Terapia específica usando ligandos de integrinas para el tratamiento del cáncer.

Uso de al menos un ligando específico de integrinas, seleccionado entre ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) ylos solvatos y sales farmacéuticamente aceptables del mismo,

para la fabricación de un medicamento para eltratamiento de astrocitoma, en el que el medicamento se usa en combinación con temozolomida yradioterapia.

Terapia específica usando ligandos de integrinas para el tratamiento del cáncer

Ámbito técnico de la invención:

La invención se refiere a una forma de terapia específica para el tratamiento del astrocitoma que comprende al

menos un ligando de integrina, seleccionado entre ciclo- (Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) y los solvatos y sales farmacéuticamente aceptables del mismo, junto con el agente antineoplásico coterapéutico temozolomida y radioterapia que tienen eficacia sinérgica cuando se administran junto con dicho ligando de integrina, preferiblemente de forma controlada en el tiempo. La terapia tendrá como consecuencia un posible aumento sinérgico del efecto de inhibición de cada fármaco individual sobre la proliferación de células tumorales y células endoteliales tumorales, produciendo un tratamiento más eficaz que el obtenido mediante la administración de un componente individual solo, combinado o en otro régimen terapéutico, excepto el régimen de la presente invención.

Antecedentes de la invención:

Se sabe que las células endoteliales vasculares contienen al menos tres integrinas dependientes de RGD, entre las que se incluyen los receptores de vitronectina avº3 o avº5, así como los receptores de colágeno de tipos I y IV avº1 y

a2º1, los receptores de laminina a6º1 y a3º1 y el receptor de fibronectina a5º1 (Davis y col., 1993, J. Cell. Biochem. 51, 206) . Se sabe que las células del músculo liso contienen al menos seis integrinas dependientes de RGD, que incluyen avº3 y avº5.

La inhibición de la adhesión celular in vitro con anticuerpos monoclonales inmunoespecíficos para diversas subunidades a o º de las integrinas ha implicado al receptor de vitronectina avº3 en procesos de adhesión celular

de diversos tipos celulares como las células endoteliales microvasculares (Davis y col., 1993, J. Cell. Biol. 51, 206) .

Las integrinas son una clase de receptores celulares conocidos por unirse a las proteínas de la matriz extracelular y mediar en las interacciones célula-célula y célula-matriz extracelular, denominadas en general acontecimientos de adhesión celular. Los receptores de integrinas constituyen una familia de proteínas con características estructurales compartidas de complejos glucoproteicos heterodiméricos no covalentemente asociados formados por subunidades 25 a y º. El receptor de vitronectina, cuyo nombre se debe a su característica original de unión preferente a vitronectina, ahora se sabe que hace referencia a cuatro integrinas distintas denominadas avº1, avº3, avº5 y avº8. La integrina avº1 se une a fibronectina y a vitronectina, avº3 se une a una gran variedad de ligandos, como fibrina, fibrinógeno, laminina, trombospondina, vitronectina y factor de von Willebrand y avº5 se une a vitronectina. Es evidente que existen diferentes integrinas con diferentes funciones biológicas, así como diferentes integrinas y 30 subunidades con especificidad y función biológicas compartidas. Un sitio de reconocimiento importante en un ligando para muchas integrinas es la secuencia tripeptídica Arg-Gly-Asp (RGD) . RGD se encuentra en todos los ligandos identificados anteriormente para las integrinas receptoras de vitronectina. Se ha identificado la base molecular del reconocimiento de RGD por avº3 (Xiong y col., 2001) . Este sitio de reconocimiento RGD se puede mimetizar mediante (poli) péptidos lineales y cíclicos que contengan la secuencia RGD. Estos péptidos RGD son 35 conocidos como inhibidores o antagonistas, respectivamente, de la función integrina. Es importante destacar, sin embargo, que dependiendo de la secuencia y estructura del péptido RGD, la especificidad de la inhibición puede verse alterada para dirigirse a integrinas específicas. Se han descrito diversos polipéptidos con RGD con distinta especificidad por integrinas, por ejemplo, en Cheresh, y col., 1989, Cell 58, 945, Aumailley y col., 1991, FEBS Letts. 291, 50, y en numerosas solicitudes de patente y en patentes (p. ej., las patentes de EE. UU. 4.517.686,

4.578.079, 4.589.881, 4.614.517, 4.661.111, 4.792.525 y el documento EP 0770 622) .

