Uso de TSG-6 para el tratamiento de la osteoporosis.

Un polipéptido TSG-6, o un polinucleótido que codifica un polipéptido TSG-6,

para su uso en un procedimiento para el tratamiento o prevención de la osteoporosis, en el que el polipéptido TSG-6 o polinucleótido no se administra con pentraxina larga 3 (PTX3).

Uso de TSG-6 para el tratamiento de la osteoporosis.

Campo de la Invención [0001] La presente invencion se refiere a tratar o prevenir la osteoporosis.

Antecedentes de la Invención [0002] El gen 6 estimulado por el factor de la necrosis tumoral (TNF) (TSG-6) es una proteina inducida por inflamacion con funciones protectoras en la artritis. TSG-6, el producto secretado -35 kDa del gen 6 estimulado por TNF, se expresa en respuesta a mediadores inflamatorios y factores de crecimiento, donde se cree que tiene poca o ninguna expresion constitutiva de la proteina en tejido sanos (Milner & Day (2003) J. Cell Sci. 116, 1863-1873) . [0003] Hay una creciente evidencia de que TSG-6, mientras que se induzca en respuesta a la inflamacion, tiene propiedades antiinflamatorias y condroprotectoras, convirtiendola en un inhibidor endogeno de la destruccion articular. A este respecto, se ha descubierto que TSG-6 tiene diversos actividades biologicas, tales como la inhibicion de la migracion de neutrofilos, la regulacion por disminucion de la actividad de la plasmina, y la reticulacion de las cadenas de hialuronano (HA) , que suelen contribuir a sus propiedades condroprotectores (Wisniewski y col. (1996) J. Immunol. 156, 1609-1615; y Milner y col., (2006) Biochem. Soc. Trans. 34, 446-450) . [0004] TSG-6, que esta compuesta casi en su totalidad de dominios Link y CUB C contiguos, se une a una diversidad de proteinas y ligandos de glicosaminoglicanos (incluyendo HA, condroitin-4-sulfato, agrecano, inter-ainhibidor (IaI) , pentraxina 3, trombospondina-1, fibronectina y heparina/sulfato de heparano) , donde la mayoria de estas interacciones estan mediadas a traves de su dominio del modulo Link. Estudios sobre mutagenesis han revelado que hay presentes al menos tres superficies de union a ligando no solapantes en el modulo Link (Mahoney y col. (2005) J. Biol. Chem. 280, 27044-27055; y Kuznetsova y col. (2005) J. Biol. Chem. 280, 30899-30908) . Hasta la fecha, el unico ligando identificado para el dominio CUB C es la fibronectina (DJ Mahoney & AJ Day, datos no publicados) . Ademas, este dominio contiene un sitio de union a cation divalente (Rugg y col. (2005) J. Biol. Chem. 280, 25674-25686) . [0005] Se ha detectado TSG-6 en el contexto de enfermedades inflamatorias, tales como artritis reumatoide (AR) , donde esta presente en el liquido sinovial, el cartilago y la sinovia. Es probable que TSG-6 se produzca localmente en tejidos articulares, ya que su expresion puede inducirse en condrocitos humanos cultivados por TNF, IL-1, IL-6, TGF-1 y PDGF y se expresa constitutivamente por los sinoviocitos de pacientes con AR, donde su produccion se potencia adicionalmente por el tratamiento con IL-1, TNF y IL-17 (Milner y col., (2006) Biochem. Soc. Trans. 34, 446450) . [0006] De forma importante, varios estudios recientes han revelado que TSG-6 tiene una funcion protectora en modelos experimentales de artritis. Por ejemplo, en un modelo de artritis inducida por colageno (AIC; una poliartritis autoinmune con una histopatologia similar a la AR humana) , hubo una aparicion tardia de los sintomas y una reduccion de tanto la incidencia de la enfermedad como de la inflamacion/destruccion articular en ratones transgenicos TSG-6 o ratones no manipulados tratados sistemicamente con TSG-6 humana recombinante (Mindrescu y col. (2000) Arthritis Rheum. 43, 2668-2677; y Mindrescu y col. (2002) Arthritis Rheum. 46, 2453-2464) . En animales transgenicos TSG-6, se observo un efecto de mejora comparable a un tratamiento con anticuerpos anti-TNF. Ademas, en ratones transgenicos TSG-6 especifico de cartilago, la instigacion de artritis inducida por antigeno (AIA; un modelo de artritis monoarticular) dio como resultado un dano del cartilago tardio comparado con los controles, con una degradacion reducida de agrecano por MMP y agrecanasa, y hubo evidencia de regeneracion del cartilago, 4-5 semanas despues de la aparicion de la enfermedad en estos animales (Glant y col. (2002) Arthritis Rheum. 46, 2207-2218) . Se observaron efectos condroprotectores similares en ratones no manipulados en los que se inyecto TSG-6 murina recombinante TSG-6 directamente en la articulacion afectada en AIA o por via intravenosa en artritis inducida por proteoglicano (AIP; un modelo de AR humana) (Bardos y col. (2001) Am. J. Pathol. 159, 17111721) .

