Vacuna para la prevención de la recaida del cáncer de mama.

Una composición que comprende una vehículo farmacéuticamente eficaz y un péptido que tiene una secuenciade aminoácidos SEC ID Nº 2 para su utilización en la inducción de una inmunidad terapéutica o protectora contrala recurrencia del cáncer de mama en un sujeto,

en el que el sujeto tiene una puntuación inmunoquímica (IHC)de 1+ o 2+ para la expresión de la proteína HER2 / neu y una puntuación de hibridación fluorescente in situ (FISH)menor a 2,0 ± 20 % para la expresión del gen HER2 / neu.

REFERENCIA CRUZADA A LAS SOLICITUDES RELACIONADAS

La presente solicitud reivindica el beneficio de la solicitud de patente U.S Nº 60/941.524 presentada el 1 de junio de 2007.

CAMPO

La presente invención se refiere, en general, al ámbito de las vacunas preventivas y terapéuticas. Específicamente, la presente invención se refiere a vacunas peptídicas para el tratamiento contra el cáncer de mama y la prevención de la recaída del cáncer de mama en pacientes en remisión.

ANTECEDENTES

El cáncer de mama (CM) es el diagnóstico más común de cáncer en mujeres y la segunda causa de muerte por cáncer entre mujeres (Ries LAG, et al. (eds) . SEER Cancer Statistics Review, 1975 – 2003, National Cancer Institute, Bethesda, MD) . Los principales avances en el tratamiento contra el cáncer de mama en los últimos 20 años han dado lugar a una mejora significativa en el porcentaje de supervivencia libre de enfermedad (SLE) . Por ejemplo, las terapias que utilizan anticuerpos reactivos contra antígenos relacionados con el tumor se han utilizado para bloquear los procesos celulares específicos con el fin de frenar el avance de la enfermedad o prevenir la recurrencia de la enfermedad. A pesar de los recientes avances en el tratamiento contra el cáncer de mama, un número significativo de pacientes finalmente morirá por la enfermedad recurrente.

Las vacunas son un modelo atractivo para dichos tratamientos y prevenciones debido a su fácil administración y a su alto porcentaje de éxito observado en las enfermedades infecciosas. El concepto básico de la creación de una vacuna contra el cáncer es, en teoría, simple. El desarrollo de vacunas efectivas contra el cáncer para tumores sólidos ha tenido en la práctica, sin embargo, un éxito limitado. Por ejemplo, un grupo que intentó administrar una vacuna peptídica dirigida contra un melanoma metastásico observó un porcentaje de respuesta de sólo el 2, 6 % (Rosemberg SA et al. (2004) Nat. Med. 10: 909 – 15) .

Hay numerosas explicaciones para este bajo porcentaje de éxito (Campoli M et al. (2005) Cancer Treat. Res. 123: 61 – 88) . Por ejemplo, incluso si un antígeno se asocia específicamente a un tipo en particular de célula tumoral, las células tumorales pueden expresar solo niveles bajos del antígeno o pueden localizarse en un sitio críptico o, de otro modo, protegerse de la detección inmunológica. Además, los tumores, a menudo, cambian su perfil antigénico por la liberación de antígenos a medida que se desarrollan. También contribuye al bajo porcentaje de éxito el hecho de que las células tumorales pueden expresar niveles muy bajos de proteínas de MHC y otras proteínas coestimuladoras necesarias para generar una respuesta inmune.

Otros problemas frente a los intentos de vacunación contra los tumores surgen en pacientes con cáncer en fase avanzada. Dichos pacientes tienden a tener tumores primarios y metastásicos más grandes, y las células en el interior del tumor no pueden ser accesibles debido al deficiente flujo de sangre. Esto concuerda con la observación de que las estrategias de vacunación han tenido más éxito en el tratamiento de neoplasias hematológicas (Radford KJ et al. (2005) Pathology 37: 534 – 50, y Molldrem JJ (2006) Biol. Bone Marrow Transplant. 12: 13 – 8) . Además, como los tumores se vuelven metastásicos, estos pueden desarrollar la capacidad de liberar factores inmunosupresores en su microambiente (Campoli, 2005 y Kortylewski M et al. (2005) Nature Med. 11: 1314 – 21) . Los tumores metastásicos se han asociado también a una disminución en el número de linfocitos de sangre periférica y a la disfunción de células dendríticas (Gillanders WE et al. (2006) Breast Diseases: A Year Book and Quarterly 17: 26 – 8) .

Mientras que todos o algunos de estos factores pueden contribuir a obstaculizar el desarrollo de una vacuna preventiva o terapéutica, el gran reto es que la mayoría de los antígenos tumorales sean antígenos propios o que tengan un alto grado de homología con antígenos propios y, por lo que se espera estén sujetos a una tolerancia inmune severa. Por lo tanto, es evidente que muchas vacunas contra el cáncer basadas en péptidos, con o sin adyuvantes inmunoestimulantes, pueden estar destinadas a tener un éxito limitado en la práctica clínica debido a la baja inmunogenicidad y la falta de especificad.