La generación de nuevos vasos sanguíneos, o angiogénesis, tiene un papel fundamental en el crecimiento de enfermedades malignas, lo que ha generado mucho interés en el desarrollo de fármacos que inhiben la angiogénesis.

No obstante, aunque diversas politerapias que utilizan posibles inhibidores de la angiogénesis están en 45 investigación, en ensayos clínicos y en el mercado, el resultado de estas terapias no es lo suficientemente fructífero. Por tanto, continúa existiendo la necesidad en la técnica de desarrollar más combinaciones que puedan demostrar mayor eficacia y menos efectos secundarios.

Hoy en día se sabe que la vasculatura tumoral es diferente de la vasculatura del tejido sano. La vasculatura es característica del tumor y distinta a la vasculatura estable y latente del tejido sano. A menudo se caracteriza por un 50 aumento en la expresión y sensibilización de moléculas de adhesión celular específicas de la serie de integrinas alfa-v, especialmente avº3 y avº5. Cuando estas integrinas se activan potencian la respuesta celular a los factores de crecimiento que dirigen la angiogénesis, por ejemplo, VEGFA y FGF2: VEGFA se denominó originalmente factor de permeabilidad vascular y actúa a través de la ruta de la SRC quinasa aumentando la permeabilidad vascular local. VEGRF2, cuando se activa, aumenta la actividad de la integrina avº3. Adicionalmente, los tumores sólidos dependen de una vasculatura inducida y confinada desarrollada a partir del huésped. Esta vasculatura tiene propiedades moleculares inusuales que la distinguen de la vasculatura normal del huésped: tiende a activarse, es decir, progresa por medio del ciclo celular bajo la influencia de factores derivados del tumor, como los VEGF, los FGF y otros factores y expresa marcadores de activación endotelial como ICAM, VCAM e integrinas de las series alfa-v,

por ejemplo, av 3 y av 5, en un estado competente del ligando. Tiene una matriz extracelular defectuosa y se describe clásicamente como agujereada. Es de destacar que los tumores a menudo resisten a terapias aplicadas sistémicamente a través del torrente circulatorio debido a la naturaleza anómala de la vasculatura tumoral.

El proceso metastásico es un acontecimiento en varias etapas y representa el aspecto más atroz del cáncer. En el momento del diagnóstico, los cánceres están con frecuencia bastante avanzados en su evolución natural y la 10 presencia de metástasis es un acontecimiento común. De hecho, aproximadamente el 30% de los pacientes presenta metástasis detectables en el momento del diagnóstico clínico y otro 30% de los pacientes tiene metástasis ocultas. Las metástasis pueden diseminarse y pueden invadir diferentes órganos al mismo tiempo, o localizarse en un órgano específico. En el caso de enfermedad localizada, el tratamiento de elección es la cirugía; sin embargo, la recurrencia y el pronóstico dependen de muchos criterios como: capacidad de resección, situación clínica del

paciente y número de metástasis.

Tras la resección, es frecuente la recurrencia, lo que sugiere que los focos micrometastásicos están presentes en el momento del diagnóstico. La quimioterapia sistémica es un marco ideal pero solo algunos pacientes se curan gracias a ella, fracasando en la mayoría de casos. Muchas barreras fisiológicas y parámetros farmacocinéticos contribuyen a disminuir su eficacia.

