Cromatografía de intercambio iónico de proteínas y péptidos con un modificador orgánico en el paso de elución.

Un proceso de cromatografía de intercambio de cationes para purificación de un péptido a partir de una mixtura que comprende dicho péptido e impurezas peptídicas afines constituidas por una forma truncada,

forma extendida, forma desamidada, forma plegada incorrectamente, una forma con glicosilación no deseada, forma que carece de ácido σ-carboxi-glutámico, y mixturas de ellas con tal que las mismas se eluyan antes del péptido, teniendo dichas impurezas afines una carga neta local o global diferente comparadas con dicho péptido, y comprendiendo dicho proceso los pasos de:

a) elución de dichas impurezas peptídicas afines de dicha mixtura en una solución que comprende un modificador orgánico seleccionado de C1-6-alcanol, C1-6-alquenol o C1-6-alquinol, urea, guanidina, guanidina- HCl, ácido C1-6 alcanoico (con inclusión de ácido acético), C2-6-glicol, o C3-7-polialcohol con inclusión de azúcares, y mixturas de los mismos;

agua, opcionalmente un componente salino, y opcionalmente un tampón;

en un gradiente lineal o escalonado o isocráticamente de componente salino;

y a valores de pH mantenidos opcionalmente con un tampón en el intervalo en que dicho péptido tiene una carga neta positiva local o global y dichas impurezas peptídicas afines tienen una carga neta positiva local o global que es menor que la carga neta positiva de dicho péptido, para eliminar dichas impurezas peptídicas afines; y

b) subsiguientemente, elución de dicho péptido por un cambio escalonado o lineal en un disolvente acuoso exento de modificador orgánico, opcionalmente con un componente salino, a valores de pH iguales o mayores mantenidos opcionalmente con un tampón.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/DK2000/000112.

Solicitante: NOVO NORDISK HEALTH CARE AG.

Nacionalidad solicitante: Suiza.

Dirección: Thurgauerstrasse 36/38 8050 Zürich SUIZA.

Inventor/es: STABY,ARNE.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • B01D15/08 TECNICAS INDUSTRIALES DIVERSAS; TRANSPORTES.B01 PROCEDIMIENTOS O APARATOS FISICOS O QUIMICOS EN GENERAL.B01D SEPARACION (separación de sólidos por vía húmeda B03B, B03D, mesas o cribas neumáticas B03B, por vía seca B07; separación magnética o electrostática de materiales sólidos a partir de materiales sólidos o de fluidos, separación mediante campos eléctricos de alta tensión B03C; aparatos centrifugadores B04B; aparato de vórtice B04C; prensas en sí para exprimir los líquidos de las sustancias que los contienen B30B 9/02). › B01D 15/00 Procedimientos de separación que implican el tratamientos de líquidos con absorbentes sólidos; Aparatos para ello. › Adsorción selectiva, p. ej. cromatografía.
  • B01J20/281 B01 […] › B01J PROCEDIMIENTOS QUÍMICOS O FÍSICOS, p. ej. CATÁLISIS O QUÍMICA DE LOS COLOIDES; APARATOS ADECUADOS. › B01J 20/00 Composiciones absorbentes o adsorbentes sólidas o composiciones que facilitan la filtración; Absorbentes o adsorbentes para cromatografía; Procedimientos para su preparación, regeneración o reactivación. › Absorbentes o adsorbentes especialmente adaptados para la cromatografía preparativa, analítica o de investigación.
  • B01J20/285 B01J 20/00 […] › a base de polímeros.
  • C07K1/18 QUIMICA; METALURGIA.C07 QUIMICA ORGANICA.C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 1/00 Procedimientos generales de preparación de péptidos. › Cromatografía de intercambio iónico.
  • C07K14/605 C07K […] › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › Glucagones.
  • C07K14/62 C07K 14/00 […] › Insulinas.
  • C12N9/64 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 9/00 Enzimas, p. ej. ligasas (6.); Proenzimas; Composiciones que las contienen (preparaciones para la limpieza de los dientes que contienen enzimas A61K 8/66, A61Q 11/00; preparaciones de uso médico que contienen enzimas A61K 38/43; composiciones detergentes que contienen enzimas C11D ); Procesos para preparar, activar, inhibir, separar o purificar enzimas. › que provienen de tejido animal, p. ej. renina.
  • G01N30/02 FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 30/00 Investigación o análisis de materiales por separación en constituyentes utilizando la adsorción, la absorción o fenómenos similares o utilizando el intercambio iónico, p. ej. la cromatografía (G01N 3/00 - G01N 29/00 tienen prioridad). › Cromatografía sobre columna.
  • G01N30/26 G01N 30/00 […] › Acondicionamiento del fluido portador; Modelos de flujo.
  • G01N30/34 G01N 30/00 […] › de la composición del fluido, p. ej. del gradiente (G01N 30/36 tiene prioridad).
  • G01N30/88 G01N 30/00 […] › Sistemas integrados de análisis, especialmente adaptados a este efecto, no cubiertos por uno solo de los grupos G01N 30/04 - G01N 30/86.

PDF original: ES-2562127_T3.pdf

 

Cromatografía de intercambio iónico de proteínas y péptidos con un modificador orgánico en el paso de elución.

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