El prototipo de vacunas contra el cáncer de mama basado en antígenos únicos ha tenido un éxito moderado en la inducción de una respuesta inmune apreciable en experimentos con animales y en ensayos clínicos de pacientes con cáncer de mama. La respuesta inmune observada, no obstante, no se ha traducido a una inmunidad protectora clínicamente significativa contra el resurgimiento de la enfermedad para poner en remisión mediante la cirugía y la quimioterapia estándar. Por lo tanto, se necesitan enfoques de una vacuna innovadora para mejorar los porcentajes de recurrencia y supervivencia entre los pacientes con cáncer de mama.

Los epítopos de vacuna preferidos son aquellos expresados exclusivamente o expresados en al menos en niveles incrementados por un neoplasma. HER2 / neu es un proto -oncogén que se expresa en numerosas neoplasias epiteliales (Slamon DJ et al. (1989) Science 244: 707 – 12) . La amplificación génica y la sobreexposición de la proteína HER2 / neu se encuentra entre el 20 – 25 % del cáncer de mama y su exceso de presencia es un indicador de mal pronóstico (Pritchard Kl et al. (2006) N. Engl. J. Med. 354: 2103 – 11) . Se ha estudiado ampliamente al HER2 / neu, gracias a esta proteina se han identificado numerosos péptidos inmunogénicos. Uno de estos péptidos se denomina E75 y corresponde a los aminoácidos 369 – 377 de HER2 / neu (SEC ID Nº 1) (patente U.S Nº 6.514.942) .

Ha habido intentos de utilizar E75 como vacuna contra el cáncer, por ejemplo, una vacuna de péptido único combinada con diferentes inmunoadyuvantes (Zaks TZ et al. (1998) Cancer Res. 8: 3407 – 18) , cargada en células dendríticas autólogas y reinfundida (Brossart P et al. (2000) Blood 96: 3102 – 8, y, Kono K et al. (2002) Clin. Cancer Res. 8: 3394 – 3400) ; o incorporada en péptidos más largos capaces de unirse a las moléculas HLA clase II para reclutar células T CD4 auxiliar (Disis ML et al. (1999) Clin. Cancer Res. 5: 1289 – 97, y, Disis ML et al. (2002) J. Clin. Oncol. 20: 2624 – 32) . Cada enfoque ha estimulado una respuesta inmune mediada por una célula T citotóxica específica de E75, aunque no ha demostrado una inmunidad protectora o terapéutica clínicamente significativa en mujeres con cáncer de mama avanzado.

HER2 / neu es un miembro de la familia de receptores del factor de crecimiento epidérmico y codifica un receptor de tirosina quinasa de 185 – kd que participa en la regulación del crecimiento celular y la proliferación. (Popescu NC, King CR, Kraus MH. Localization of the human erbB – 2 gene on normal and rearranged chromosome 17 to bands q12 – 21. 32. Genomics 1989, 4: 362 – 366, Yarden Y, Sliwkowski MX. Untagling the ErbB signalling network. Nat Rev Mol Cell Bio 2001, 2: 127 – 137) . La sobreexpresión y / o amplificación de HER2 / neu se halla en el 25 – 30 % de los cánceres de mama invasivos (CM) y se asocia a tumores más agresivos y con pobres resultados clínicos. (Slamon DJ, Clark GM, Wong SG, et al. Human breast cancer: correlation of relapse and survival with amplification of the HER – 2/neu oncogene. Science 1987, 235: 177 – 182; Slamon DJ, Godolphin W, Jones LA, et al. Studies of the HER – 2/neu proto – oncogene in human breast and ovarian cancer. Science 1989; 244: 707 – 12; Toikkanen S, Helin H, Isola J, Joensuu H. Prognostic significance of HER – 2 oncoprotein expression in breast cancer: A 30 – year follow – up. J Clin Oncol 1992; 10: 1044 – 1048) .

La determinación del estado de HER2 / neu se realiza principalmente a través de dos pruebas, la inmunohistoquímica (IHC) y la hibridación fluorescente in situ (FISH) . La IHC detecta la sobreexpresión de la proteína HER2 / neu y se anota es una escala semicuantitativa de 0 a 3 + (0 = negativo, 1+ = baja expresión, 2+ = intermedio y 3+ = sobreexpresión) . FISH en cambio detecta la amplificación (exceso de copias) del gen HER2 / neu, se expresa en un índice de copias génicas de HER2 / neu en las copias génicas del cromosoma 17 y se interpreta como “sobreexpresión” si FISH es ≥ 2, 0 copias. (Hicks DG, Tubbs RR. Assessment of the HER2 status in breast cancer by fluorescente in situ hybridization: a technical review with interpretive guidelines. Hum Pathol 2005; 36:... [Seguir leyendo]

1. Una composición que comprende una vehículo farmacéuticamente eficaz y un péptido que tiene una secuencia de aminoácidos SEC ID Nº 2 para su utilización en la inducción de una inmunidad terapéutica o protectora contra la recurrencia del cáncer de mama en un sujeto, en el que el sujeto tiene una puntuación inmunoquímica (IHC) de 1+ o 2+ para la expresión de la proteína HER2 / neu y una puntuación de hibridación fluorescente in situ (FISH) menor a 2, 0 ± 20 % para la expresión del gen HER2 / neu.

