Inhibidores polares simétricos de colina cinasa con actividad antitumoral.

Inhibidores polares simétricos de colina cinasa con actividad antitumoral.

La presente invención se refiere a compuestos polares simétricos de bispiridinio, bisquinuclidinio y bisquinolinio con un linker derivado del 1,2-bis(p-toliloxi)etano inhibidores de colina cinasa, su síntesis y su uso como medicamento antitumoral.

INHIBIDORES POLARES SIMÉTRICOS DE COLINACINASA CON ACTIVIDAD ANTITUMORAL

SECTOR DE LA TÉCNICA

La presente invención se enmarca en el campo farmacéutico. Concretamente la invención se refiere a compuestos polares simétricos de bispiridinio, bisquinuclidinio y bisquinolinio con un linker derivado del 1,2-bis(p-toliloxi)etano inhibidores de colina cinasa, su síntesis y su uso como medicamento antitumoral.

OBJETO DE LA INVENCIÓN

El primer objeto de la presente invención es una familia de compuestos con estructura simétrica de sales de bispiridinio, bisquinolino o bisquinuclidinio, 15 inhibidores de la enzima colina cinasa (ChoK).

El segundo objeto de la presente invención se refiere a un procedimiento para la síntesis de los compuestos de la familia citada anteriormente.

El tercer objeto de la presente invención se refiere al uso de dichos compuestos como inhibidores de la enzima colina cinasa (ChoK).

El tercer objeto de la presente invención se refiere al uso de dichos compuestos como medicamentos.

Un cuarto objeto de la invención es la elaboración de medicamentos, en particular, composiciones farmacéuticas que comprenden una cantidad terapéutica efectiva dichos compuestos o cualquiera de sus tautómeros, estereoisómeros, sales, solvatos, hidratos o profármacos de los mismos como 30 hemos definido antes y al menos un vehículo o coadyuvante aceptable farmacológicamente.

El quinto objeto de la presente invención se refiere al uso de estos compuestos para el tratamiento de enfermedades o afecciones mediadas por ChoK, 35 preferentemente cáncer, más preferentemente, cáncer de cérvix,

adenocarcinoma de colon, leucemias, carcinoma mamario, carcinoma de próstata, carcinoma no microcítico de pulmón y hepatoma humano.

ESTADO DE LA TÉCNICA

La enzima colina cinasa (ChoK) es la primera enzima de la ruta CDP-colina o ruta de Kennedy, que permite la biosíntesis de fo sfatid i I col i na (PC), fosfolipido mayoritario de las membranas celulares. Esta enzima cataliza la fosforilación de colina a fosfocolina (PCho) utilizando ATP y Mg2+ como cofactor.

En condiciones tumorales, diferentes oncogenes, como src, mos [Hernández- Alcoceba, R.; Saniger, L.; Campos, J.; Núñez, M. C.; Khaless, F.; Gallo M. A.; Espinosa, A.; Lacal, J. C. Oncogene 1997, 15, 2289-2301], pero

fundamentalmente el oncogene ras, provoca un exceso de actividad de ChoK [Macara, I. G. Mol. Cell. Biol. 1989, 9, 325-328; Ratnam, S.; Kent, C. Arch. Biochem. Biophys. 1995, 323, 313-322] lo que se traduce en un incremento de los niveles intracelulares de PCho, sin que exista una cooperación con la biosíntesis de PC [Bhakoo, K. K.; Williams, S. R.; Florian, C. L.; Land, H.; Noble, M. D. Cáncer Res. 1996, 56, 4630-4655]. El empleo de técnicas de resonancia magnética nuclear (RMN) aplicadas en diferentes tumores humanos (mama, pulmón, colon, colorrectal, próstata y linfoma hepático, entre otros) ha permitido corroborar que en todos ellos se produce un notable aumento de los niveles de PCho con respecto a los niveles existentes en los correspondientes tejidos sanos [Aboagye, E. O.; Bhujwalla, Z. M. Cáncer Res. 1999, 59, 80-84; de Certaines, J. D.; Larsen, V. A.; Podo, F.; Carpinelli, G.; Briot, O.; Henriksen, O. NMR Biomed. 1993, 6, 345-365; Ruiz-Cabello, J.; Cohén, J. S. NMR Biomed. 1992, 5, 226-233; Smith, T. A.; Bush, C.; Jameson, C.; Titley, J. C.; Leach, M. O.; Wilman, D. E.; McCready, V. R. NMR Biomed. 1993, 6, 318-323].

