Exposición de proteína.

Un procedimiento de cribado de un polipéptido para una actividad deseada contra una molécula diana,

y el procedimiento comprende:

a) cultivar una célula bacteriana Gram negativa que comprende un polinucleótido que codifica el polipéptido de modo que se produce el polipéptido,

b) permeabilizar las membranas celulares de la célula bacteriana con un detergente no iónico o un solvente orgánico, en cuyo caso el polipéptido y el polinucleótido que codifica el polipéptido se retienen dentro de la célula bacteriana permeabilizada,

c) poner en contacto la célula bacteriana permeabilizada con la molécula diana de modo que difunda hacia la célula bacteriana permeabilizada, y

d) cribado del polipéptido para la actividad deseada,

en el que el polipéptido tiene un tamaño molecular suficiente para retener al polipéptido dentro de la pared de la célula bacteriana, o el polipéptido se asocia con al menos un segundo polipéptido para formar un complejo de proteína que se retiene dentro de la célula bacteriana permeabilizada, y el segundo polipéptido se selecciona de:

i) un polipéptido que tiene un tamaño molecular tal que el complejo de proteína se retiene dentro de la pared de la célula bacteriana permeabilizada; y/o

ii) una proteína de enlazamiento de ADN.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/AU2010/001702.

Solicitante: Affinity Biosciences Pty Ltd.

Nacionalidad solicitante: Australia.

Dirección: 1 Dalmore Drive Scoresby VIC 3179 AUSTRALIA.

Inventor/es: BEASLEY,MATTHEW, KIEFEL,BEN.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12N15/10 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
  • C40B30/04 C […] › C40 TECNOLOGIA COMBINATORIA.C40B QUIMICA COMBINATORIA; BIBLIOTECAS, p. ej. QUIMIOTECAS, BIBLIOTECAS IN SILICO. › C40B 30/00 Procedimientos de selección de bibliotecas. › midiendo la capacidad para unirse específicamente a una molécula diana, p. ej. unión anticuerpo-antígeno, unión receptor-ligando.
  • C40B40/02 C40B […] › C40B 40/00 Bibliotecas per se , p. ej. arrays, mezclas. › Bibliotecas contenidas en o exhibidas por microorganismos, p. ej. bacterias o células animales; Bibliotecas contenidas en o exhibidas por vectores, p. ej. plásmidos; Bibliotecas que únicamente contienen microorganismos o vectores.

PDF original: ES-2665940_T3.pdf

 

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