15 inventos, patentes y modelos de VALENZUELA, DAVID, M.

(10/06/2020) Un ratón cuyo genoma comprende una inactivación de un locus del ARN no codificante largo (ARNlnc) Pint endógeno, en donde la inactivación (i) da como resultado que el ratón muestra un fenotipo asociado a envejecimiento prematuro que comprende (a) una tasa de crecimiento más lenta que la de un control de tipo silvestre; (b) un declive en la fuerza muscular; (c) fibrosis; (d) un contenido de grasa corporal más bajo que el del control de tipo silvestre; (e) una densidad mineral ósea del fémur y una masa ósea más baja que la del control de tipo silvestre; (f) una masa muscular disminuida en comparación con la del control de tipo silvestre; (g) una disminución en la longevidad media; (h) cifolordosis;…

(12/02/2020) Un método para la modificación en serie de un locus objetivo en una célula, que comprende: (a) proporcionar la célula que comprende el locus objetivo, en donde el locus objetivo comprende un polinucleótido que codifica un primer marcador de selección unido operativamente a un primer promotor y que comprende un primer sitio de reconocimiento para un primer agente de nucleasa, en donde el primer sitio de reconocimiento de nucleasa está ubicado en una región codificante del primer marcador de selección o cualquier región no codificante de proteína del primer marcador de selección, opcionalmente en donde el locus objetivo está en el genoma de la célula o está ubicado en un vector en la célula; (b) introducir en la…

(16/10/2019) Un método para generar una línea de células madre embrionarias (ES) de rata, que comprende: (a) cultivar in vitro una primera capa de células alimentadoras que no se modifica para expresar el factor inhibidor de leucemia (LIF) y un embrión de rata en etapa de mórula o blastocisto, en donde la zona pelúcida del embrión de rata en etapa de mórula o blastocisto se ha eliminado, y en donde las condiciones de cultivo mantienen la pluripotencia de una célula ES de rata y comprenden un medio que comprende aproximadamente 50 U/mL a aproximadamente 150 U/mL de LIF, y una combinación de inhibidores que consiste en un inhibidor de MEK y un inhibidor de GSK3; y (b) transferir una excrecencia de una masa amorfa…

(20/03/2019) Un método para hacer una modificación bialélica a un locus genómico diana en un genoma dentro de una célula, que comprende: (I) introducir en una población de células: (a) una proteína Cas; (b) un primer ARN guía que se hibrida con una primera secuencia de reconocimiento de ARN de CRISPR dentro del locus genómico diana; (c) un segundo ARN guía que se hibrida con una segunda secuencia de reconocimiento de ARN de CRISPR dentro del locus genómico diana; y (d) un vector de transformación que comprende un inserto de ácido nucleico flanqueado por un brazo de homología 5' que se hibrida con una secuencia diana 5' dentro del locus genómico diana y un brazo de homología 3' que se hibrida con una secuencia diana 3' dentro del locus genómico diana,…

(18/02/2019) Un método in vitro para modificar un genoma en un locus genómico de interés en una célula madre embrionaria (ES) de ratón, que comprende: poner en contacto las células ES de ratón con una proteína Cas9, un ARN de CRISPR que se hibrida a una secuencia objetivo en el locus genómico de interés, un ARNtracr, y un vector de direccionamiento grande (LTVEC) que tiene un tamaño de al menos 10 kb y comprende un inserto de ácido nucleico flanqueado por: (i) un brazo de homología 5' que es homólogo a una secuencia objetivo 5' en el locus genómico de interés; y (ii) un brazo de homología 3' que es homólogo a una secuencia objetivo 3' en…

(11/02/2019) Un método para la modificación direccionada de un locus genómico de interés en una célula de rata pluripotente, que comprende: (a) introducir en la célula de rata pluripotente un vector objetivo grande (LTVEC) que comprende un ácido nucleico inserto flanqueado por un brazo de homología 5' complementario a una primera secuencia de ácidos nucleicos en el locus genómico de interés y un brazo de homología 3' complementario a una segunda secuencia de ácidos nucleicos en el locus genómico de interés, en donde la suma total de los brazos de homología 5' y 3' es al menos 10 kb; y (b) identificar una célula de rata pluripotente modificada genéticamente que comprende…

(26/12/2018) Un método para modificar un locus genómico objetivo en un cromosoma Y en una célula, que comprende: (a) proporcionar la célula que comprende el locus genómico objetivo en el cromosoma Y, en donde el locus genómico objetivo comprende un sitio de reconocimiento para un agente de nucleasa, y en el que la célula está en un cultivo que comprende un medio base DMEM; (b) la introducción en la célula: (i) del agente de nucleasa, en el que el agente de nucleasa induce un corte o ruptura de la cadena doble en el sitio de reconocimiento; y (ii) de un vector de direccionamiento grande que comprende un polinucleótido de inserción flanqueado por los brazos de homología primero y segundo correspondientes…

(24/09/2018) Un método para modificar un locus genómico objetivo en una célula madre embrionaria (ES) de ratón, que comprende: (a) introducción en la célula ES de ratón: (i) una nucleasa de dedo de zinc (ZFN) que provoca un rompimiento de doble cadena en o cerca de el locus genómico objetivo; y (ii) un vector de direccionamiento grande (LTVEC) que comprende un ácido nucleico insertado flanqueado por un brazo de homología secuencia arriba y un brazo de homología secuencia abajo, en el que el ácido nucleico insertado varía de 5 kb a 30 kb de longitud, en el que la suma total de los brazos de homología secuencia arriba y secuencia abajo tiene una longitud de al menos 10 kb, en el que los brazos de homología secuencia arriba y secuencia abajo están entre 5 kb y 200 kb de longitud, y en el que el LTVEC varía de 50 kb…

(30/04/2014) Un método para generar un embrión de ratón que comprende células que son homocigóticas para una modificación genética, que comprende: (a) introducir células donantes de ratón en un embrión huésped en pre-mórula, en donde las células donantes comprenden células ES o células tipo ES de un ratón endógamo, y que son homocigóticas para la modificación genética; y (b) cultivar el embrión huésped en pre-mórula de (a) hasta el estadío de blastocisto en donde al menos el 90 % de las células de un ratón que se desarrolla a partir del blastocisto se derivan de las células donantes.