El hígado, los pulmones y los ganglios linfáticos son órganos de filtración y, por tanto, predispuestos a la metastatización. La escasa quimiosensibilidad de las metástasis, especialmente las de origen colorrectal, ha inducido a muchos investigadores a utilizar métodos para aumentar el tiempo y la concentración de fármacos. La necesidad de disminuir o limitar los efectos secundarios para este órgano importante y delicado ha llevado al desarrollo de la técnica de aislamiento del hígado para la perfusión de agentes antineoplásicos. (K. R. Aigner,

Isolated liver perfusion. En: Morris DL, McArdle CS, Onik GM, eds. Hepatic Metastases. Oxford: Butterworth Heinemann, 1996. 101-107) . Desde 1981, se han introducido continuamente modificaciones y mejoras técnicas. Las metástasis hepáticas pueden ser de diferente origen y su quimiosensibilidad puede variar según el tipo histológico y su respuesta en presencia de calor.

Sigue existiendo en la técnica una necesidad creciente de desarrollar nuevas estrategias terapéuticas para el 30 tratamiento sistémico del cáncer, especialmente las metástasis.

Por tanto, el objeto de la presente invención era desarrollar esta nueva estrategia. Debería ser... [Seguir leyendo]

1. Uso de al menos un ligando específico de integrinas, seleccionado entre ciclo- (Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) y los solvatos y sales farmacéuticamente aceptables del mismo, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de astrocitoma, en el que el medicamento se usa en combinación con temozolomida y

radioterapia.

2. Uso según la reivindicación 1, en el que el astrocitoma es glioblastoma o glioblastoma multiforme.

3. Uso según las reivindicaciones 1 y/o 2, en el que la radioterapia es radiación de haz externo fraccionada.

4. Uso según una o más de las reivindicaciones de la1 a la 3, en el que dicho ligando específico de integrinas se aplica sustancialmente de forma concurrente o secuencial a la temozolomida y/o la radioterapia.

5. Uso según una o más de las reivindicaciones de la 1 a la 4, en el que al menos un ligando de integrinas es ciclo- (Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) .

6. Uso según una o más de la reivindicaciones de la 1 a la 5, en el que al menos uno de los ligandos específicos de integrinas se administra de 1 a 8 horas (h) antes de la aplicación de la radioterapia y/o la temozolomida.

7. Uso según se reivindica en una o más de las reivindicaciones de la 1 a la 6, en el que al menos uno de los

ligandos específicos de integrinas se administra de 2 a 6 horas antes de la aplicación de la radioterapia y/o la temozolomida.

8. Uso según la reivindicación 1, en el que al menos un ligando específico de integrinas que comprende el ciclo (Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) , los solvatos y/o sales farmacéuticamente aceptables del mismo se usa para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de astrocitoma, en el que el medicamento se usa en combinación con radioterapia, en el que al menos el ligando específico de integrinas ciclo- (Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) , los solvatos y/o sales farmacéuticamente aceptables del mismo se administran de 1 a 10 horas antes de la aplicación de la radioterapia y en el que se aplica al menos un agente antineoplásico coterapéutico que comprende temozolomida.

9. Uso según la reivindicación 1, en el que al menos un ligando específico de integrinas, que comprende ciclo

(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) , se usa para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de glioblastoma multiforme, en el que el medicamento se usa en combinación con temozolomida y radioterapia.

10. Uso según las reivindicaciones 8 y/o 9, en el que la radioterapia es radiación de haz externo.

11. Uso según una o más de las reivindicaciones 1, 2, 3, 4, 5, 9 y 10, en el que al menos el ligando específico de

integrinas se aplica de 1 a 32 horas antes de la aplicación de uno o más agentes antineoplásicos 30 coterapéuticos adicionales y/o radioterapia.

12. Uso según la reivindicación 1, en el que al menos un ligando específico de integrinas que comprende el ciclo (Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) , los solvatos y/o sales farmacéuticamente aceptables del mismo se usan para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de astrocitoma, en el que el medicamento se usa en combinación con temozolomida y radioterapia, y en el que al menos el ligando específico de integrinas ciclo

(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) y los solvatos y/o sales farmacéuticamente aceptables del mismo se administran a un paciente en una cantidad de 800 a 7000 mg a la semana.

