Método para identificar dianas de antibióticos.

Un método para identificar un gen esencial que sirve como una diana de antibiótico en una bacteria,

comprendiendo el método las etapas de:

(a) generar un grupo de bacterias mutantes by mutagénesis de transposones con dos o más transposones activadores diferentes (TnA), en el que cada TnA comprende un promotor de tal forma que la inserción de transposones en el ADN bacteriano altera la función o aumenta la transcripción de un gen en o cerca del sitio de inserción de una manera dependiente de la posición, y en el que la mutagénesis de transposones produce una tasa de inserción de al menos un transposón por pares de bases de ADN bacteriano;

(b) desarrollar bacterias del grupo de mutantes en presencia de antibiótico a una concentración de aproximadamente 0,5, aproximadamente 1 y aproximadamente 2 x CMI para producir al menos tres cultivos de ensayo; y

(c) comparar la distribución de inserciones de TnA entre los cultivos de ensayo para identificar: (i) sitios de inserción de TnA que alteran la función génica esencial; e (ii) sitios de inserción de TnA que se sitúan de tal forma que la transcripción génica esencial se mejora de tal modo que el producto génico esencial se sobreexpresa a un nivel en el que funciona como un colector para dicho antibiótico y así altera el efecto del antibiótico sobre dicha bacteria, identificando de este modo un gen esencial putativo que es necesario para la viabilidad en todas las condiciones de crecimiento usadas en la etapa (b), y que sirve como una diana de dicho antibiótico en dicha bacteria.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/GB2012/000402.

Solicitante: Discuva Limited.

Inventor/es: WILLIAMS,DAVID HUGH, TURNER,ARTHUR KEITH.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12N15/10 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).

PDF original: ES-2618207_T3.pdf

 

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