2. La composición de la reivindicación 1, en la que se formula la composición para administrarse mensualmente por inoculación o inyección, preferiblemente por inyección intradérmica hasta que se establezca la inmunidad protectora.

3. La composición de la reivindicación 2, en la que se formula la composición para administrarse como inyecciones 15 tres o seis veces al mes y, preferiblemente, seis inyecciones mensuales.

4. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que la composición se formula para administrarse con una composición de vacuna de refuerzo, en la que la composición de la vacuna de refuerzo comprende un vehículo farmacéuticamente eficaz y un péptido que tiene una secuencia de aminoácidos de la SEC ID Nº 2.

5. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que la composición de dosis de refuerzo se formula para administrarse por inoculación o inyección, preferiblemente por inyección intradérmica.

6. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en la que la composición se formula para administrarse por inoculación o inyección en una o más dosis divididas y / o la composición de refuerzo se formula por inoculación o inyección en una o más dosis separadas.

7. La composición de la reivindicación 6, en el que las dos dosis de la composición y / o las dos dosis de la composición de refuerzo contienen las mismas concentraciones de péptido.

8. La composición de las reivindicaciones 6 o 7, en la que los sitios de inoculación o inyección en el cuerpo se localizan a, al menos, 5 cm de distancia unos de otros.

9. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 4 a 8, en la que la composición de dosis de refuerzo se formula para administrarse cada 6 y 12 meses, preferiblemente cada seis meses una vez completado el programa de inmunización primaria.

10. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en la que el sujeto es un ser humano.

11. La composición de la reivindicación 10, en la que el ser humano expresa un antígeno leucocitario humano A2 o un antígeno leucocitario humano A3.

12. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, en la que el sujeto se encuentra en remisión clínica

completa tras el diagnóstico de cáncer de mama de nódulo positivo o nódulo negativo, o en el que el sujeto se encuentra en remisión parcial de cáncer de mama.

13. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, en la que la composición comprende además un adyuvante, preferiblemente en la que el adyuvante sea un factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos humanos recombinantes.

14. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 4 a 13, en la que la composición de vacuna de refuerzo comprende además un adyuvante, preferiblemente en la que el adyuvante sea un factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos humanos recombinantes.

15. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, en la que la composición induce una respuesta de linfocitos T citotóxicos al péptido que tiene una secuencia de aminoácidos de SEC ID Nº 2.

16. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 10 a 15, en la que el ser humano tuvo cáncer de mama de nódulo positivo o en el que el ser humano tuvo un cáncer de mama de nódulo negativo.

17. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 16, en el que la composición comprende:

(i) entre 0, 1 mg y 10 mg de péptido, preferiblemente 0, 1, 0, 5 o 1 mg de péptido y,

(ii) entre 0, 01 y 0, 5 de factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos humanos (GM – CSF) como adyuvante, preferiblemente 0, 25 o 0, 125 mg de GM – CSF.

18. La composición de la reivindicación 1 para su utilización en un sujeto humano que tiene una puntuación inmunohistoquímica (IHC) de 1+ o 2+ para la expresión de la proteína HER2 / neu y una puntuación de hibridación fluorescente in situ (FISH) menor a 2, 0 ± 20 % para la expresión del gen HER2 / neu, en la que la composición comprende:

(i) una composición de vacuna que comprende 1 mg de péptido que tiene la secuencia de aminoácidos de SEC ID Nº 2 y 0, 125 o 0, 250 mg de factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos humanos (GM – CSF) como adyuvante, en la que la composición de vacuna se formula para administrarse como inyecciones trimestrales o semestrales, preferiblemente como inyecciones intradérmicas y,

(ii) una composición de vacuna de refuerzo que comprende 1 mg de péptido que tiene la secuencia de aminoácidos de SEC ID Nº 2 y 0, 125 o 0, 250 mg de factor estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos humanos (GM – CSF) como adyuvante, en el que la composición de vacuna se formula para administrarse como inyecciones, preferiblemente inyección intradérmica cada seis meses una vez completada la inmunización primaria.

19. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18, en la que el sujeto tiene una puntuación inmunohistoquímica (IHC) de 1+ para la expresión de la proteína HER2 / neu. 20