Existen un gran número de estudios que avalan que el aumento de la concentración intracelular de PCho promueve la mitosis celular, permitiendo afirmar que el papel que en ChoK juega en la carcinogénesis humana se debe al incremento de la concentración del producto de catálisis, PCho [Cuadrado, A.; Carnero, A.; Dolfi, F.; Jiménez, B.; Lacal, J. C. Oncogene 1993, 8, 2959-2968;

Kiss, Z. Cell SignaI 1999, 11, 149-157], que actúa como segundo mensajero implicado en la transducción de la señal mitogénica.

Debido al importante papel que juegan ChoK y PCho en la carcinogénesis 5 humana, la ChoK se ha convertido en una diana terapéutica perfecta para el diseño de fármacos antitumorales, capaces de inhibir selectivamente la enzima evitando la producción de PCho y, por tanto, la actividad mitogénica asociada a este metabolito.

La inhibición de ChoK produce una disminución de la proliferación celular y previene el crecimiento tumoral en ratones [Hernández-Alcoceba, R.; Fernández, F.; Lacal, J. C. Cáncer Res. 1999, 59, 3112-3118]. Además, la inhibición de ChoK mediante inhibidores específicos conduce a las células tumorales a la apoptosis, mientras que no afecta a las células normales [Rodríguez-González, 15 A.; Ramírez de Molina, A.; Fernández, F.; Lacal, J. C. Oncogene 2004, 23, 8247-

8259],

La ChoK está presente en otros organismos eucariotas como es Plasmodium falciparum, causante del 80% de la infecciones de malaria. En este parásito, 20 ChoK cataliza la biosíntesis de PCho, del que se obtiene a su vez PC [Vial, H. J.; Ancelin, M. L. Subcell Biochem. 1992, 18, 259-306].

La inhibición de la biosíntesis de PC como estrategia antimalárica ha sido ampliamente estudiada frente a P. falciparum. Se han obtenido un gran número 25 de compuestos con estructura de sales de amonio mono, bis y triscuatemarias capaces de inhibir el crecimiento de P. falciparum in vitro [Ancelin, M. L.; Vial, H. J.; Philippot, J. R. Biochem. Pharmacol. 1985, 34, 4068-4071; Ancelin, M. L.; Vial, H. J. Antímicrob. Agents Chemother. 1986, 29, 814-820; Ancelin, M. L.; Calas, M.; Vidal-Sailhan, V.; Herbuté, S.; Ringwald, P.; Vial, H. J. Antímicrob. 30 Agents Chemother. 2003, 47, 2590-2597; Salom-Roig, X. J.; Hamzé, A.; Calas, M.; Vial, H. J. Comb Chem High Throughput Screen. 2005, 849-862] y en algunos casos, in vivo [Ancelin, M. L.; Calas, M.; Bonhoure, A.; Herbuté, S.; Vial, H. J. Antímicrob. Agents Chemother. 2003, 47, 2598-2605], interfiriendo la biosíntesis de PC, incluso en cepas resistentes a múltiples fármacos [Ancelin, M.

L.; Calas, M.; Vidal-Sailhan, V.; Herbuté, S.; Ringwald, P.; Vial, H. J. Antimicrob. Agents Chemother. 2003, 47, 2590-2597].

La identificación de la secuencia genética que codifica ChoK en P. falciparum 5 [Choubey, V.; Guha, M.; Maity, P.; Kumar, S.; Raghunandan, R.; Maulik, P. R.; Mitra, K.; Halder, U. C.; Bandyopadhyay, U. Biochim. Biophys. Acta 2006, 1760, 1027-1038], ha permitido obtener la enzima recombinante ChoK de P. falciparum (PfChoK). Estudios empleando bromuro de hexadeciltrimetilamonio (HDTAB) han permitido demostrar que la actividad antimalárica mostrada por este 10 compuesto se debe a su capacidad de inhibir PfChoK, lo que provoca un descenso en la generación de PCho, lo que a su vez se traduce en una disminución de la biosíntesis de PC y por tanto, en la muerte del parásito [Choubey, V.; Maity, P.; Guha, M.; Kumar, S.; Srivastava, K.; Puri, S. K.; Bandyopadhyay, U. Antimicrob Agents Chemother. 2007, 51, 696-706].

DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Definiciones

A lo largo de la presente memoria,"hidrocarburo alifático" se refiere a un radical hidrocarburo lineal o ramificado, cíclico o no, que consta de 1 a 6 átomos de carbono y también de átomos de hidrógeno, que está unido al resto de la molécula por un enlace sencillo, por ejemplo, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n- butilo, tere-butilo, n-pentilo etc. Los hidrocarburos alifáticos, pueden estar 25 opcionalmente insaturados con dobles ó triples enlaces, o también sustituidos por uno o más sustituyentes tales como halógeno, hidroxilo, alcoxilo, carboxilo, ciano, carbonilo, acilo, alcoxicarbonilo, amino, nitro, mercapto y alquiltio

"Enfermedad mediada por ChoK', se refiere a cualquier enfermedad o afección 30 en las que la modulación de la expresión o de la actividad de colina cinasa (ChoK) puede ser beneficiosa para los pacientes que sufran dicha enfermedad o afección. Esto incluye, pero no se limita a aquellas enfermedades o afecciones que implican una alteración en la expresión o actividad de ChoK o que se benefician de una inhibición de ChoK. Preferiblemente tal enfermedad o afección 35 es el cáncer, más preferentemente leucemia, cáncer de cérvix, adenocarcinoma

de colon, leucemia, carcinoma mamario, carcinoma de próstata, carcinoma no microcítico de pulmón y hepatoma humano.

Se entenderá por "preparar en microondas" o "preparar con el uso de microondas" a hacer reaccionar dos o más compuestos sometidos a radiación por microondas, preferentemente en un microndas específico de síntesis de laboratorio.

Los términos "transportador*, "coadyuvante" y/o "vehículo" se refieren a las entidades moleculares o sustancias con las que se administran el principio activo.... [Seguir leyendo]

1Compuesto de fórmula general (I) que comprende el compuesto de fórmula

general (III) como espaciador y dos radicales, R1t iguales

©

2X

0)

2.- Compuesto según reivindicación anterior donde Ri se selecciona del grupo formado por:

cabezas catiónicas derivadas del anillo de piridina

cabezas catiónicas derivadas del anillo de quinolina; y

restos de quinuclidina

3.- Compuesto según reivindicación anterior donde Ri se selecciona del grupo formado por:

cabezas cartiónicas derivadas del anillo de piridina sustituido en posición

para con restos de aminas primarias, secundarias o terciarias de tipo alifático (cíclicas o acíclicas) o aromático como sustituyentes.

cabezas catiónicas derivadas del anillo de quinolina convenientemente

sustituido en posición 4 con aminas primarias secundarias o terciarias alifáticas (cíclicas o acíclicas), y/o con restos aromáticos; y en posición 5, 6, 7 ó 8, con un sustituyentes R4 que podría ser H, halógeno, una amina (primaria, secundaria o teciaria) o un -OR donde R = H, alquilo ó aromático; y

restos de quinuclidina sustituido en posición 2, 3 ó 4 por R5 que podría ser H, un halógeno, un hidroxilo -OH o un éter -OR donde R = hidrocarburo alifático ó aromático sustituido o no.

3.- Compuesto según reivindicación anterior con fórmula general (IA)

e

2X

Donde R2 y R3 se seleccionan del grupo formado por H, hidrocarburos acíclicos de 1 a 8 carbonos, hidrocarburos acíclicos de 5 a 8 carbonos y cabezas aromáticas. R2 puede ser igual o diferente a R3 en cada cabeza.

4.- Compuesto según reivindicación 3 con fórmula general (IB)

Donde R2 y R3 se seleccionan del grupo formado por H, hidrocarburos alifáticos de 1 a 8 carbonos, hidrocarburos alifáticos cíclicos de 5 a 8 carbonos y cabezas aromáticas.

5.- Compuesto según reivindicación 3 con fórmula general (IC)

2X

Dónde R5 podría ser hidrógeno- H, un halógeno -X, un hidroxilo -OH o un éter - OR donde R = hidrocarburo alifático ó aromático sustituido o no.

6. Un compuesto según la reivindicación 4 seleccionado del grupo formado por:

Dibromuro de 1,1 *-[etano-1,2-diilbis(oxi-4,1-

fenillenometileno)]bis[4-(dimetillamino)piridinio]. (EB-3D).

0

Dibromuro de 1,1 '-[etano-1,2-diilbis(oxi-4,1 -fenillenometileno)] bis[4-(pirrolidino)piridinio]. (EB-3AC).

7. Un compuesto según la reivindicación 5 seleccionado del grupo formado por:

Dibromuro de 1,1,-[1,2-etanodiilbis(oxi-4,1-fenilenometileno)]bis{4- [metil(fenil)amino]quinolinio}. (EB-3CM).

