PROCEDIMIENTO DE OBTENCION DE UNA PROTEINA DE LA PLANTA CUCUMIS SATIVUS L., DENOMINADA CUSATIVINA, UTIL COMO INACTIVADOR DEL ACIDO RIBONUCLEICO E INHIBIDOR DE LA BIOSINTESIS DE PROTEINAS.
COMPRENDE: (A) EXTRAER SEMILLAS SECAS DE CUCUMIS SATIVUS L. (B) FILTRAR,
ACIDULAR EL EXTRACTO LIQUIDO, CENTRIFUGARLO Y CROMATOGRAFIARLO; (C) SOMETER EL FLUIDO OBTENIDO A CROMATOGRAFIA DE INTERCAMBIO IONICO; (D) ELUIR LA COLUMNA CON UNA SOLUCION DE NACL Y NAPOSI4 SCHSI2 SC; (E) SOMETER A ULTRAFILTRACION LA PROTEINA ELUIDA, A CROMATOGRAFIA Y A CROMATOGRAFIA DE INTERCAMBIO IONICO, OBTENIENDOSE FRACCIONES QUE SE CONCENTRAN POR ULTRAFILTRACION Y SE CROMTOGRAFIAN PARA DAR UNA FRACCION CONTENIENDO LA CUSATIVINA; (F) PURIFICAR LA CUSATIVINA MEDIANTE DIALISIS, CROMATOGRAFIA Y POSTERIOR LIOFILIZACION. APLICACION COMO INACTIVADOR DEL ACIDO RIBONUCLEICO E INHIBIDOR DE LA SINTESIS DE PROTEINAS CON POTENCIAL UTILIDAD EN LA TERAPIA DEL CANCER Y EL SIDA. DE LAS SEMILLAS DE LA PLANTA CUCUMIS SATIVUS L. SE HA OBTENIDO UNA PROTEINA QUE SE COMPORTA COMO INHIBIDOR CATALITICO DE LA BIOSINTESIS DE PROTEINAS TANTO DE SISTEMAS PROCARIONTES COMO EUCARIONTES. LA PROTEINA QUE DENOMINAMOS CUSATIVINA SE HA OBTENIDO Y PURIFICADO HASTA HOMOGENEIDAD ELECTROFORETICAMEDIANTE LOS SIGUIENTES PASOS: A) OBTENCION DE EXTRACTOS SALINOS A PARTIR DE SEMILLAS; B) OBTENCION DE EXTRACTOS ACIDIFICADOS A PARTIR DE LOS EXTRACTOS ANTERIORES; C) CROMATOGRAFIA A TRAVES DE S SEPHAROSE FAST FLOW (PHARMACIA-LKB); D) ULTRAFILTRACION A TRAVES DE MEMBRANA YM-10 DE AMICON; E) CROMATOGRAFIA A TRAVES DE SEPHADEX G 75 (PHARMACIA-LKB); F) CROMATOGRAFIA A TRAVES DE CM SEPHAROSE FAST FLOW; G) ULTRACENTRIFUGACION A TRAVES DE MEMBRANA YM-10 DE AMICON; H) CROMATOGRAFIA A TRAVES DE SUPERDEX 75-F.P.L.C. (PHARMACIA-LKB); I) DIALISIS; J) CROMATOGRAFIA A TRAVES DE MONO-S (F.P.L.C., PHARMACIALKB); K) DIALISIS Y LIOFILIZACION DE LA PROTEINA RESULTANTE.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: UNIVERSIDAD DE VALLADOLID.
Nacionalidad solicitante: España.
Provincia: VALLADOLID.
Inventor/es: GIRBES JUAN,TOMAS, ARIAS VALLEJO,FCO. JAVIER, IGLESIAS ALVAREZ,ROSARIO, FERRERAS RODRIGUEZ,JOSE MIGUEL, ROJO RODRIGUEZ, M. ANGELES, MENDEZ PORLAN, ENRIQUE.
Fecha de Solicitud: 28 de Mayo de 1992.
Fecha de Publicación: .
Fecha de Concesión: 21 de Noviembre de 1994.
Clasificación Internacional de Patentes:
- A61K37/54
- C12N9/22 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › Ribonucleasas.
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