Modificación genética de ratas.

Un método para generar una línea de células madre embrionarias (ES) de rata,

que comprende:

(a) cultivar in vitro una primera capa de células alimentadoras que no se modifica para expresar el factor inhibidor de leucemia (LIF) y un embrión de rata en etapa de mórula o blastocisto,

en donde la zona pelúcida del embrión de rata en etapa de mórula o blastocisto se ha eliminado, y

en donde las condiciones de cultivo mantienen la pluripotencia de una célula ES de rata y comprenden un medio que comprende aproximadamente 50 U/mL a aproximadamente 150 U/mL de LIF, y una combinación de inhibidores que consiste en un inhibidor de MEK y un inhibidor de GSK3; y

(b) transferir una excrecencia de una masa amorfa no diferenciada de células ES de rata a un pozo de cultivo in vitro que comprende una segunda capa de células alimentadoras que no está modificada para expresar LIF;

(c) cultivar la excrecencia en condiciones que comprenden el medio que comprende aproximadamente 50 U/mL a aproximadamente 150 U/mL de LIF, y una combinación de inhibidores que consisten en un inhibidor de MEK y un inhibidor de GSK3, manteniendo así la pluripotencia de las células ES de rata; y

(d) modificar las células ES de rata para comprender una modificación genética específica que comprende al menos una inserción de un polinucleótido heterólogo en el genoma de las células ES de rata, en donde las células ES de rata son capaces de transmitir la modificación genética específica a través de la línea germinal.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2014/017452.

Solicitante: REGENERON PHARMACEUTICALS, INC..

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 777 Old Saw Mill River Road Tarrytown, NY 10591 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: VALENZUELA, DAVID, M., AUERBACH,WOJTEK, FRENDEWEY,DAVID, LAI,KA-MAN VENUS, LEE,JEFFREY D, HESLIN,DAVID.

Fecha de Publicación: 16 de Octubre de 2019.

Clasificación Internacional de Patentes:

A01K67/02 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA. › A01 AGRICULTURA; SILVICULTURA; CRIA; CAZA; CAPTURA; PESCA. › A01K CRÍA DE ANIMALES; AVICULTURA; APICULTURA; PISCICULTURA; PESCA; ANIMALES PARA CRIA O REPRODUCCIÓN, NO PREVISTOS EN OTRO LUGAR; NUEVAS VARIEDADES DE ANIMALES. › A01K 67/00 Cría u obtención de animales, no prevista en otro lugar; Nuevas razas de animales. › Cría de vertebrados.
A01K67/027 A01K 67/00 […] › Nuevas razas de vertebrados.
A61D19/04 A […] › A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE. › A61D INSTRUMENTOS, DISPOSITIVOS, UTILES O METODOS DE LA MEDICINA VETERINARIA. › A61D 19/00 Instrumentos o procesos para la reproducción o la fertilización. › para el trasplante de embriones.
C12N15/85 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › para células animales.
C12N15/877 C12N 15/00 […] › Técnicas para producir nuevos embriones clonados de mamíferos.
C12N5/0735 C12N […] › C12N 5/00 Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales, p. ej. líneas celulares; Tejidos; Su cultivo o conservación; Medios de cultivo para este fin (reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00). › Células madre embrionarias; Células germinales embrionarias.

PDF original: ES-2758477_T3.pdf

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