Medios y métodos para la generación de células productoras de mamífero para la producción de proteínas recombinantes.

Un método para la producción de una proteína de interés en una célula productora de mamífero,

que comprende las etapas de procedimiento siguientes:

a) proporcionar una célula productora de mamífero,

b) incrementar la concentración de al menos un miR seleccionado del grupo que consiste en miR-15, miR- 16 y miR-34 en la célula productora de mamífero proporcionada en la etapa a) mediante la transfección de la célula productora de mamífero con al menos un miR seleccionado del grupo que consiste en miR- 15, miR-16 y miR-34 o con al menos un vector que contiene una secuencia de nucleótidos codificante de al menos un miR bajo el control de al menos un elemento regulador que permite la sobreexpresión de al menos un miR, en donde el al menos un miR se selecciona del grupo que consiste en miR-15, miR-16 y miR34 de manera que se obtiene una célula productora de mamífero modificada genéticamente para la producción de proteína,

c) cultivar la célula productora de mamífero modificada genéticamente para la producción de proteína, bajo condiciones adecuadas para la producción de la proteína de interés, y

d) recuperar la proteína de interés producida en la etapa c),

donde la célula productora de mamífero es una célula de roedor, una célula de hámster, una célula de ratón o una célula humana, una célula Y0, una célula COS, una célula sp2/0, una célula CHO, una célula CHO-K1 o una célula CHO-K1SV, una célula CHO DG44, una célula CHO DUXB11, una célula CHO GS con desactivación génica, una célula CHO FUT8 G2 con desactivación génica, una célula NS0, una célula PERC6, una célula HEK293, una célula HT1080 o una célula BHK.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2014/066352.

Solicitante: LONZA BIOLOGICS PLC.

Nacionalidad solicitante: Reino Unido.

Dirección: 228-230 Bath Road Slough SL1 4DX REINO UNIDO.

Inventor/es: YOUNG, ROBERT, RANCE,JAMES, FEARY,MARC, SAYER,ELIZABETH C, SMALES,CHRISTOPHER MARK.

Fecha de Publicación: 5 de Febrero de 2019.

Clasificación Internacional de Patentes:

C12N15/113 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Acidos nucleicos no codificantes que modulan la expresión de genes, p.ej. oligonucleótidos antisentido.
C12N15/67 C12N 15/00 […] › Métodos generales para favorecer la expresión.
C12N5/10 C12N […] › C12N 5/00 Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales, p. ej. líneas celulares; Tejidos; Su cultivo o conservación; Medios de cultivo para este fin (reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00). › Células modificadas por introducción de material genético extraño, p. ej. células transformadas por virus.
C12P21/00 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › Preparación de péptidos o de proteínas (proteína monocelular C12N 1/00).

PDF original: ES-2698610_T3.pdf

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