Método para aislar moléculas de ARN pequeño.
Un metodo de enriquecimiento de ARN pequeno a partir de celulas que comprende:
a) lisar las celulas con una solucion de lisis para producir un lisado; b) anadir una solucion de alcohol al lisado; c) aplicar el lisado a un soporte solido; y d) eluir las moleculas de ARN del soporte solido, en donde la solucion de lisis comprende guanidinio a una concentracion de entre 2,0 M y 4,0 M, y en donde la cantidad de solucion de alcohol anadida al lisado le proporciona una concentracion de alcohol de aproximadamente 55 % a 70 %;
y
en donde al menos se aislan aproximadamente 25 %, 30 %, 35 %, 40 %, 45 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 %, 80 %, 85 %, 90 %, 95 % de las moleculas de ARN pequeno de aproximadamente 100 nucleotidos o menos en una muestra, o alternativamente en donde el ARN pequeno de aproximadamente 100 nucleotidos o menos en una muestra se enriquece aproximadamente o al menos aproximadamente 3x, en moleculas de ARN pequeno segun lo determinado por la masa de moleculas de ARN pequeno en relacion con la masa de las moleculas totales de ARN antes de colocar el lisado en el soporte solido en comparacion con despues de eluir el ARN del soporte solido.
Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E18166823.
Solicitante: LIFE TECHNOLOGIES CORPORATION.
Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.
Dirección: 5823 Newton Drive Carlsbad, CA 92008 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.
Inventor/es: CONRAD,RICHARD.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C07H1/08 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07H AZUCARES; SUS DERIVADOS; NUCLEOSIDOS; NUCLEOTIDOS; ACIDOS NUCLEICOS (derivados de ácidos aldónicos o sacáricos C07C, C07D; ácidos aldónicos, ácidos sacáricos C07C 59/105, C07C 59/285; cianohidrinas C07C 255/16; glicales C07D; compuestos de constitución indeterminada C07G; polisacáridos, sus derivados C08B; ADN o ARN concerniente a la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos o su aislamiento, preparación o purificación C12N 15/00; industria del azúcar C13). › C07H 1/00 Procesos para la preparación de derivados de azúcar. › a partir de productos naturales.
- C12N15/10 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
PDF original: ES-2793249_T3.pdf
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