Los efectos antiinflamatorios y condroprotectores de TSG-6 observados en estos estudios se deben probablemente a mas de un mecanismo. Sobre todo, TSG-6 es un potente inhibidor de la extravasacion de neutrofilos in vivo y tambien esta implicado en la inhibicion de la red de proteasa a traves de su potenciacion de la actividad anti-plasmina de IaI, donde la plasmina es un regulador clave de la proteolisis durante la inflamacion, por ejemplo, a traves de su activacion de MMP (Wisniewski y col. (1996) J. Immunol. 156, 1609-1615; y Getting y col.

(2002) J. Biol. Chem. 277, 51068-51076) . A este respecto, los ratones que carecen de TSG-6 desarrollan una forma acelerada y mucho mas grave de AIP, con una degradacion del cartilago y erosion osea rapida y extensa (Szanto y col. (2004) Arthritis Rheum. 50, 3012-3022) . Se sugirio el aumento de la infiltracion de neutrofilos y la actividad de la plasmina para tener en cuenta estos efectos en los ratones TSG-6-/-.

Resumen de la invención [0008] Los presentes inventores han mostrado que TSG-6 inhibe la resorcion osea por osteoclastos. Los osteoclastos son celulas multinucleadas grandes que se obtienen a partir del linaje de monocitos/macrofagos y degradan la matriz osea y los minerales en el proceso de resorcion osea. Los presentes inventores tambien han mostrado que la ausencia de TSG-6 en ratones con genes manipulados TSG-6 conduce a un aumento de la resorcion osea por osteoclastos. Los presentes inventores han mostrado que TSG-6 es util en el tratamiento y la prevencion de una enfermedad o afeccion osea asociada con la resorcion osea por osteoclastos. Los presentes inventores tambien han demostrado que la administracion de osteoprotegerina (OPG) en combinacion con TSG-6 da como resultado un efecto sinergico. Una combinacion de TSG-6 y OPG inhibe la resorcion osea por osteoclastos en mayor medida que la suma de cada factor en solitario.

De acuerdo con la presente invencion, se proporciona de este modo un polipeptido TSG-6, o un polinucleotido que codifica un polipeptido TSG-6, para su uso en un procedimiento para el tratamiento o prevencion de la osteoporosis en el que el polipeptido TSG-6 o polinucleotido no se administra con pentraxina larga 3 (PTX3) . En una realizacion preferida, el polipeptido TSG-6 o polinucleotido se administra en combinacion con una cantidad terapeutica o profilacticamente eficaz de un polipeptido OPG, un polinucleotido que codifica un polipeptido OPG o un mimetico OPG.

La presente invencion tambien proporciona el uso de un polipeptido TSG-6, o un polinucleotido que codifica un polipeptido TSG-6, en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento o la prevencion de la osteoporosis, en el que el polipeptido TSG-6 o polinucleotido no se administra con pentraxina larga 3 (PTX3) . En una realizacion preferida, el medicamento se administra al sujeto en combinacion con una cantidad terapeutica o profilacticamente eficaz de un polipeptido OPG, un polinucleotido que codifica un polipeptido OPG o un mimetico OPG.

La invencion proporciona adicionalmente:

-un polipeptido TSG-6, o un polinucleotido que codifica un polipeptido TSG-6, y un polipeptido OPG, un polinucleotido que codifica un polipeptido OPG o un mimetico OPG para su uso en un procedimiento para el tratamiento o prevencion de la osteoporosis; y

- un producto que contiene:

(a) un polipeptido TSG-6, o un polinucleotido que codifica un polipeptido TSG-6; y

(b) un polipeptido OPG, un polinucleotido que codifica un polipeptido OPG o un mimetico OPG;

para su uso simultaneo, separado o secuencial en el tratamiento o prevencion de la osteoporosis.

Una ventaja de la presente invencion es que el polipeptido TSG-6 o polinucleotido puede tener efectos antiinflamatorios y/o condroprotectores ademas de inhibir la resorcion osea por osteoclastos. Estos efectos antiinflamatorios y/o condroprotectores pueden resultar de la inhibicion de la migracion de neutrofilos, la regulacion por disminucion de la actividad de la plasmina y/o la reticulacion mediada por TSG-6 de cadenas de HA.

