Inmunoterapia para pacientes con inmunosupresión.

Una composición que comprende un portador farmacéutico aceptable y una mixtura de citoquinas naturalespreparada en presencia continua de un antibiótico de 4-aminoquinolona y en presencia continua o pulsada de unmitógeno,

conteniendo la mixtura de citoquinas naturales como componentes activos las citoquinas IL-1, IL-2, IL-6,IL-8, IFN-γ, y TNF-α, donde la IL-1 se halla a una concentración de 60 a 6.000 pcg por ml, la IL-2 se halla a unaconcentración 600 a 60.000 pcg por ml, la IL-6 se halla a una concentración de 60 a 6.000 pcg por ml, la IL-8 sehalla a una concentración de 6.000 a 600.000 pcg por ml y el INF-γ y TNF-α se hallan a una concentración de 200 a20.000 pcg por ml, para uso en el tratamiento de la inmunodeficiencia celular caracterizada por linfocitopenia T, poruno o más defectos funcionales de las células dendríticas, o por uno o más defectos funcionales de los monocitos,en donde el tratamiento comprende administración de dicha mixtura por sin administración acompañante deciclofosfamida o indometacina.

Inmunoterapia para pacientes con inmunosupresión.

La invención se refiere al tratamiento de la inmunodeficiencia celular caracterizada por linfocitopenia T, uno o más defectos funcionales de las células dendríticas (v.g. los asociados con histiocitosis sinusal de los ganglios linfáticos) y/o uno o más defectos funcionales de los monocitos (v.g. los asociados con un test de piel de CMI (inmunidad mediada por las células) negativo) .

La inmunodeficiencia celular es una deficiencia de la respuesta inmune en la cual el cuerpo no puede protegerse eficazmente por sí mismo contra los antígenos perniciosos. El sistema inmunitario en esta condición está de hecho desactivado. Tal deficiencia puede ser inducida por fármacos, es decir, por tratamiento con fármacos, inducida por virus (v.g. en el SIDA) , o inducida por un estado de enfermedad tal como el cáncer. La inmunodeficiencia celular es común entre los pacientes de cáncer; el cuerpo no puede protegerse contra los antígenos tumorales, permitiendo que un tumor se desarrolle y produzca metástasis.

La inmunodeficiencia celular, esté relacionada o no con el cáncer, puede ser debida a defectos funcionales de las células T, células dendríticas y/o monocitos. Por ejemplo, uno o más defectos funcionales de las células T se cree que subyacen en la linfocitopenia T, una inmunodeficiencia celular caracterizada por niveles bajos de las células T de la sangre, y función deteriorada de los linfocitos existentes. Hasta la fecha, no existe ninguna vía aceptada generalmente (aprobada clínicamente) para tratar la linfocitopenia T. Los trasplantes de médula ósea (con o sin trasplantes de timo) se han utilizado para la inmunodeficiencia combinada grave (SCID) , tanto si la condición es congénita, como si está inducida por irradiación o quimioterapia. Se ha administrado IL-2 recombinante (rIL-2) a pacientes de SIDA con algún efecto, pero con mucha toxicidad. En general, la eficacia limitada y la importante toxicidad asociada con dosis altas de rIL-2, rIFN-y, rTNF-a, y otras monoterapias, sugiere la reconsideración del uso de combinaciones naturales de citoquinas en estrategias terapéuticas.

Idealmente, para tratar o resolver una inmunodeficiencia celular tal como la linfocitopenia T, se desea el aumento del desarrollo y la proliferación de las células T, es decir, la regeneración de las células T. Sin embargo, se cree generalmente que no pueden ser generadas células T nuevas en el humano adulto. Por ejemplo, Mackall et al. en New England Journal of Medicine, Vol. 332, pp. 143-149 (1995) observaron la incapacidad de los adultos para generar células T nuevas, mientras que los niños retienen generalmente la capacidad de generar tales células. Dado que la linfocitopenia T se observa a menudo en pacientes de cáncer, Mackall et al debaten el problema de intentar restablecer las células T después de la quimioterapia y/o radioterapia del cáncer en adultos. Existen pruebas, sin embargo, de que a continuación del trasplante de médula ósea después de quimioterapia intensa, pueden generarse células T nuevas en los adultos.