13. Uso según una o más de las reivindicaciones precedentes, en el que ciclo- (Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) se administra a un paciente en una cantidad de aproximadamente 1000 mg a la semana, aproximadamente 1500 mg a la semana, aproximadamente 2500 mg a la semana, aproximadamente 4000 mg a la semana o aproximadamente 6000 mg a la semana.

14. Uso según una o más de las reivindicaciones precedentes, en el que la cantidad de aproximadamente 1000 mg por semana o aproximadamente 4000 mg por semana se administra en un programa de administración dos veces a la semana y la cantidad de aproximadamente 1500 mg por semana o aproximadamente 6000 mg por semana se administra en un programa de administración de tres veces por semana.

15. Uso según una o más de la reivindicaciones precedentes, en el que la cantidad de aproximadamente 1000 mg por semana se administra en un programa de administración de dos veces por semana consistente en aproximadamente 500 mg por administración o la cantidad de aproximadamente 4000 mg por semana se administra en un programa de administración de dos veces por semana de aproximadamente 2000 mg por administración.

16. Uso según una o más de las reivindicaciones precedentes, en el que al menos un ligando específico de integrinas ciclo- (Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) , los solvatos y/o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, 5 se administra de 2 a 8 horas o de 3 a 8 horas antes de la aplicación de la radioterapia.

17. Uso según una o más de las reivindicaciones 8 y de la 10 a la 16, en el que adicionalmente se aplica un agente antineoplásico coterapéutico adicional, seleccionado entre cisplatino, oxaliplatino, carboplatino, 5-FU, dacarbazina, procarbazina, vinblastina, vincristina, irinotecán, taxol, paclitaxel, docetaxel, gemcitabina, gleevec, iressa, tarceva y nexavar, Herceptin, bevacizumab, cetuximab, nimotuzumab, sorafenib, sunitinib y

ZD6474 (ZACTIMA™) , o seleccionado entre cisplatino, oxaliplatino, vinblastina, taxol, gemcitabina, gleevec e iressa.

18. Uso según una o más de las reivindicaciones precedentes, en el que el medicamento se usa en el tratamiento de paciente que presentan un aumento del estado de metilación del ADN.

19. Uso según una o más de las reivindicaciones precedentes, en el que el medicamento se usa en el tratamiento

de pacientes que muestran una metilación parcial o completa de al menos un promotor de al menos un gen de MGMT.

20. Uso según una o más de las reivindicaciones precedentes, en el que el medicamento se usa en el tratamiento de cáncer recién diagnosticado, preferiblemente en el ámbito de un tratamiento de primera línea.

21. Ciclo- (Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) para uso en el tratamiento de astrocitoma en combinación con 20 temozolomida y radioterapia.

22. Ciclo- (Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) para uso según la reivindicación 21, en el que el astrocitoma es glioblastoma o glioblastoma multiforme.

23. Ciclo- (Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) para uso según las reivindicaciones 21 y/o 22, en el que la radioterapia es radiación de haz externo fraccionada.

24. Ciclo- (Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) para uso según las reivindicaciones 21, 22 y/o 23, en el que dicho ciclo (Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) se aplica sustancialmente de forma concurrente o secuencial a la temozolomida y/o la radioterapia.

25. Ciclo- (Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) para uso según las reivindicaciones 21, 22, 23 y/o 24, en el que dicho ciclo

(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) se administra de 1 a 8 horas (h) antes de la aplicación de la radioterapia y/o la 30 temozolomida.

26. Ciclo- (Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) para uso según las reivindicaciones 21, 22, 23, 24 y/o 25, en el que dicho ciclo- (Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) se administra de 2 a 6 horas antes de la aplicación de la radioterapia y/o la temozolomida.

Figura 1

Curvas de supervivencia de Kaplan-Meier de ratas desnudas portadoras de células U251 derivadas de glioblastoma ortotópico humano.

El cuadrado negro representa la supervivencia de los animales no irradiados.

Figura 2