Dibromuro de 1,1,-[1,2-etanodiilbis(oxi-4,1-fenilenometileno)]bis{4-

[(4-clorofenil)(metil)amino]quinolinio}. (EB-3CC).

Dibromuro de 1,1 '-[1,2-etanodiil bis(oxi-4,1 -fenilenometileno)]bis{7- cloro-4-[metil(fenil)amino]quinolinio}. (EB-3DM).

Dibromuro de 1,1'-[1.2-etanodiolbis(oxi-4,1-

fenilenometileno)]bis{7-cloro-4-[(4 clorofenil)(metil)amino]quinolinio}. (EB-3C).

Dibromuro de 1,1'-[1.2-etanodiilbis(ox¡-4,1-fenilenometileno)]bis[-7-

Cloro4-(1azepanil)quinolinio]. (EB-3DC).

Dibromuro de 1,1 '-[1,2-etanodi¡lb¡s(ox¡-4,1 -fenilenometileno)]bis[4- (l-pirrolidinil)quinolinio]. (EB-3P).

8. Un compuesto según la reivindicación 6 seleccionado del grupo formado por:

Dibromuro de 1,1 '-[etano-1,2-diilbis(oxi-4,1 -

fenillenometileno)]bis[4-quinuclidinio]. (EB-3Q).

(SS/RR y RS) Dibromuro de 1,1'-[etano-1,2-diilb¡s(oxi-4,1- fenillenometileno)]bis[4-(3-hidroxi)quinuclidinio]. (EB-3QO).

9. Procedimiento de preparación de compuestos según reivindicaciones 2 a 8 que comprende la preparación de una disolución del producto intermedio (IV) y la correspondiente piridina, quinolina 4-sustituida o quinucidina en acetonitrilo.

10. Procedimiento de preparación del compuesto de la fórmula general (III) que comprende hacer reaccionar una mezcla en de p-hidroxitolueno, 1,2- dibromoetano, NaOH y Etanol utilizando el microondas.

11. Procedimiento de preparación del compuesto de la fórmula general (IV) que

comprende hacer reaccionar 1,2-bis(p-toliloxi)etano (III), NBS y dibenzilperoxido con en CCI4 utilizando el microondas.

12. Procedimiento de preparación del compuesto de la fórmula general (V) que 25 comprende hacer reaccionar 4,7-dicloroquinolina y el aminoderivado utilizando el microondas.

13. Procedimiento de preparación del compuesto de la fórmula general (VI) que 30 comprende hacer reaccionar 4-hidroxiquinolina, cloruro de fosforita y el

aminoderivado correspondiente utilizando el microondas.

14. Uso de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 para la elaboración de un medicamento.

15. Uso de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 para la elaboración de un medicamento antitumoral.

16. Uso de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 para la 5 elaboración de un medicamento para el tratamiento de enfermedades o

afecciones mediadas por la enzima colina cinasa (ChoK).

17. Uso de un compuesto, según la reivindicación anterior, donde la enfermedad o afección sea cáncer.

18. Uso del compuesto según reivindicación anterior para la elaboración de un medicamento para el tratamiento de cáncer de cérvix.

19. Uso del compuesto según reivindicación 17, para la elaboración de un 15 medicamento para el tratamiento de adenocarcinoma de colon.

20. Uso del compuesto según reivindicación 17, para la elaboración de un medicamento para el tratamiento de Leucemia

21. Uso del compuesto según reivindicación 17, para la elaboración de un

medicamento para el tratamiento de carcinoma mamario

22. Uso del compuesto según reivindicación 17, para la elaboración de un medicamento para el tratamiento de carcinoma de próstata

23. Uso del compuesto según reivindicación 17, para la elaboración de un medicamento para el tratamiento de carcinoma no microcítico de pulmón.

24. Uso del compuesto según reivindicación 17, para la elaboración de un 30 medicamento para el tratamiento de hepatoma humano

25. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente aceptable de al menos uno de los compuestos de Fórmula general (I) o cualquiera de sus tautómeros, estereoisómeros, sales, solvatos,

hidratos o profármacos según reivindicaciones 1 a 8 y al menos un transportador, coadyuvante o vehículo aceptable farmacológicamente.

OFICINA ESPAÑOLA DE PATENTES Y MARCAS

ESPAÑA

N.° solicitud:

Fecha de presentación de la solicitud: 05.06.2014 Fecha de prioridad:

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