Se han utilizado dos enfoques a fin de generar células T nuevas en un intento de corregir la linfocitopenia T, como por ejemplo, en pacientes de cáncer. Un enfoque, la terapia con rIL-2, trata de expandir las células T ya en la periferia, es decir, las células T de memoria que son CD45 RO+, por ejemplo, en la sangre, los ganglios linfáticos, y el bazo. El otro enfoque implica aumentar la producción en el timo de células T nuevas a partir de precursores derivados de médula ósea. Esto sucede naturalmente en los niños, pero no en los adultos. Estas células nuevas se denominan "emigrados tímicos" recientes y tienen el marcador superficial de las células T "naíf", es decir, CD45 RA. El término "células T naif", como se define en esta memoria, hace referencia a células T de nueva producción, incluso en adultos, en donde estas células T no han sido expuestas todavía a un antígeno. Dichas células T son por consiguiente inespecíficas de antígeno, pero son capaces de convertirse en específicas de antígeno después de la presentación de antígeno por una célula dendrítica madura que tenga un antígeno, tal como péptidos tumorales, expuesto en ella.

Si bien se cree que la linfocitopenia T es debida a defectos funcionales de las células T, otras inmunodeficiencias celulares pueden atribuirse a uno o más defectos funcionales de los monocitos o las células dendríticas. Los monocitos se definen en esta memoria como esencialmente sinónimos de las células mononucleares de sangre periférica (PBMCs) adherentes y son precursores de los macrófagos y células dendríticas de origen mieloide.

Los defectos en la función de los monocitos pueden tener efectos de amplio alcance sobre la función inmune. Por ejemplo, dado que los monocitos/macrófagos juegan un papel importante en la generación de la inmunidad mediada por las células y la inflamación, los defectos funcionales de los monocitos pueden correlacionarse con respuestas inmunes negativas o reducidas mediadas por las células, tales como las detectadas por los tests estándar CMI o DTH. La corrección de los defectos funcionales de los monocitos podría promover por tanto respuestas inmunes mediadas por las células en los pacientes, v.g., por mejora de las respuestas proliferativas y citotóxicas de las células Th1.

Adicionalmente, las células dendríticas (DCs) son células presentadoras de antígeno (APCs) altamente especializadas, capaces de establecer y controlar respuestas inmunes primarias (Hart, 1997; Matzinger, 1994; Steinman, 1991) . Las DCs inmaduras residen en tejidos periféricos, donde aquéllas capturan y procesan el antígeno para presentación subsiguiente dentro del contexto de las moléculas del MHC I/II (Banchereau, 2000) . En las DCs ocurren cambios fenotípicos y funcionales después del encuentro con estímulos microbianos, proinflamatorios o derivados de las células T, un proceso al que se hace referencia como maduración. Generalmente, las DCs maduras están asociadas con la inducción de inmunidad comparada con las propiedades tolerogénicas de las DCs inmaduras (Steinman, 2002) . Las características funcionales de las DCs maduras en comparación con las DCs inmaduras incluyen actividad fagocítica/endocítica reducida y aumento subsiguiente en la presentación de antígeno, una pérdida de expresión del antígeno CD1a y ganancia de expresión del antígeno CD83, expresión incrementada de antígenos MHC II, y expresión incrementada de moléculas co-estimuladoras y de adhesión tales como CD86, CD40, y CD54 (Celia, 1996; Cella, 1997; Schnurr, 2000; Berchtold, 1999) . El efecto acumulativo de estos cambios da como resultado que las DC maduras tengan capacidad para migrar a las áreas de células T de los órganos linfoides de drenaje, donde aquéllas encuentran células T naif y presentan antígeno y moléculas co-estimuladoras a las células T, lo cual inicia una respuesta inmune adaptativa eficaz (Randolph, 2001; Sozzani, 1998) .

