Composiciones y procedimientos para cuantificar una secuencia de ácido nucleico en una muestra.
Un procedimiento para cuantificar un producto específico en una reacción de amplificación de corte y extensión,
comprendiendo el procedimiento:
(a) poner en contacto una molécula de ácido nucleico objetivo en condiciones sustancialmente isotérmicas con una polimerasa deficiente en exonucleasa, dos o más oligonucleótidos cebadores, en el que cada uno de los oligonucleótidos cebadores comprende de 5' a 3':
i. una secuencia de reconocimiento de enzimas de corte;
ii. una secuencia complementaria a la molécula de ácido nucleico objetivo; y
iii. uno o más nucleótidos modificados con 2'-O-metilo colocados en el extremo 3' de la secuencia complementaria a la molécula de ácido nucleico objetivo; y
una enzima de corte que se une a la secuencia de reconocimiento de la enzima de corte en el ADN bicatenario y corta una hebra del ADN bicatenario en un sitio de corte y una sonda polinucleotídica detectable;
(b) generar amplicones que comprenden al menos una porción de dicha molécula de ácido nucleico objetivo; y
(c) detectar una señal específica para la hibridación de la sonda oligonucleotídica con la molécula de ácido nucleico objetivo o su amplicón, en el que la señal indica la cantidad de la molécula de ácido nucleico objetivo presente en la muestra o un amplicón de la misma.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2013/035750.
Solicitante: Envirologix Inc.
Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.
Dirección: 500 Riverside Industrial Parkway Portland, Maine 04103 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.
Inventor/es: SHAFFER,DANIEL, JUDICE,STEPHEN A.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12Q1/68 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
- C12Q1/6848 C12Q 1/00 […] › caracterizados por los medios para evitar la contaminación o para incrementar la especificidad o la sensibilidad de una reacción de amplificación.
- C12Q1/6851 C12Q 1/00 […] › Amplificación cuantitativa.
- C12Q1/6853 C12Q 1/00 […] › usando cebadores o moldes modificados.
- C12Q1/689 C12Q 1/00 […] › para bacterias.
PDF original: ES-2743050_T3.pdf
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