Breve Descripción de las Figuras

La figura 1 muestra el efecto de TSG-6 en la osteoclastogenesis. Se determino la formacion de osteoclastos humanos mediada por sRANKL/M-CSF en ausencia (barras claras en el lado derecho) y en presencia (barras oscuras en el lado izquierdo) de TSG-6 humana recombinante (25 ng/ml (0, 8 nM) ) . Los datos (n = 8 laminas de dentina) se expresan como los valores medios ± E.S. de 2 experimentos... [Seguir leyendo]

1. Un polipeptido TSG-6, o un polinucleotido que codifica un polipeptido TSG-6, para su uso en un procedimiento para el tratamiento o prevencion de la osteoporosis, en el que el polipeptido TSG-6 o polinucleotido no se administra con pentraxina larga 3 (PTX3) .

2. Un polipeptido TSG-6 o polinucleotido para su uso de acuerdo con la reivindicacion 1, en el que dicho polipeptido TSG-6 comprende:

(a) la secuencia aminoacidica de SEQ ID NO: 2 o 5;

(b) una variante de la misma que tiene al menos el 50% de identidad con respecto a la secuencia aminoacidica de SEQ ID NO: 2 o 5 y el receptor activador de la actividad de union del ligando NFKB (RANKL) ; o

(c) un fragmento de (a) o (b) que tiene actividad de union a RANKL.

3. Un polipeptido TSG-6 o polinucleotido para su uso de acuerdo con la reivindicacion 2, en el que dicho polipeptido consiste en la secuencia mostrada en la SEQ ID NO: 2, 5, 9, 10 u 11.

4. Un polipeptido TSG-6 o polinucleotido para su uso de acuerdo con la reivindicacion 1, en el que dicho polinucleotido comprende:

(a) la secuencia codificante de SEQ ID NO: 1, 4, 8 o 12;

(b) una secuencia que se degenera como resultado del codigo genetico con respecto a la secuencia como se define en (a) ;

(c) una secuencia que tiene al menos el 60% de identidad con respecto a una secuencia como se define en (a) o (b) y que codifica un polipeptido que tiene actividad de union a RANKL; o

(d) un fragmento de una cualquiera de las secuencias como se define en (a) , (b) o (c) que codifica un polipeptido que tiene actividad de union a RANKL.

5. Un polipeptido TSG-6 o polinucleotido para su uso de acuerdo con la reivindicacion 4, en el que dicho polinucleotido consiste en la secuencia de acido nucleico mostrada en la SEQ ID NO: 1, 4, 8 o 12.

6. Un polipeptido TSG-6 o polinucleotido para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el polipeptido TSG-6 o polinucleotido se administra en combinacion con una cantidad terapeutica o profilacticamente eficaz de un polipeptido de osteoprotegerina (OPG) , un polinucleotido que codifica un polipeptido OPG o un mimetico OPG.

7. Un polipeptido TSG-6 o polinucleotido para su uso de acuerdo con la reivindicacion 6, en el que el polipeptido OPG:

(a) comprende, o consiste en, la secuencia aminoacidica de SEQ ID NO: 15;

(b) comprende una variante de la misma que tiene al menos el 50% de identidad con respecto a la secuencia aminoacidica de SEQ ID NO: 15 y que tiene actividad de union a RANKL; o

(c) comprende un fragmento de (a) o (b) que tiene actividad de union a RANKL.

8. Un polipeptido TSG-6 o polinucleotido para su uso de acuerdo con la reivindicacion 6, en el que el polinucleotido OPG comprende:

(a) la secuencia codificante de SEQ ID NO: 14;

(b) una secuencia que se degenera como resultado del codigo genetico con respecto a la secuencia como se define en (a) ;

(c) una secuencia que tiene al menos el 60% de identidad con respecto a una secuencia como se define en (a) o (b) y que codifica un polipeptido que tiene actividad de union a RANKL; o

(d) un fragmento de una cualquiera de las secuencias como se define en (a) , (b) o (c) que codifica un polipeptido que tiene actividad de union a RANKL.

9. Un polipeptido TSG-6, o un polinucleotido que codifica un polipeptido TSG-6, y un polipeptido OPG, un polinucleotido que codifica un polipeptido OPG o un mimetico OPG para su uso en un procedimiento para el tratamiento o prevencion de la osteoporosis.

10. Un polipeptido TSG-6 o polinucleotido para su uso de acuerdo con la reivindicacion 9, en el que (a) el

polipeptido TSG-6 o el polinucleotido y (b) el polipeptido, polinucleotido o mimetico OPG se administran simultaneamente, por separado o secuencialmente.

11. Uso de un polipeptido TSG-6, o un polinucleotido que codifica un polipeptido TSG-6, en la fabricacion de un medicamento para el tratamiento o la prevencion de la osteoporosis, en el que el polipeptido TSG-6 o 15 polinucleotido no se administra con pentraxina larga 3 (PTX3) .

12. Un producto que contiene:

(a) un polipeptido TSG-6, o un polinucleotido que codifica un polipeptido TSG-6; y 20

(b) un polipeptido OPG, un polinucleotido que codifica un polipeptido OPG o un mimetico OPG;

para su uso simultaneo, separado o secuencial en el tratamiento o prevencion de la osteoporosis.