 130-103.
Inventor/es: HWANG,HYUN JIN, KIM,JEONG HEE, JEONG,KYUNGHOON.
Fecha de Publicación: .
Clasificación PCT:
- B01L7/00 TECNICAS INDUSTRIALES DIVERSAS; TRANSPORTES. › B01 PROCEDIMIENTOS O APARATOS FISICOS O QUIMICOS EN GENERAL. › B01L APARATOS DE LABORATORIO PARA LA QUIMICA O LA FISICA, DE USO GENERAL (aparatos de uso médico o farmacéutico A61; aparatos para aplicaciones industriales o aparatos de laboratorio cuya estructura y funciones son comparables a las de aparatos industriales similares, ver las clases relativas a los aparatos industriales, en particular las subclases B01 y C12; aparatos de separación o de destilación B01D; dispositivos de mezcla o de agitación B01F; atomizadores B05B; tamices, cribas B07B; tapones, capuchones B65D; manipulación de líquidos en general B67; bombas de vacío F04; sifones F04F 10/00; grifos, válvulas F16K; tubos, empalmes para tubos F16L; aparatos especialmente adaptados al estudio y análisis de materiales G01, particularmente G01N; aparatos eléctricos u ópticos, ver las subclases apropiadas en las secciones G y H). › Aparatos de calentamiento o de enfriamiento (evaporadores B01D 1/00; secado de gases o vapores, p. ej. desecadores, B01D 53/26; autoclaves B01J 3/04; hornos de secado F26B; altos hornos, hornos F27 ); Dispositivos de aislamiento térmico.
- C12M1/00 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12M EQUIPOS PARA ENZIMOLOGIA O MICROBIOLOGIA (instalaciones para la fermentación de estiércoles A01C 3/02; conservación de partes vivas de cuerpos humanos o animales A01N 1/02; aparatos de cervecería C12C; equipos para la fermentación del vino C12G; aparatos para preparar el vinagre C12J 1/10). › Equipos para enzimología o microbiología.
- C12N15/09 C12 […] › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Tecnología del ADN recombinante.
- C12N15/10 C12N 15/00 […] › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
- C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
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