Método para identificar dianas antibióticas por secuenciación complementada.
Un método para identificar un gen esencial que sirve como una diana antibiótica en una bacteria,
comprendiendo el método las etapas de:
(a) generar un mutante resistente a antibióticos de dicha bacteria mediante un método que comprende la etapa de seleccionar el crecimiento en presencia de dicho antibiótico para producir un clon del mutante resistente a antibióticos (mutante AbR);
(b) transformar el mutante AbR con: (i) una o más copias de tipo silvestre de dicho gen esencial de dicha bacteria; y (ii) un transposón que inactiva por inserción el ADN bacteriano, para producir un grupo de transposones mutantes que son merodiploides para dichos uno o más genes esenciales;
(c) cultivar bacterias del grupo merodiploide en presencia de diferentes cantidades de dicho antibiótico para producir dos o más cultivos de ensayo en los que las inserciones de transposones en dicho gen esencial que sirve como una diana antibiótica se representan en condiciones no selectivas, es decir, cuando una copia de tipo silvestre del gen esencial complementa la copia mutante activada por inserción del mismo, pero no en condiciones selectivas, es decir, cuando una copia de tipo silvestre del gen esencial no complementa la copia mutante activada por inserción del mismo; y
(d) comparar la distribución de las inserciones de transposones entre cultivos de ensayo para identificar un gen esencial putativo que sirve como una diana de dicho antibiótico en dicha bacteria.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/GB2012/000403.
Solicitante: Discuva Limited.
Inventor/es: WILLIAMS,DAVID HUGH, TURNER,ARTHUR KEITH.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12N15/10 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
PDF original: ES-2599928_T3.pdf
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