Método para purificar crudo de liraglutida sintética en fase sólida.

Un método para purificar crudo de liraglutida obtenido mediante síntesis en fase sólida,

caracterizado por que comprende las siguientes etapas:

Etapa 1: se obtiene una solución de crudo de liraglutida disolviendo crudo de liraglutida obtenido mediante síntesis en fase sólida en solución acuosa de acetonitrilo;

Etapa 2: la solución de crudo de liraglutida se somete a una primera purificación por HPLC usando sílice unida a octilsilano como fase estacionaria y usando solución acuosa de isopropanol que contiene un 0,1-0,2 % de ácido trifluoroacético como fase móvil A y acetonitrilo que contiene un 0,1-0,2 % de ácido trifluoroacético como fase móvil B eluyendo a un gradiente lineal de un 20-40 % de B a un 40-60 % de B, y se recoge el pico objetivo como la primera fracción;

Etapa 3: la primera fracción se somete a una segunda purificación por HPLC usando sílice unida a cianosilano como fase estacionaria, y usando solución acuosa de ácido perclórico a un 0,05-0,15 % (concentración en masa) como fase móvil A y ácido perclórico a un 0,05-0,15 % (concentración en masa) en acetonitrilo como fase móvil B eluyendo a un gradiente lineal de un 40 % de B a un 70 % de B, y se recoge el pico objetivo como la segunda fracción;

Etapa 4: la segunda fracción se somete a una tercera purificación por HPLC usando sílice unida a octilsilano como fase estacionaria, y usando solución acuosa de amoniaco a un 0,01-0,06 % (concentración en masa) como fase móvil A y acetonitrilo de calidad cromatográfica como fase móvil B eluyendo a un gradiente lineal de un 30 % de B a un 60 % de B, y se recoge el pico objetivo como la tercera fracción;

Etapa 5: se obtiene péptido purificado de la tercera fracción por evaporación rotatoria a presión reducida y liofilización.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/CN2013/071063.

Solicitante: Hybio Pharmaceutical Co., Ltd.

Nacionalidad solicitante: China.

Dirección: Hybio Medicine Park No.37 KEJIC Str. 2ND Hi-Tech Industrial Park Shenzhen, Guangdong 518057 CHINA.

Inventor/es: PAN,JUNFENG, MA,YAPING, YUAN,JIANCHENG, QIN,LIANGZHENG.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C07K14/605 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C07 QUIMICA ORGANICA.C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02;   proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › Glucagones.

PDF original: ES-2610585_T3.pdf

 

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