La función deteriorada de las DCs en los hospedadores que padecen cáncer ha sido establecida para varios tipos de cánceres, que incluyen cáncer de cabeza y cuello de células escamosas (al que se hace referencia en lo sucesivo como "H&NSCC") , de pulmón, de células renales, de mama y colorrectal (Gabrilovich, 1997; Chaux, 1996; Almand, 2000; Nestle, 1997; Tas, 1993; Thurnher, 1996; Hoffmann, 2002) . Defectos caracterizados de las células DC dan como resultado un fallo en la presentación eficaz y exitosa de los antígenos tumorales a las células T, y tales defectos pueden caracterizarse de diversas maneras que incluyen regulación decreciente de componentes de la maquinaria procesadora de antígenos, expresión reducida de moléculas coestimuladoras y una reducción en el número de DCs que infiltran el tumor (Whiteside, 2004; Gabrilovich, 1997; Choux, 1997) . Los pacientes de cáncer exhiben también una disminución de los números absolutos de DCs maduras en los ganglios periféricos sanguíneos y linfáticos (Hoffmann, 2002; Almand, 2000) . Se ha demostrado que VEGF, un factor soluble secretado comúnmente por los tumores, aumenta la inducción de apoptosis en las DCs y está correlacionado negativamente con los números de DC en el tejido tumoral y la sangre periférica de pacientes con tipos de cáncer muy diferentes, con inclusión de H&NSCC (Lissoni, 2001; Saito, 1998; Smith, 2000) . Globalmente, una falta de función DC impacta negativamente en las estrategias inmunoterapéuticas actuales y está correlacionada con resultados clínicos insatisfactorios. La corrección de los defectos funcionales de las células dendríticas podría aumentar el número de células dendríticas maduras que puedan interaccionar... [Seguir leyendo]

1. Una composición que comprende un portador farmacéutico aceptable y una mixtura de citoquinas naturales preparada en presencia continua de un antibiótico de 4-aminoquinolona y en presencia continua o pulsada de un mitógeno, conteniendo la mixtura de citoquinas naturales como componentes activos las citoquinas IL-1, IL-2, IL-6, IL-8, IFN-y, y TNF-a, donde la IL-1 se halla a una concentración de 60 a 6.000 pcg por ml, la IL-2 se halla a una concentración 600 a 60.000 pcg por ml, la IL-6 se halla a una concentración de 60 a 6.000 pcg por ml, la IL-8 se halla a una concentración de 6.000 a 600.000 pcg por ml y el INF-y y TNF-a se hallan a una concentración de 200 a 20.000 pcg por ml, para uso en el tratamiento de la inmunodeficiencia celular caracterizada por linfocitopenia T, por uno o más defectos funcionales de las células dendríticas, o por uno o más defectos funcionales de los monocitos, en donde el tratamiento comprende administración de dicha mixtura por sin administración acompañante de ciclofosfamida o indometacina.

2. La composición para uso según la reivindicación 1, en donde la IL-1 se halla a una concentración de 150 a 1200 pcg por ml, la IL-2 se halla a una concentración 3000 a 12.000 pcg por ml, la IL-6 se halla a una concentración de 300 a 2.000 pcg por ml, la IL-8 se halla a una concentración de 20.000 a 180.000 pcg por ml y el INF-y y TNF-a se hallan a una concentración de 1000 a 4.000 pcg por ml.

3. Una composición para uso según la reivindicación 1 o 2, en la cual la mixtura comprende además y el E-12, GM-CSF, y G-CSF.

4. Una composición para uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde la mixtura de citoquinas es para administración a una concentración de 40 a 500 unidades de equivalencia de IL-2.

5. Una composición para uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde los defectos funcionales de los monocitos se han determinado por un test de piel negativo para dicha mixtura de citoquinas.

6. Una composición para uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde los defectos funcionales de las células dendríticas están asociados con histiocitosis sinusal de los ganglios linfáticos.

7. Una composición para uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en donde el tratamiento se realiza durante la recurrencia de tumores

Figura 8 Figura 9

Figura 16

Figura 17